| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 符号说明 | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第11-25页 |
| 1.1 研究现状 | 第11-23页 |
| 1.1.1 抗菌肽概述 | 第11-12页 |
| 1.1.2 抗菌肽的合成 | 第12页 |
| 1.1.3 核糖体肽合成 | 第12-14页 |
| 1.1.4 非核糖体肽合成 | 第14-18页 |
| 1.1.5 非核糖体肽/聚酮杂合途径 | 第18-21页 |
| 1.1.6 侧孢短芽孢杆菌研究现状 | 第21-23页 |
| 1.2 目的意义 | 第23页 |
| 1.3 本研究的主要内容 | 第23-25页 |
| 1.3.1 主要研究内容 | 第23-24页 |
| 1.3.2 技术路线 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-37页 |
| 2.1 试验材料 | 第25-27页 |
| 2.1.1 试验菌株 | 第25页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.3 培养基和相关试剂的配置 | 第26页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第26-27页 |
| 2.2 试验方法 | 第27-37页 |
| 2.2.1 质粒的提取 | 第27页 |
| 2.2.2 TAIL-PCR的引物设计 | 第27-28页 |
| 2.2.3 高效TAIL-PCR | 第28-30页 |
| 2.2.4 PCR片段回收 | 第30页 |
| 2.2.5 片段连接、转化、验证、测序 | 第30-31页 |
| 2.2.6 序列拼接与基因分析 | 第31页 |
| 2.2.7 同源重组（融合PCR）引物设计 | 第31-33页 |
| 2.2.8 上、下同源臂片段的扩增 | 第33页 |
| 2.2.9 融合PCR扩增融合片段 | 第33页 |
| 2.2.10 融合片段的连接、转化、测序 | 第33-34页 |
| 2.2.11 敲除载体的构建 | 第34页 |
| 2.2.12 侧孢短芽孢杆菌S62-9 感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
| 2.2.13 侧孢短芽孢杆菌S62-9 感受态细胞的电击转化 | 第35页 |
| 2.2.14 敲除突变体的筛选及性状的验证 | 第35-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-55页 |
| 3.1 TAIL-PCR 5＇扩增结果 | 第37-39页 |
| 3.2 序列拼接及分析 | 第39-42页 |
| 3.3 决定基因簇结构特征分析 | 第42-48页 |
| 3.4 NRPS-A基因敲除 | 第48-55页 |
| 3.4.1 融合片段的扩增 | 第48-49页 |
| 3.4.2 敲除载体的构建 | 第49-50页 |
| 3.4.3 侧孢短芽孢杆菌S62-9 感受态的制备 | 第50-51页 |
| 3.4.4 缺失突变体的筛选及性状的验证 | 第51-55页 |
| 4 讨论 | 第55-57页 |
| 4.1 抗菌肽BBL的生物合成 | 第55-56页 |
| 4.2 侧孢短芽孢杆菌S62-9 的转化方法 | 第56-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 作者简介 | 第63-64页 |
| 附件 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 详细摘要 | 第66-67页 |
