| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7页 |
| 第一章 引言 | 第12-19页 |
| 1.1 禽流感病毒简介 | 第12页 |
| 1.2 流感病毒NS1蛋白对干扰素抑制作用的研究 | 第12-16页 |
| 1.2.1 NS1蛋白与RNA结合 | 第13-14页 |
| 1.2.2 NS1蛋白与RIG-I结合 | 第14页 |
| 1.2.3 NS1蛋白与TRIM25结合 | 第14页 |
| 1.2.4 NS1蛋白与IKK结合 | 第14页 |
| 1.2.5 NS1蛋白与CPSF30结合 | 第14-15页 |
| 1.2.6 NS1蛋白与PKR结合 | 第15-16页 |
| 1.2.7 NS1蛋白与PABPⅡ相互作用 | 第16页 |
| 1.2.8 NS1蛋白其他抑制干扰素的途径 | 第16页 |
| 1.3 流感病毒NS1蛋白抑制细胞凋亡的研究 | 第16-17页 |
| 1.4 流感病毒NS1蛋白缺失疫苗的研究 | 第17页 |
| 1.5 流感病毒NS1蛋白C端缺失113个氨基酸相关报道 | 第17-18页 |
| 1.6 研究的目的与意义 | 第18-19页 |
| 第二章 H5亚型禽流感病毒NS1蛋白C端缺失对毒力的影响 | 第19-27页 |
| 2.1 材料与方法 | 第19-20页 |
| 2.1.1 细胞与毒株 | 第19页 |
| 2.1.2 主要仪器和试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 实验动物及相关措施 | 第19页 |
| 2.1.4 病毒拯救 | 第19页 |
| 2.1.5 病毒纯化 | 第19页 |
| 2.1.6 IVPI测定 | 第19-20页 |
| 2.1.7 鸡胚半数致死量(EID50)测定 | 第20页 |
| 2.1.8 病毒复制动力学曲线 | 第20页 |
| 2.1.9 BALB/c小鼠致病性试验 | 第20页 |
| 2.1.10 SPF鸡致病性试验 | 第20页 |
| 2.2 实验结果 | 第20-26页 |
| 2.2.1 病毒拯救结果 | 第20-21页 |
| 2.2.2 NS1/112病毒复制动力学曲线 | 第21-22页 |
| 2.2.3 NS1/112病毒对BALB/c小鼠致病性 | 第22-25页 |
| 2.2.4 NS1/112病毒对SPF鸡致病性 | 第25-26页 |
| 2.3 讨论 | 第26页 |
| 2.4 小结 | 第26-27页 |
| 第三章 NS1蛋白C端缺失影响病毒复制能力机制初步探究 | 第27-38页 |
| 3.1 材料与方法 | 第27-32页 |
| 3.1.1 细胞与试剂 | 第27页 |
| 3.1.2 PCR扩增 | 第27-28页 |
| 3.1.3 限制性内切酶进行双酶切 | 第28页 |
| 3.1.4 DNA片段与载体连接 | 第28页 |
| 3.1.5 细菌的转化 | 第28页 |
| 3.1.6 阳性克隆的筛选 | 第28页 |
| 3.1.7 RNA提取 | 第28-29页 |
| 3.1.8 RNA反转录 | 第29页 |
| 3.1.9 实时荧光定量PCR实验 | 第29-30页 |
| 3.1.10 细胞转染 | 第30页 |
| 3.1.11 蛋白免疫印迹 | 第30-31页 |
| 3.1.12 双荧光素酶报告基因实验 | 第31页 |
| 3.1.13 病毒诱导干扰素能力检测 | 第31页 |
| 3.1.14 细胞凋亡检测 | 第31-32页 |
| 3.2 实验结果 | 第32-37页 |
| 3.2.1 NS1/112蛋白抑制IFN-β/ISRE/NF-κB/MX启动子活化能力减弱 | 第32页 |
| 3.2.2 NS1/112病毒诱导IFN及ISGs转录能力增强 | 第32-35页 |
| 3.2.3 NS1/112病毒诱导IFN及ISG表达能力增强 | 第35-36页 |
| 3.2.4 NS1/112病毒诱导细胞凋亡的能力增强 | 第36-37页 |
| 3.3 讨论 | 第37页 |
| 3.4 小结 | 第37-38页 |
| 第四章 全文结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 作者简历 | 第46页 |
