| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7页 |
| 第一章 引言 | 第12-18页 |
| 1.1 猫细小病毒病研究进展 | 第12-15页 |
| 1.1.1 猫细小病毒粒子特性 | 第12页 |
| 1.1.2 猫细小病毒基因组的结构与功能 | 第12-13页 |
| 1.1.3 猫细小病毒的培养特性 | 第13页 |
| 1.1.4 猫细小病毒血凝特性 | 第13-14页 |
| 1.1.5 猫细小病毒流行病学 | 第14页 |
| 1.1.6 猫细小病毒的致病机制、临床症状和病理变化 | 第14-15页 |
| 1.1.7 猫细小病毒的防治 | 第15页 |
| 1.2 猫细小病毒与犬细小病毒的共同特征与亲缘差异 | 第15-16页 |
| 1.3 基因工程嵌合抗体 | 第16-17页 |
| 1.4 研究目的及意义 | 第17-18页 |
| 第二章 猫细小病毒单克隆抗体的制备 | 第18-24页 |
| 2.1 材料与方法 | 第18-19页 |
| 2.1.1 实验动物、细胞和病毒株 | 第18页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第18页 |
| 2.1.3 病毒培养及纯化 | 第18页 |
| 2.1.4 单克隆抗体(MAb)的制备 | 第18-19页 |
| 2.1.4.1 小鼠免疫 | 第18页 |
| 2.1.4.2 间接ELISA的建立 | 第18-19页 |
| 2.1.4.3 细胞融合及阳性杂交瘤的筛选 | 第19页 |
| 2.1.4.4 单克隆抗体(MAb)的间接免疫荧光(IFA)鉴定 | 第19页 |
| 2.1.5 FPV和CPV病毒的TCID50的测定 | 第19页 |
| 2.1.6 MAb对FPV和CPV的中和活性测定 | 第19页 |
| 2.2 结果分析 | 第19-22页 |
| 2.2.1 间接ELISA的建立 | 第19-20页 |
| 2.2.2 抗FPV特异性单克隆抗体细胞的筛选 | 第20-21页 |
| 2.2.3 单克隆抗体的间接免疫荧光(IFA)鉴定 | 第21页 |
| 2.2.4 FPV和CPV病毒的TCID50的测定 | 第21-22页 |
| 2.2.5 MAb的中和活性测定 | 第22页 |
| 2.3 结论与讨论 | 第22-24页 |
| 2.3.1 单克隆抗体研究进展 | 第22页 |
| 2.3.2 抗FPV、CPV单克隆抗体抗的临床应用潜力 | 第22-24页 |
| 第三章 犬天然抗体克隆及序列分析研究 | 第24-30页 |
| 3.1 材料与方法 | 第24页 |
| 3.2 结果 | 第24-28页 |
| 3.3 分析与讨论 | 第28-30页 |
| 第四章 犬源化基因工程抗体改造及表达 | 第30-36页 |
| 4.1 材料与方法 | 第30-31页 |
| 4.1.1 样品、载体及细胞 | 第30页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第30页 |
| 4.1.3 提取杂交瘤细胞mRNA并反转录成cDNA | 第30页 |
| 4.1.6 重组嵌合抗体基因构建 | 第30页 |
| 4.1.7 将重组的抗体重轻链基因使用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达 | 第30-31页 |
| 4.1.8 重组IgG纯化后SDS-PAGE结果及Western-blot结果 | 第31页 |
| 4.1.9 重组IgG的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)鉴定 | 第31页 |
| 4.1.10 鼠-犬重组IgG的间接免疫荧光(IFA)鉴定 | 第31页 |
| 4.1.11 嵌合抗体对FPV和CPV的中和活性测定 | 第31页 |
| 4.2 结果 | 第31-35页 |
| 4.2.1 鼠-犬重组IgG的构建及pFastBac-Dual重组杆状病毒穿梭载体质粒的构建 | 第31-32页 |
| 4.2.2 重组IgG纯化后SDS-PAGE结果及Western-blot结果 | 第32-33页 |
| 4.2.3 重组IgG的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)鉴定 | 第33-34页 |
| 4.2.4 鼠-犬重组IgG的间接免疫荧光(IFA)鉴定 | 第34页 |
| 4.2.5 嵌合抗体中和活性测定 | 第34-35页 |
| 4.3 分析与讨论 | 第35-36页 |
| 4.3.1 昆虫杆状病毒表达系统的优点 | 第35页 |
| 4.3.2 嵌合抗体的临床应用前景 | 第35-36页 |
| 第五章 全文结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 作者简历 | 第43页 |
