| 中文摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3页 |
| 第1章 前言 | 第7-23页 |
| 1.1 脂肪酶简介 | 第7-12页 |
| 1.1.1 微生物脂肪酶的分子结构及催化机制 | 第7-11页 |
| 1.1.2 脂肪酶的生产方法 | 第11-12页 |
| 1.1.3 脂肪酶活力的测定方法 | 第12页 |
| 1.2 产脂肪酶微生物及其筛选方法 | 第12-15页 |
| 1.2.1 产脂肪酶微生物 | 第12-13页 |
| 1.2.2 产脂肪酶微生物的筛选方法 | 第13-15页 |
| 1.3 提高脂肪酶产量及稳定性的方法 | 第15-16页 |
| 1.3.1 提高脂肪酶产量的方法 | 第15-16页 |
| 1.3.2 提高脂肪酶稳定性的方法 | 第16页 |
| 1.4 脂肪酶的分子生物学研究进展 | 第16-18页 |
| 1.5 脂肪酶的应用 | 第18-21页 |
| 1.5.1 在食品加工方面的应用 | 第18页 |
| 1.5.2 在手性化合物制备中的应用 | 第18-19页 |
| 1.5.3 在医药工业中的应用 | 第19页 |
| 1.5.4 在环境治理方面的应用 | 第19页 |
| 1.5.5 在生物柴油制备中的应用 | 第19-21页 |
| 1.6 本试验研究的目的和意义及主要内容 | 第21-23页 |
| 1.6.1 本试验研究的目的和意义 | 第21页 |
| 1.6.2 本试验研究主要内容 | 第21-23页 |
| 第2章 材料与方法 | 第23-39页 |
| 2.1 试验材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 样品 | 第23页 |
| 2.1.2 菌株及质粒 | 第23页 |
| 2.1.3 培养基 | 第23-24页 |
| 2.1.4 主要生化与分子生物学试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第25-26页 |
| 2.2 试验方法 | 第26-39页 |
| 2.2.1 产脂肪酶菌株的分离 | 第26-28页 |
| 2.2.2 脂肪酶产生菌的鉴定 | 第28-32页 |
| 2.2.3 脂肪酶产生菌发酵产酶条件的优化 | 第32-34页 |
| 2.2.4 脂肪酶产生菌脂肪酶酶学性质的研究 | 第34-35页 |
| 2.2.5 脂肪酶基因(lip 7)克隆及其在毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中表达 | 第35-39页 |
| 第3章 结果与分析 | 第39-64页 |
| 3.1 产脂肪酶菌株的分离 | 第39页 |
| 3.1.1 初筛 | 第39页 |
| 3.1.2 复筛 | 第39页 |
| 3.2 脂肪酶产生菌株HDY-76的分类鉴定 | 第39-45页 |
| 3.2.1 形态学观察 | 第39-41页 |
| 3.2.2 分子生物学鉴定 | 第41-45页 |
| 3.3 菌株HDY-76发酵产酶条件的优化 | 第45-55页 |
| 3.3.1 菌株生长和产酶特征曲线 | 第45-47页 |
| 3.3.2 单因素试验 | 第47-54页 |
| 3.3.3 正交试验 | 第54-55页 |
| 3.4 菌株HDY-76脂肪酶酶学性质研究 | 第55-59页 |
| 3.4.1 pH对脂肪酶活性的影响 | 第55-56页 |
| 3.4.2 温度对脂肪酶活性的影响 | 第56-57页 |
| 3.4.3 金属离子对脂肪酶活性的影响 | 第57页 |
| 3.4.4 脂肪酶稳定性的研究 | 第57-59页 |
| 3.5 脂肪酶基因(lip7)的克隆与表达 | 第59-64页 |
| 3.5.1 脂肪酶基因(lip7)的克隆 | 第59-61页 |
| 3.5.2 毕赤酵母表达载体pGAPHαM- lip7构建 | 第61-63页 |
| 3.5.3 毕赤酵母(Pichia pastoris)的转化 | 第63-64页 |
| 第4章 讨论 | 第64-68页 |
| 4.1 脂肪酶产生菌的分离与鉴定 | 第64页 |
| 4.1.1 脂肪酶产生菌的分离 | 第64页 |
| 4.1.2 脂肪酶产生菌的鉴定 | 第64页 |
| 4.2 脂肪酶活力的测定 | 第64-65页 |
| 4.3 发酵培养基及培养条件对脂肪酶产量的影响 | 第65-67页 |
| 4.3.1 培养基成分对脂肪酶产量的影响 | 第65-66页 |
| 4.3.2 培养条件对脂肪酶产量的影响 | 第66-67页 |
| 4.4 脂肪酶基因的克隆与表达 | 第67-68页 |
| 第5章 结论 | 第68-69页 |
| 第6章 本论文的主要创新点 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第81-82页 |
| 攻读硕士学位期间参与研究课题情况 | 第82-83页 |
