摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 文献综述 | 第14-24页 |
1.1 玉米弯孢叶斑病研究概况 | 第14-16页 |
1.1.1 玉米弯孢叶斑病发生与危害 | 第14页 |
1.1.2 玉米抗弯孢叶斑病菌的研究进展 | 第14-16页 |
1.2 植物miRNA研究进展 | 第16-19页 |
1.2.1 miRNA生物合成 | 第16-17页 |
1.2.2 植物miRNA的作用方式 | 第17-18页 |
1.2.3 miRNA响应植物抗病 | 第18-19页 |
1.3 植物miRNA及靶基因的研究方法 | 第19-22页 |
1.3.1 高通量测序 | 第19-21页 |
1.3.2 miRNA芯片 | 第21页 |
1.3.3 miRNA及其靶基因表达分析 | 第21页 |
1.3.4 5 '-RLM-RACE | 第21-22页 |
1.3.5 瞬时表达验证miRNA功能 | 第22页 |
1.4 研究目的与意义 | 第22-24页 |
2 材料与方法 | 第24-34页 |
2.1 材料 | 第24-26页 |
2.1.1 供试玉米品种 | 第24页 |
2.1.2 供试菌株 | 第24页 |
2.1.3 主要试剂和仪器 | 第24-25页 |
2.1.4 引物 | 第25-26页 |
2.2 方法 | 第26-34页 |
2.2.1 接种玉米处理 | 第26页 |
2.2.2 新月弯孢菌孢子悬浮液制备 | 第26页 |
2.2.3 接种处理与取样 | 第26-27页 |
2.2.4 玉米弯孢叶斑病病害调查和统计方法 | 第27页 |
2.2.5 RNA提取 | 第27-28页 |
2.2.6 小RNA测序文库构建 | 第28-29页 |
2.2.7 miRNA芯片分析方法 | 第29-30页 |
2.2.8 降解组测序 | 第30-31页 |
2.2.9 qRT-PCR分析miRNA及其靶基因 | 第31-34页 |
3 结果与分析 | 第34-60页 |
3.1 接种后玉米发病情况调查 | 第34-35页 |
3.2 miRNA测序结果分析 | 第35-40页 |
3.2.1 新月弯孢菌诱导产生的玉米miRNA鉴定与分析结果 | 第35-37页 |
3.2.2 玉米已知miRNA鉴定结果 | 第37-38页 |
3.2.3 玉米新的miRNA鉴定结果 | 第38-39页 |
3.2.4 玉米miRNA家族分析结果 | 第39页 |
3.2.5 响应新月弯孢菌诱导的玉米miRNA鉴定结果 | 第39-40页 |
3.3 miRNA芯片结果分析 | 第40-42页 |
3.4 miRNA降解组分析结果 | 第42-45页 |
3.5 抗病相关的miRNA筛选结果 | 第45-56页 |
3.6 miRNA及其靶基因定量分析结果 | 第56-60页 |
4 讨论 | 第60-66页 |
4.1 新月弯孢菌侵染对玉米sRNA丰度的影响 | 第60页 |
4.2 新月弯孢菌侵染诱导的新的miRNA在抗弯孢霉叶斑病中的作用 | 第60-61页 |
4.3 miRNA家族在抗玉米弯孢叶斑病中的作用 | 第61页 |
4.4 miRNA芯片鉴定差异表达miRNA | 第61-62页 |
4.5 降解组测序鉴定miRNA靶基因 | 第62-63页 |
4.6 miRNA芯片结合降解组测序联合分析 | 第63页 |
4.7 定量PCR分析miRNA及其靶基因表达 | 第63-66页 |
5 结论 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
个人简历 | 第76-77页 |
附录 | 第77-92页 |