| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第11-19页 |
| 1.1 选题依据和研究意义 | 第11-16页 |
| 1.1.1 淀粉合成相关研究 | 第11-13页 |
| 1.1.2 甘薯淀粉合成相关研究 | 第13-14页 |
| 1.1.3 时空特异性表达在甘薯中的应用 | 第14-16页 |
| 1.2 主要研究内容 | 第16-18页 |
| 1.2.1 筛选甘薯、拟南芥等的微管组织特异表达的启动子 | 第16-17页 |
| 1.2.2 分离克隆甘薯蔗糖转运蛋白基因 | 第17页 |
| 1.2.3 获得微管组织特异表达蔗糖转运蛋白基因的烟草转基因材料 | 第17页 |
| 1.2.4 研究烟草内源蔗糖水平及库源分配变化对淀粉合成的影响 | 第17-18页 |
| 1.3 技术路线、方案 | 第18页 |
| 1.4 创新点 | 第18-19页 |
| 第二章 甘薯AGP 1, AGP2以及拟 南芥AAP 2, BAN特异基 因启动子的克隆筛选及功能分析 | 第19-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第19-20页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第20页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第20-21页 |
| 2.1.5 主要缓冲液和培养基配方 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-29页 |
| 2.2.1 D NA的提取 | 第22页 |
| 2.2.2 特异表达启动子的PCR克隆 | 第22-24页 |
| 2.2.3 扩增产物的回收 | 第24页 |
| 2.2.4 大肠杆菌D H5α感受态的制备 | 第24-25页 |
| 2.2.5 质粒DNA的提取、酶切、连接和转化 | 第25-26页 |
| 2.2.6 序列分析 | 第26页 |
| 2.2.7 组织特异性启动子表达载体构建 | 第26-27页 |
| 2.2.8 根癌农杆菌感受态的制备及D NA转化 | 第27页 |
| 2.2.9 烟草遗传转化 | 第27-28页 |
| 2.2.10 转化植株的PC R鉴定 | 第28-29页 |
| 2.2.11 烟草转化植株GUS基因的表达特性分析 | 第29页 |
| 2.2.12 GUS活性的荧光定量测定 | 第29页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第29-40页 |
| 2.3.1 组织特异性启动子的克隆 | 第29-32页 |
| 2.3.2 IbAGP1基因启动子删除分析 | 第32-34页 |
| 2.3.3 组织特异性启动子表达特性分析用载体的构建 | 第34-35页 |
| 2.3.4 烟草遗传转化及转基因苗的获得 | 第35-36页 |
| 2.3.5 IbA GP1基因启动子表达特性分析 | 第36-40页 |
| 2.4 讨论 | 第40-41页 |
| 2.5 本章小结 | 第41-42页 |
| 第3章 特异表达IbSUT基因对烟草淀粉合成的影响 | 第42-61页 |
| 3.1 实验材料 | 第42页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第42页 |
| 3.1.2 菌株和载体 | 第42页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第42页 |
| 3.1.4 主要仪器设备 | 第42页 |
| 3.1.5 主要缓冲液和培养基配方 | 第42页 |
| 3.2 实验方法 | 第42-48页 |
| 3.2.1 D NA的提取 | 第42-43页 |
| 3.2.2 特异表达启动子的PCR克隆 | 第43-44页 |
| 3.2.3 甘薯蔗糖转运蛋白基因IbS UT1和I bS UT2的PC R克隆 | 第44页 |
| 3.2.4 扩增产物的回收 | 第44-45页 |
| 3.2.5 大肠杆菌D H5α感受态的制备 | 第45页 |
| 3.2.6 质粒DNA的提取、酶切、连接和转化 | 第45页 |
| 3.2.7 组织特异性启动子表达载体构建 | 第45-47页 |
| 3.2.8 根癌农杆菌感受态的制备及D NA转化 | 第47页 |
| 3.2.9 烟草遗传转化 | 第47页 |
| 3.2.10 转化植株的PC R鉴定 | 第47页 |
| 3.2.11 转化植株的R NA提取 | 第47-48页 |
| 3.2.12 RT -PCR及半定量PCR分析 | 第48页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第48-59页 |
| 3.3.1 甘薯IbSU T1基因及I bS UT2基因的克隆及序列获得 | 第48-51页 |
| 3.3.2 特异表达甘薯蔗糖转运蛋白表达载体的构建 | 第51-52页 |
| 3.3.3 烟草遗传转化及转基因苗的获得 | 第52-56页 |
| 3.3.4 甘薯IbSU T1基因及I bS UT2基因在烟草中的表达分析 | 第56-59页 |
| 3.3.6 讨论 | 第59页 |
| 3.4 本章小结 | 第59-61页 |
| 第四章 结论 | 第61-64页 |
| 4.1 主要结论 | 第61-64页 |
| 4.1.1 甘薯AGP1 ，AGP2以及拟南芥AAP 2 ，BAN特异基因启动子的克隆筛选及功能分析 | 第61-62页 |
| 4.1.2 特异表达甘薯蔗糖转运蛋白基因IbSUT对烟草淀粉合成的影响 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 攻硕期间取得的研究成果 | 第70-71页 |
