| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| 1.1 大鲵的研究进展 | 第11-14页 |
| 1.1.1 大鲵的营养、药用及科学研究价值 | 第11-12页 |
| 1.1.2 大鲵的遗传多样性 | 第12页 |
| 1.1.3 大鲵的繁殖习性 | 第12页 |
| 1.1.4 大鲵疾病研究 | 第12-13页 |
| 1.1.5 大鲵免疫系统 | 第13-14页 |
| 1.2 溶菌酶的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.2.1 溶菌酶的类型和分布 | 第14页 |
| 1.2.2 溶菌酶的结构 | 第14-15页 |
| 1.2.3 溶菌酶的功能 | 第15-16页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第16-18页 |
| 第二章 大鲵溶菌酶基因的鉴定及生物信息学分析 | 第18-35页 |
| 2.1 材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 试验动物及菌种 | 第18页 |
| 2.1.2 主要仪器设备和试验试剂 | 第18-19页 |
| 2.2 方法 | 第19-22页 |
| 2.2.1 大鲵c-型和g-型溶菌酶基因的鉴定 | 第19-21页 |
| 2.2.2 大鲵c-型和g-型溶菌酶基因的生物信息学分析 | 第21-22页 |
| 2.3 试验结果 | 第22-33页 |
| 2.3.1 大鲵c-型和g-型溶菌酶基因的鉴定 | 第22页 |
| 2.3.2 大鲵c-型和g-型溶菌酶基因生物信息学分析 | 第22-33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 大鲵溶菌酶基因的表达特性研究 | 第35-42页 |
| 3.1 材料 | 第35页 |
| 3.1.1 试验动物 | 第35页 |
| 3.1.2 样品处理 | 第35页 |
| 3.1.3 主要试验设备 | 第35页 |
| 3.1.4 试验试剂 | 第35页 |
| 3.2 方法 | 第35-38页 |
| 3.2.1 组织RNA提取 | 第35-36页 |
| 3.2.2 cDNA合成 | 第36-37页 |
| 3.2.3 引物合成与检测 | 第37-38页 |
| 3.2.4 实时荧光定量PCR | 第38页 |
| 3.3 结果 | 第38-40页 |
| 3.3.1 大鲵各个组织的RNA提取 | 第38-39页 |
| 3.3.2 引物检测 | 第39页 |
| 3.3.3 大鲵c-型和g-型溶菌酶的组织分布 | 第39-40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 病原感染对大鲵溶菌酶基因的表达影响 | 第42-45页 |
| 4.1 材料 | 第42页 |
| 4.1.1 试验动物 | 第42页 |
| 4.1.2 试验仪器和设备 | 第42页 |
| 4.2 方法 | 第42页 |
| 4.2.1 嗜水气单胞菌感染试验 | 第42页 |
| 4.2.2 组织RNA的提取和cDNA的合成 | 第42页 |
| 4.2.3 实时荧光定量PCR | 第42页 |
| 4.3 结果 | 第42-44页 |
| 4.4 讨论 | 第44-45页 |
| 第五章 大鲵溶菌酶基因的原核表达与活性检测 | 第45-59页 |
| 5.1 材料 | 第45-47页 |
| 5.1.1 试验菌种 | 第45-46页 |
| 5.1.2 主要仪器设备 | 第46页 |
| 5.1.3 主要试剂 | 第46页 |
| 5.1.4 主要溶液配制 | 第46-47页 |
| 5.2 方法 | 第47-52页 |
| 5.2.1 大鲵溶菌酶基因重组原核表达载体的构建 | 第47-50页 |
| 5.2.2 重组蛋白的表达及纯化 | 第50-52页 |
| 5.2.3 重组蛋白活性检测 | 第52页 |
| 5.2.4 重组蛋白的抗菌谱测定 | 第52页 |
| 5.3 试验结果 | 第52-57页 |
| 5.3.1 含酶切位点的AdlysC和AdlysG基因的扩增 | 第52-53页 |
| 5.3.2 质粒提取和双酶切鉴定 | 第53-54页 |
| 5.3.3 菌落PCR鉴定 | 第54-55页 |
| 5.3.4 重组大鲵c-型和g-型溶菌酶的表达和纯化 | 第55页 |
| 5.3.5 重组大鲵c-型和g-型溶菌酶的活性检测 | 第55-56页 |
| 5.3.6 重组蛋白的抗菌谱测定 | 第56-57页 |
| 5.4 讨论 | 第57-59页 |
| 结论与创新点 | 第59-60页 |
| 结论 | 第59页 |
| 创新点 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 附录 | 第65-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者简介 | 第69页 |
