摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
符号说明 | 第9-10页 |
第一章 无脊椎动物先天免疫研究进展 | 第10-15页 |
第二章 MLF在日本囊对虾抗病毒免疫中的功能研究 | 第15-31页 |
一、前沿 | 第15-16页 |
二、材料和方法 | 第16-21页 |
2.1. 仪器设备 | 第16-17页 |
2.2. 病毒感染和对虾组织收集 | 第17页 |
2.3. 基因克隆 | 第17页 |
2.4. 序列分析 | 第17-18页 |
2.5. 组织分布和表达模式分析 | 第18页 |
2.6. 重组表达与蛋白纯化 | 第18-19页 |
2.7. RNA干扰和蛋白注射实验 | 第19-20页 |
2.8. 存活率分析 | 第20页 |
2.9. 免疫荧光化学实验 | 第20-21页 |
2.10. 流式细胞技术检测对虾血细胞凋亡 | 第21页 |
三、结果 | 第21-29页 |
3.1. 日本囊对虾MLF的序列分析 | 第21-25页 |
3.2. MjMLF在日本囊对虾中分布广泛,受白斑综合征病毒刺激后上调表达 | 第25-26页 |
3.3. 在MjMLF RNAi的对虾中白斑综合征病毒复制水平更高,而在MLF蛋白注射的对虾中复制水平较低 | 第26-27页 |
3.4. MjMLF RNAi的对虾存活率下降,而MjMLF重组蛋白注射的对虾存活率升高 | 第27-28页 |
3.5. MjMLF RNAi的对虾血细胞凋亡率降低 | 第28-29页 |
四、讨论 | 第29-31页 |
第三章 MLF通过调节抗菌肽表达来抵制鳗弧菌感染 | 第31-41页 |
一、前沿 | 第31-33页 |
二、材料与方法 | 第33-36页 |
2.1. 动物与组织收集 | 第33页 |
2.2. MLF表达模式分析 | 第33页 |
2.3. 双链RNA的准备过程 | 第33页 |
2.4. 细菌清除实验 | 第33-34页 |
2.5. 存活率实验 | 第34页 |
2.6. 抗菌肽基因表达检测 | 第34页 |
2.7. Pull down实验 | 第34-36页 |
三、结果 | 第36-39页 |
3.1. 鳗弧菌刺激对虾时,MjMLF表达上调 | 第36页 |
3.2. 在MjMLF表达被敲低的对虾中,鳗弧菌清除率降低 | 第36页 |
3.3. dsMjMLF组中对虾存活率显著低于对照组 | 第36-37页 |
3.4. dsMjMLF对虾中抗菌肽表达量显著降低 | 第37-38页 |
3.5. rMjMLF能够与rMj14-3-3在体外相互作用 | 第38-39页 |
四、讨论 | 第39-41页 |
论文创新点总结 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
在读期间发表的文章 | 第48-49页 |
附件 | 第49页 |