| CONTENTS | 第5-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 1 前言 | 第10-18页 |
| 1.1 多杀性巴氏杆菌的流行病学及危害 | 第10-11页 |
| 1.1.1 多杀性巴氏杆菌的流行特点 | 第10-11页 |
| 1.1.2 多杀性巴氏杆菌的危害 | 第11页 |
| 1.2 多杀性巴氏杆菌病的病原学 | 第11-12页 |
| 1.2.1 多杀性巴氏杆菌的血清型分型 | 第11页 |
| 1.2.2 多杀性巴氏杆菌的生长特性与理化特性 | 第11-12页 |
| 1.3 多杀性巴氏杆菌病的发病机理 | 第12页 |
| 1.4 多杀性巴氏杆菌病的临床症状 | 第12页 |
| 1.5 多杀性巴氏杆菌的检测方法 | 第12页 |
| 1.6 多杀性巴氏杆菌的致病机制 | 第12-13页 |
| 1.7 多杀性巴氏杆菌毒力因子 | 第13-16页 |
| 1.7.1 荚膜 | 第13页 |
| 1.7.2 外膜蛋白 | 第13-14页 |
| 1.7.3 脂多糖 | 第14页 |
| 1.7.4 皮肤坏死毒素 | 第14-15页 |
| 1.7.5 菌毛和粘附素 | 第15页 |
| 1.7.6 铁捕获蛋白 | 第15-16页 |
| 1.8 多杀性巴氏杆菌的抗生素耐药性 | 第16页 |
| 1.9 PrfA的调控作用 | 第16-17页 |
| 1.10 研究目的和意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-29页 |
| 2.1 材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 菌株、质粒、细胞和实验动物 | 第18页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第18页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.2 方法 | 第19-29页 |
| 2.2.1 C51-17菌株基因组DNA的提取 | 第19页 |
| 2.2.2 引物设计 | 第19-20页 |
| 2.2.3 自杀性质粒的构建 | 第20-22页 |
| 2.2.4 C51-17菌株电转化感受态细胞的制备 | 第22-23页 |
| 2.2.5 自杀性质粒的电转化 | 第23页 |
| 2.2.6 ΔprfA突变株的筛选及鉴定 | 第23-24页 |
| 2.2.7 ΔprfA突变株的生物学特性鉴定 | 第24-25页 |
| 2.2.8 ΔprfA突变株的致病性试验 | 第25页 |
| 2.2.9 ΔprfA突变株粘附特性分析 | 第25页 |
| 2.2.10 PrfA对Hpt、PM209、RpoH的调控作用 | 第25-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-36页 |
| 3.1 prfA上下游同源臂的PCR扩增结果 | 第29页 |
| 3.2 自杀性质粒的酶切鉴定结果 | 第29-31页 |
| 3.3 ΔprfA突变株的PCR鉴定结果 | 第31-32页 |
| 3.4 ΔprfA突变株的生物学特性测定结果 | 第32-34页 |
| 3.4.1 生化特性检测结果 | 第32页 |
| 3.4.2 遗传稳定性检测结果 | 第32-33页 |
| 3.4.3 生长特性检测结果 | 第33-34页 |
| 3.5 ΔprfA突变株对小鼠的致病性结果 | 第34页 |
| 3.6 ΔprfA突变株的粘附试验结果 | 第34-35页 |
| 3.7 PrfA对Hpt、PM209、RpoH的调控结果 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 4.1 细菌基因突变策略 | 第36-37页 |
| 4.2 PrfA调控作用 | 第37-38页 |
| 5 结论 | 第38-39页 |
| 致谢 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-45页 |
| 附录 | 第45-46页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第46页 |
