| 中文摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略表 | 第13-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-22页 |
| 1.1 铁元素的重要性 | 第15-16页 |
| 1.2 嗜铁素 | 第16-18页 |
| 1.2.1 嗜铁素的类型与测定 | 第16页 |
| 1.2.2 真菌嗜铁素的类型与结构 | 第16-17页 |
| 1.2.3 嗜铁素的潜在应用 | 第17-18页 |
| 1.3 嗜铁素合成相关基因及其研究进展 | 第18页 |
| 1.3.1 嗜铁素合成的相关基因 | 第18页 |
| 1.3.2 嗜铁素合成相关基因研究进展 | 第18页 |
| 1.4 DOUBLE-JOINTPCR技术原理及应用 | 第18-19页 |
| 1.5 本研究的立题依据、研究内容及技术路线 | 第19-22页 |
| 1.5.1 立题依据 | 第19页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第19-21页 |
| 1.5.3 技术路线 | 第21-22页 |
| 第二章 棘孢木霉菌T6嗜铁素相关基因SIDA | 第22-32页 |
| 2.1 材料与方法 | 第22-28页 |
| 2.1.1 材料 | 第22-25页 |
| 2.1.1.1 供试菌株 | 第22页 |
| 2.1.1.2 工具酶和主要试剂 | 第22页 |
| 2.1.1.3 培养基 | 第22-24页 |
| 2.1.1.4 主要溶液配方 | 第24页 |
| 2.1.1.5 主要仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第25-28页 |
| 2.1.2.1 嗜铁素定量测定 | 第25页 |
| 2.1.2.2 棘孢木霉菌sidA基因的预测和生物信息学分析 | 第25页 |
| 2.1.2.3 棘孢木霉菌T6的培养和保存 | 第25-26页 |
| 2.1.2.4 棘孢木霉菌T6孢子悬液的制备 | 第26页 |
| 2.1.2.5 棘孢木霉T6发酵液中单位质量嗜铁素相对含量的测定 | 第26-27页 |
| 2.1.2.6 嗜铁素合成基因sidA的RT-PCR测定 | 第27-28页 |
| 2.2 结果与分析 | 第28-30页 |
| 2.2.1 嗜铁素定量测定 | 第28页 |
| 2.2.2 棘孢木霉菌SIDA基因的预测分析 | 第28-29页 |
| 2.2.3 棘孢木霉T6发酵液中单位质量嗜铁素相对含量的测定 | 第29-30页 |
| 2.2.4 嗜铁素合成基因SIDA的RT-PCR测定 | 第30页 |
| 2.3 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 嗜铁素合成相关基因SIDA的基因敲除 | 第32-52页 |
| 3.1 材料与方法 | 第32-48页 |
| 3.1.1 材料 | 第32-39页 |
| 3.1.1.1 供试菌株和载体 | 第32页 |
| 3.1.1.2 工具酶和主要试剂 | 第32-33页 |
| 3.1.1.3 培养基 | 第33页 |
| 3.1.1.4 主要溶液和缓冲液配制 | 第33-37页 |
| 3.1.1.5 主要仪器设备 | 第37-38页 |
| 3.1.1.6 PCR引物 | 第38-39页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第39-48页 |
| 3.1.2.1 棘孢木霉菌T6对潮霉素B敏感性测定 | 第39页 |
| 3.1.2.2 构建敲除载体 | 第39-43页 |
| 3.1.2.3 棘孢木霉菌sidA基因敲除 | 第43-48页 |
| 3.2 结果与分析 | 第48-51页 |
| 3.2.1 棘孢木霉菌T6对潮霉素B敏感性测定 | 第48-49页 |
| 3.2.2 突变体的PCR验证 | 第49-50页 |
| 3.2.3 突变体的SOUTHERN验证 | 第50-51页 |
| 3.3 讨论 | 第51-52页 |
| 第四章 棘孢木霉菌SIDA基因敲除突变体表型分析 | 第52-63页 |
| 4.1 材料与方法 | 第52-55页 |
| 4.1.1 材料 | 第52-53页 |
| 4.1.1.1 供试菌株 | 第52页 |
| 4.1.1.2 培养基 | 第52-53页 |
| 4.1.1.3 主要仪器设备 | 第53页 |
| 4.1.2 实验方法 | 第53-55页 |
| 4.1.2.1 野生型与突变体嗜铁素差异 | 第53页 |
| 4.1.2.2 菌落生长速度测定 | 第53-54页 |
| 4.1.2.3 产孢量与孢子萌发测定 | 第54页 |
| 4.1.2.4 胁迫敏感性测定 | 第54-55页 |
| 4.2 结果与分析 | 第55-61页 |
| 4.2.1 野生型与突变体嗜铁素差异 | 第55页 |
| 4.2.2 菌落生长速度测定 | 第55-57页 |
| 4.2.3 产孢量与孢子萌发测定 | 第57-59页 |
| 4.2.3.1 产孢量测定 | 第57页 |
| 4.2.3.2 孢子萌发测定 | 第57-59页 |
| 4.2.4 胁迫敏感性测定 | 第59-61页 |
| 4.3 讨论 | 第61-63页 |
| 全文总结 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
