| 致谢 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第11-14页 |
| 1 前言 | 第14-20页 |
| 1.1 GPR124的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2 动脉粥样硬化病理过程概述 | 第15-17页 |
| 1.3 Tet-On基因表达调控系统概述 | 第17-19页 |
| 1.4 本课题的研究内容及目的 | 第19-20页 |
| 2 实验材料和仪器 | 第20-25页 |
| 2.1 实验动物及高脂饲料 | 第20页 |
| 2.2 实验材料与试剂 | 第20-22页 |
| 2.2.1 质粒及腺相关病毒 | 第20页 |
| 2.2.2 Tet-On系统诱导药物 | 第20-21页 |
| 2.2.3 基因鉴定相关试剂 | 第21页 |
| 2.2.4 血液生化指标检测 | 第21页 |
| 2.2.5 油红O染色相关试剂 | 第21页 |
| 2.2.6 总RNA抽提及荧光定量PCR (qRT-PCR)相关试剂 | 第21页 |
| 2.2.7 免疫荧光相关试剂 | 第21-22页 |
| 2.3 实验溶液的配制 | 第22-24页 |
| 2.3.1 Dox诱导药液配制 | 第22页 |
| 2.3.2 基因鉴定相关溶液配制 | 第22页 |
| 2.3.3 动物实验相关溶液配制 | 第22-23页 |
| 2.3.4 冰冻切片相关溶液配制 | 第23页 |
| 2.3.5 免疫荧光相关溶液配制 | 第23页 |
| 2.3.6 油红O染色相关溶液配制 | 第23-24页 |
| 2.4 实验仪器 | 第24-25页 |
| 3 实验方法 | 第25-34页 |
| 3.1 血管内皮细胞过表达GPR124小鼠的基因鉴定 | 第25-26页 |
| 3.2 Tet-On基因表达调控系统构建内皮细胞过表达GPR124转基因小鼠 | 第26页 |
| 3.3 肝脏表达人源PCSK9~DY构建动脉粥样硬化小鼠模型 | 第26-27页 |
| 3.4 行为学检测 | 第27-29页 |
| 3.4.1 旷场实验 | 第28页 |
| 3.4.2 Y-迷宫 | 第28页 |
| 3.4.3 新事物认知 | 第28-29页 |
| 3.5 样本的采集和处理 | 第29-30页 |
| 3.6 实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR) | 第30-32页 |
| 3.6.1 Trizol法提取组织总RNA | 第30-31页 |
| 3.6.2 将RNA逆转录成cDNA | 第31页 |
| 3.6.3 实时荧光定量PCR | 第31-32页 |
| 3.7 油红O染色 | 第32页 |
| 3.8 免疫荧光染色 | 第32-33页 |
| 3.9 小分子荧光探针NP3染色 | 第33页 |
| 3.10 数据分析 | 第33-34页 |
| 4 实验结果 | 第34-50页 |
| 4.1 构建内皮细胞过表达GPR124的动脉粥样硬化动物模型 | 第34-37页 |
| 4.1.1 Tet-On基因表达调控系统构建内皮细胞过表达GPR124转基因小鼠 | 第34-36页 |
| 4.1.2 通过肝脏表达人源PCSK9~(DY)构建动脉粥样硬化模型 | 第36-37页 |
| 4.2 血管内皮细胞过表达GPR124促进小鼠动脉粥样硬化病理发展 | 第37-40页 |
| 4.2.1 血管内皮细胞过表达GPR124增加模型动物血液中低密度脂蛋白胆固醇及总胆固醇水平 | 第37-38页 |
| 4.2.2 血管内皮细胞过表达GPR124促进动脉粥样硬化模型小鼠主动脉根部脂质沉积 | 第38-39页 |
| 4.2.3 血管内皮细胞过表达GPR124促进动脉粥样硬化模型小鼠主动脉根部平滑肌细胞增殖 | 第39-40页 |
| 4.3 血管内皮细胞过表达GPR124促进小鼠内皮细胞炎性损伤 | 第40-46页 |
| 4.3.1 血管内皮细胞过表达GPR124加重动脉粥样硬化模型小鼠主动脉根部硝化应激水平 | 第40-43页 |
| 4.3.2 血管内皮细胞过表达GPR124促进小鼠内皮细胞炎症反应的发生 | 第43-46页 |
| 4.4 血管内皮细胞过表达GPR124 16周未引起小鼠认知功能异常 | 第46-50页 |
| 4.4.1 血管内皮细胞过表达GPR124 16周未引起小鼠运动及认知功能异常 | 第46-47页 |
| 4.4.2 血管内皮细胞过表达GPR124 16周未引起小鼠海马区phospho-CaMKII(Thr286)的表达变化 | 第47-48页 |
| 4.4.3 血管内皮细胞过表达GPR124 16周未引起小鼠海马区GFAP的表达变化 | 第48-50页 |
| 5 讨论 | 第50-55页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 综述 | 第58-68页 |
| 参考文献 | 第66-68页 |
| 作者介绍 | 第68页 |
| 硕士期间已发表的论文 | 第68页 |
| 参加科研项目 | 第68-69页 |
| 学术会议与交流 | 第69页 |
