| 中文摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-15页 |
| 1. 结核分枝杆菌感染现状 | 第9页 |
| 2. 细菌抗药性的产生 | 第9-14页 |
| 2.1 细菌抗药途径 | 第9-10页 |
| 2.2 β-内酰胺酶的分类 | 第10-14页 |
| 3 课题研究的目的意义与目标 | 第14页 |
| 4 课题研究主要内容 | 第14-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-24页 |
| 1 材料 | 第15-17页 |
| 1.1 供试菌株 | 第15页 |
| 1.2 酶、试剂和试剂盒 | 第15页 |
| 1.3 供试抗生素 | 第15-16页 |
| 1.4 引物 | 第16页 |
| 1.5 供试质粒 | 第16-17页 |
| 1.6 其余缓冲液、试剂 | 第17页 |
| 1.7 培养基 | 第17页 |
| 2 方法 | 第17-24页 |
| 2.1 分子生物学基本操作 | 第17页 |
| 2.2 细菌双杂交实验 | 第17-18页 |
| 2.3 融合蛋白的亲和纯化 | 第18-21页 |
| 2.4 大分子相互作用检测 | 第21-22页 |
| 2.5 RNase功能试验 | 第22页 |
| 2.6 淀粉/碘显色实验 | 第22页 |
| 2.7 分光光度法测内酰胺酶活性 | 第22-24页 |
| 第三章 结果与分析 | 第24-43页 |
| 1 Rv2752c属于金属内酰胺酶家族中β-CASP亚家族中的一员 | 第24-28页 |
| 1.1 Rv2752c在CDD中的结构预测 | 第24页 |
| 1.2 Rv2752c与其他革兰氏阴性菌中金属内酰胺酶氨基酸序列比对 | 第24-26页 |
| 1.3 Rv2752c具有β-CASP亚家族三个标志性的motif | 第26页 |
| 1.4 Rv2752c与结核分支杆菌中的内酰胺酶序列比对 | 第26-28页 |
| 2 细菌双杂交以及相关蛋白的克隆表达 | 第28-32页 |
| 2.1 相关基因以及突变的克隆 | 第28-30页 |
| 2.2 细菌双杂交筛选 | 第30-31页 |
| 2.3 细菌双杂交验证相互作用 | 第31-32页 |
| 3 Rv2752c是结核分枝杆菌中的RNaseJ | 第32-34页 |
| 3.1 Rv2752c与RNaseJ有很高的同源性 | 第32-33页 |
| 3.2 Rv2752c的同源建模 | 第33-34页 |
| 4 Rv2752c的内酰胺酶活性和RNase活性的测定 | 第34-39页 |
| 4.1 利用淀粉/碘显色实验验证Rv2752c的内酰胺酶活性 | 第34-36页 |
| 4.2 分光光度法测Rv2752c及其突变蛋白的内酰胺酶活性 | 第36-37页 |
| 4.3 Rv2752c的RNase活性实验 | 第37-39页 |
| 5 Rv2752c与Rv2373c体外相互作用检测 | 第39-40页 |
| 6 Rv2373c对Rv2752c活性的影响 | 第40-43页 |
| 6.1 Rv2373c对Rv2752c RNase活性的影响 | 第40-41页 |
| 6.2 Rv2373c对Rv2752c内酰胺酶活性的影响 | 第41-43页 |
| 第四章 总结与讨论 | 第43-46页 |
| 1 总结 | 第43页 |
| 2. 讨论 | 第43-45页 |
| 2.1 关于结核分枝杆菌中金属内酰胺酶的研究及讨论 | 第43-44页 |
| 2.2 关于RNaseJ的研究及讨论 | 第44页 |
| 2.3 Rv2752c与Rv2373c的互作研究以及讨论 | 第44-45页 |
| 2.4 Rv2752c与Rv2550c的互作讨论 | 第45页 |
| 3 研究展望 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
| 致谢 | 第49页 |
