| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩写表 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-23页 |
| 1.1 MutM的研究进展 | 第10-16页 |
| 1.1.1 碱基切除修复 | 第10页 |
| 1.1.2 8-oxoG | 第10-11页 |
| 1.1.3 原核生物中MutM的生物学功能 | 第11-14页 |
| 1.1.4 真核生物中的OGG1对8-oxoG损伤的修复 | 第14页 |
| 1.1.5 MutM和OGG1在C/C错配修复中的作用 | 第14-15页 |
| 1.1.6 核苷酸切除修复(NER)及UvrABC | 第15-16页 |
| 1.2 串联亲和纯化(TAP)技术原理、方法及应用 | 第16-23页 |
| 1.2.1 前言 | 第16页 |
| 1.2.2 TAP的原理和方法 | 第16-19页 |
| 1.2.3 重组工程系统(Recombineering system) | 第19-21页 |
| 1.2.4 串联亲和纯化(TAP)技术的应用 | 第21-22页 |
| 1.2.5 展望 | 第22-23页 |
| 2 目的与意义 | 第23-24页 |
| 3 材料与方法 | 第24-44页 |
| 3.1 前言 | 第24页 |
| 3.2 材料与方法 | 第24-44页 |
| 3.2.1 试验材料 | 第24-29页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第29-44页 |
| 4 结果与分析 | 第44-55页 |
| 4.1 在基因组上MutM基因的C端敲入TAP-tag片段 | 第44-47页 |
| 4.1.1 重组质粒pET20b-up-TAP的构建 | 第44-45页 |
| 4.1.2 重组质粒pET20b-up-TAP-down的构建 | 第45页 |
| 4.1.3 重组质粒pET20b-up-TAP-Hyg-down的构建 | 第45-46页 |
| 4.1.4 PCR扩增获得敲入片段 | 第46-47页 |
| 4.2 PCR验证基因组上MutM基因的C端成功敲入了TAP-tag片段 | 第47-48页 |
| 4.3 Western blot验证连有TAP-tag标签的MutM蛋白的表达情况 | 第48-49页 |
| 4.4 串联亲和纯化MutM蛋白 | 第49-50页 |
| 4.5 质谱鉴定 | 第50页 |
| 4.6 Msm的MutM和UvrA等基因的克隆和蛋白的表达纯化 | 第50-52页 |
| 4.6.1 只带有His-tag标签的Msm-MutM和Msm-UvrA蛋白纯化 | 第50-52页 |
| 4.6.2 带有His标签和SBP标签的Msm-MutM蛋白纯化 | 第52页 |
| 4.7 Far western分析MutM和UvrA蛋白的相互作用 | 第52-53页 |
| 4.8 SBP pull-down实验验证MutM和UvrA之间的相互作用 | 第53-55页 |
| 5 结论与讨论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
