| 致谢 | 第6-13页 |
| 摘要 | 第13-16页 |
| Abstract | 第16-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-32页 |
| 1.1 纤维素酶的催化机制 | 第19-20页 |
| 1.2. 耐盐纤维素酶的应用 | 第20-22页 |
| 1.2.1 处理造纸工业废水 | 第20页 |
| 1.2.2 开发利用海洋垃圾中的纤维素资源 | 第20-21页 |
| 1.2.3 治理纤维素原料预处理产生的废水 | 第21页 |
| 1.2.4 降解海藻和海草组织中的纤维素 | 第21-22页 |
| 1.2.5 修复盐碱地 | 第22页 |
| 1.3 海洋微生物生产的纤维素酶 | 第22-24页 |
| 1.4 海洋微生物的分离和鉴定 | 第24-26页 |
| 1.4.1 海洋微生物的分离 | 第24-25页 |
| 1.4.2 微生物分子生物学鉴定 | 第25-26页 |
| 1.5 纤维素酶的发酵工艺 | 第26-27页 |
| 1.6 纤维素酶的分离纯化 | 第27-29页 |
| 1.7 纤维素酶的基因获取和分子模拟 | 第29-30页 |
| 1.7.1 纤维素酶基因的获取 | 第29页 |
| 1.7.2 纤维素酶的分子模拟 | 第29-30页 |
| 1.8 本论文研究的主要内容与思路 | 第30-32页 |
| 第二章 产耐盐纤维素酶的海洋微生物的筛选和鉴定 | 第32-55页 |
| 2.1 前言 | 第32页 |
| 2.2 材料和方法 | 第32-44页 |
| 2.2.1 仪器和试剂 | 第32-37页 |
| 2.2.2 样品和海水采集 | 第37-38页 |
| 2.2.3 海洋微生物的分离 | 第38-39页 |
| 2.2.4 海洋微生物的保藏 | 第39页 |
| 2.2.5 微生物的活化、扩培和发酵产酶 | 第39-40页 |
| 2.2.6 酶液制备和酶活测定 | 第40-41页 |
| 2.2.7 纤维素酶耐盐性能的测定 | 第41-42页 |
| 2.2.8 产纤维素酶的海洋微生物的鉴定 | 第42页 |
| 2.2.9 盐度对海洋黑曲霉生长的影响 | 第42-43页 |
| 2.2.10 海洋黑曲霉产生的纤维素酶的酶学性质 | 第43页 |
| 2.2.11 海洋黑曲霉产生的纤维素酶降解高盐环境中纤维素的能力 | 第43-44页 |
| 2.3. 结果和讨论 | 第44-54页 |
| 2.3.1 分离得到的海洋微生物 | 第44-46页 |
| 2.3.2 筛选得到的产纤维素酶的海洋微生物 | 第46-47页 |
| 2.3.3 耐盐纤维素酶高产海洋真菌的鉴定 | 第47-49页 |
| 2.3.4 盐度对海洋黑曲霉生长的影响 | 第49-50页 |
| 2.3.5 温度对海洋黑曲霉产生的纤维素酶酶活的影响 | 第50-51页 |
| 2.3.6 pH对海洋黑曲霉产生的纤维素酶酶活的影响 | 第51-52页 |
| 2.3.7 盐度对海洋黑曲霉产生的纤维素酶酶活的影响 | 第52-53页 |
| 2.3.8 海洋黑曲霉产生的纤维素酶在高盐度下对纤维素的降解 | 第53-54页 |
| 2.4 本章小结 | 第54-55页 |
| 第三章 海洋黑曲霉固体发酵生产纤维素酶 | 第55-66页 |
| 3.1 前言 | 第55-56页 |
| 3.2 材料和方法 | 第56-59页 |
| 3.2.1 仪器和试剂 | 第56页 |
| 3.2.2 菌种和培养基 | 第56页 |
| 3.2.3 固体发酵生产纤维素酶 | 第56-57页 |
| 3.2.4 纤维素酶酶活检测 | 第57页 |
| 3.2.5 产酶培养基的优化 | 第57-58页 |
| 3.2.6 不同种类的水对纤维素酶产量的影响 | 第58页 |
| 3.2.7 无机盐对纤维素酶产量影响 | 第58页 |
| 3.2.8 葡萄糖胺含量的测定 | 第58-59页 |
| 3.3 结果和讨论 | 第59-65页 |
| 3.3.1 产酶培养基的优化 | 第59-62页 |
| 3.3.2 不同种类水的添加对纤维素酶产量的影响 | 第62-63页 |
| 3.3.3 无机盐对纤维素酶产量的影响 | 第63页 |
| 3.3.4 发酵进程分析 | 第63-65页 |
| 3.4 本章小结 | 第65-66页 |
| 第四章 海洋黑曲霉的纤维素酶酶活和胞外蛋白表达对不同碳源的响应 | 第66-76页 |
| 4.1 前言 | 第66页 |
| 4.2 材料和方法 | 第66-69页 |
| 4.2.1 仪器和试剂 | 第66-67页 |
| 4.2.2 发酵产酶 | 第67页 |
| 4.2.3 菌体量的测定 | 第67页 |
| 4.2.4 蛋白质的提取和测量 | 第67-68页 |
| 4.2.5 酶活测定 | 第68页 |
| 4.2.6 二维电泳 | 第68页 |
| 4.2.7 凝胶染色和图像分析 | 第68-69页 |
| 4.3 结果和讨论 | 第69-74页 |
| 4.3.1 海洋黑曲霉的生长和纤维素酶的产率对不同碳源的响应 | 第69页 |
| 4.3.2 内切酶对不同碳源的响应 | 第69-70页 |
| 4.3.3 β-葡糖苷酶对不同碳源的响应 | 第70-71页 |
| 4.3.4 滤纸酶活对不同碳源的响应 | 第71页 |
| 4.3.5 胞外蛋白表达对不同碳源的响应 | 第71-74页 |
| 4.4 本章小结 | 第74-76页 |
| 第五章 海洋黑曲霉固定化发酵生产β-葡糖苷酶 | 第76-84页 |
| 5.1 前言 | 第76页 |
| 5.2 材料和方法 | 第76-78页 |
| 5.2.1 仪器和试剂 | 第76-77页 |
| 5.2.2 菌体固定化 | 第77页 |
| 5.2.3 固定化发酵生产β-葡糖苷酶 | 第77-78页 |
| 5.2.4 β-葡糖苷酶的酶活检测 | 第78页 |
| 5.2.5 菌丝固定效率的测量 | 第78页 |
| 5.2.6 固定菌丝的形态观察 | 第78页 |
| 5.3 结果和讨论 | 第78-82页 |
| 5.3.1 丝瓜囊的丝和网格结构 | 第78-79页 |
| 5.3.2 菌体在丝瓜囊上的固定 | 第79页 |
| 5.3.3 菌丝在多批次发酵过程中的形态 | 第79-80页 |
| 5.3.4 丝瓜囊固定菌丝的量和固定效率 | 第80-81页 |
| 5.3.5 重复批次发酵过程中菌丝的固定量 | 第81-82页 |
| 5.3.6 游离发酵和固定化发酵的β-葡糖苷酶产量 | 第82页 |
| 5.4 本章小结 | 第82-84页 |
| 第六章 黑曲霉产生的β-葡糖苷酶的性质和耐盐机理 | 第84-104页 |
| 6.1 前言 | 第84-85页 |
| 6.2 材料和方法 | 第85-89页 |
| 6.2.1 仪器和试剂 | 第85页 |
| 6.2.2 β-葡糖苷酶的生产,粗酶液制备和酶活检测 | 第85页 |
| 6.2.3 盐度、温度和pH对β-葡糖苷酶酶活的影响 | 第85-86页 |
| 6.2.4 β-葡糖苷酶的半衰期测定 | 第86-87页 |
| 6.2.5 海洋黑曲霉产生的β-葡糖苷酶的热失活动力学分析 | 第87页 |
| 6.2.6 海洋黑曲霉产生的β-葡糖苷酶的熔点测定 | 第87-88页 |
| 6.2.7 海洋黑曲霉产生的β-葡糖苷酶的分离纯化 | 第88-89页 |
| 6.2.8 黑曲霉产生的P-葡糖苷酶的编码序列测序 | 第89页 |
| 6.2.9 黑曲霉产生的β-葡糖苷酶的序列比对和分子建模 | 第89页 |
| 6.3 结果和讨论 | 第89-103页 |
| 6.3.1 盐度对粗β-葡糖苷酶酶活的影响 | 第89-90页 |
| 6.3.2 温度对粗β-葡糖苷酶酶活的影响 | 第90-91页 |
| 6.3.3 pH对粗β-葡糖苷酶酶活的影响 | 第91-92页 |
| 6.3.4 盐度对粗β-葡糖苷酶半衰期的影响 | 第92-93页 |
| 6.3.5 粗β-葡糖苷酶在不同盐度下焓变、熵变和自由能 | 第93-94页 |
| 6.3.6 不同盐度下β-葡糖苷酶的熔点 | 第94-95页 |
| 6.3.7 纯β-葡糖苷酶在不同盐度下的半衰期和酶活 | 第95-96页 |
| 6.3.8 β-葡糖苷酶编码序列PCR扩增和测序 | 第96-100页 |
| 6.3.9 黑曲霉β-葡糖苷酶分子建模和耐盐机制分析 | 第100-103页 |
| 6.4 本章小结 | 第103-104页 |
| 第七章 总结与展望 | 第104-107页 |
| 7.1 结论 | 第104-105页 |
| 7.2 论文创新点 | 第105-106页 |
| 7.3 展望和建议 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-131页 |
| 读博士期间主要研究成果 | 第131-133页 |
| 作者简介 | 第133页 |
