| 缩略词 | 第1-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 1 引言 | 第15-37页 |
| ·AsA在植物体内的生理功能 | 第15-20页 |
| ·影响植物生长发育 | 第16-17页 |
| ·参与植物体抗氧化反应 | 第17-18页 |
| ·参与光合作用和光保护 | 第18-19页 |
| ·作为一些酶的辅酶 | 第19页 |
| ·参与信号传递 | 第19-20页 |
| ·植物中AsA生物合成、转运及代谢途径 | 第20-25页 |
| ·植物AsA的生物合成 | 第20-23页 |
| ·AsA的氧化还原 | 第23-24页 |
| ·植物AsA的转运 | 第24-25页 |
| ·植物AsA的降解 | 第25页 |
| ·植物AsA合成代谢关键酶的研究进展 | 第25-32页 |
| ·L-半乳糖酸-1,4-内酯脱氢酶 | 第25-28页 |
| ·抗坏血酸过氧化物酶 | 第28-29页 |
| ·抗坏血酸氧化物酶 | 第29-30页 |
| ·单脱氢抗坏血酸还原酶 | 第30-31页 |
| ·脱氢抗坏血酸还原酶 | 第31-32页 |
| ·马铃薯转基因研究进展 | 第32-35页 |
| ·应用的目的基因 | 第32-33页 |
| ·受体系统 | 第33-35页 |
| ·本研究的目的意义 | 第35-37页 |
| 2 材料与方法 | 第37-54页 |
| ·试验材料 | 第37-38页 |
| ·植物材料与处理 | 第37页 |
| ·菌株与质粒 | 第37-38页 |
| ·试剂与药品 | 第38页 |
| ·主要仪器 | 第38页 |
| ·数据分析 | 第38页 |
| ·试验方法 | 第38-54页 |
| ·RNA的提取 | 第38-39页 |
| ·反转录cDNA第一条链的合成 | 第39-40页 |
| ·基因克隆引物及设计 | 第40-41页 |
| ·目的基因全长cDNA的分离 | 第41-43页 |
| ·凝胶回收 | 第43页 |
| ·目的DNA与pMD18-T vector的连接 | 第43-44页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第44页 |
| ·碱法小量提取质粒DNA | 第44-45页 |
| ·质粒DNA的酶切鉴定 | 第45页 |
| ·转化菌落的PCR鉴定 | 第45页 |
| ·基因序列的测定与分析 | 第45页 |
| ·载体构建 | 第45-46页 |
| ·再连接 | 第46页 |
| ·农杆菌介导转化马铃薯 | 第46-48页 |
| ·Favorita对卡那霉素的敏感性及再生株系的高浓度卡那霉素筛选 | 第48页 |
| ·转基因马铃薯植株的PCR鉴定 | 第48-50页 |
| ·StGLDH表达量测定 | 第50-51页 |
| ·AsA、DHA和AsA+DHA含量测定 | 第51页 |
| ·GLDH活性测定 | 第51-52页 |
| ·叶绿素含量测定 | 第52页 |
| ·DHAR、MDHAR、APX和AO活性测定 | 第52-53页 |
| ·丙二醛含量的测定 | 第53-54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-79页 |
| ·马铃薯GLDH基因的克隆与序列分析 | 第54-59页 |
| ·马铃薯GLDH基因的克隆 | 第54页 |
| ·马铃薯GLDH基因的序列分析 | 第54-56页 |
| ·StGLDH的同源氨基酸序列比较 | 第56-59页 |
| ·StGLDH的同源氨基酸进化树分析 | 第59页 |
| ·StGLDH真核表达载体的构建及对马铃薯的转化 | 第59-64页 |
| ·StGLDH真核表达载体的构建 | 第59-60页 |
| ·农杆菌介导法转化马铃薯及马铃薯再生植株的获得 | 第60-62页 |
| ·Favorita再生试管苗对卡那霉素的敏感性及高浓度卡那霉素筛选 | 第62-63页 |
| ·抗性再生株系的PCR检测 | 第63-64页 |
| ·StGLDH在马铃薯中的表达效果 | 第64-70页 |
| ·转基因和野生型马铃薯植株表型差异及长势 | 第64-66页 |
| ·转基因株系的叶绿素含量 | 第66-67页 |
| ·StGLDH在马铃薯中的表达 | 第67页 |
| ·转基因株系GLDH活性 | 第67-68页 |
| ·转基因植株的AsA、DHA和AsA+DHA含量及AsA/DHA | 第68-70页 |
| ·前体饲喂对马铃薯叶片AsA、DHA和AsA+DHA含量及AsA/DHA的影响 | 第70页 |
| ·NaCl对马铃薯StGLDH表达和抗坏血酸代谢系统的影响 | 第70-79页 |
| ·NaCl胁迫试管苗表观症状 | 第70-71页 |
| ·NaCl胁迫对StGLDH mRNA表达的影响 | 第71-72页 |
| ·NaCl胁迫对马铃薯GLDH活性的影响 | 第72-73页 |
| ·NaCl胁迫对转基因马铃薯AsA、DHA和AsA+DHA含量及AsA/DHA的影响 | 第73-79页 |
| 4 讨论 | 第79-86页 |
| ·马铃薯GLDH基因的克隆与序列分析 | 第79-80页 |
| ·StGLDH真核表达载体的构建及对马铃薯的转化 | 第80-81页 |
| ·StGLDH在马铃薯中的表达效果 | 第81-83页 |
| ·NaCl对马铃薯StGLDH表达和抗坏血酸代谢系统的影响 | 第83-86页 |
| 5 结论 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-111页 |
| 附录 | 第111-116页 |
| 致谢 | 第116-117页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第117页 |
