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新疆红肉苹果红色发育机理的初步研究

中文摘要第1-13页
英文摘要第13-15页
1 引言第15-43页
   ·课题的提出第15-16页
   ·前人研究进展第16-42页
     ·植物花青苷研究进展第16-33页
       ·花青苷的结构与理化性质第17-18页
       ·果实中花青苷的种类第18页
       ·花青苷的生物合成途径第18-20页
       ·植物花青苷合成途径中的关键酶第20-25页
       ·植物花青苷生物合成途径中的调节因子第25-28页
       ·内在因素和外在环境对花青苷合成的影响第28-30页
       ·花青苷基因工程及展望第30-33页
     ·DNA分子标记研究进展第33-38页
       ·DNA分子标记的原理与分类第33-34页
       ·AFLP 标记原理及其在果树遗传育种中的应用第34-38页
       ·DNA 分子标记存在问题与展望第38页
     ·苹果红色发育研究进展第38-42页
   ·本研究的目的与意义第42-43页
2 实验材料与方法第43-65页
   ·实验材料第43-44页
     ·植物材料第43页
     ·菌株及载体第43页
     ·酶、试剂盒、生化试剂等第43-44页
     ·仪器与设备第44页
     ·PCR 引物合成与测序第44页
   ·实验方法第44-65页
     ·新疆红肉苹果花青苷组分与含量的测定第44-45页
       ·花青苷含量测定第44-45页
       ·花青苷成分测定第45页
     ·核酸的提取第45-51页
       ·CTAB 法提取植物基因组DNA第45-47页
       ·总RNA 的提取第47-51页
     ·反转录cDNA 第一链的合成第51页
     ·基因克隆第51-54页
       ·PCR 的扩增第51-53页
       ·PCR 扩增产物的回收第53页
       ·回收产物的克隆第53-54页
     ·碱法小量质粒DNA 的提取及酶切鉴定第54-56页
       ·溶液的配制第54-55页
       ·碱法小量质粒DNA 的提取步骤第55-56页
       ·质粒DNA的酶切鉴定第56页
     ·转录因子MsMY810 基因编码区全长的原核表达第56-61页
       ·引物设计与PCR 扩增和回收第56-57页
       ·原核表达载体的构建第57-58页
       ·BL21感受态细胞的制备第58-59页
       ·重组质粒转化BL21感受态细胞第59页
       ·融合蛋白的诱导表达第59页
       ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第59-60页
       ·表达条件的筛选及优化第60-61页
     ·实时定量RT-PCR(Real Time quantitative Reverse Transcription PCR)第61-62页
       ·cDNA 模板的制备第61页
       ·引物设计合成第61页
       ·qRT-PCR 扩增第61-62页
     ·与新疆红肉苹果红色性状连锁的AFLP 标记的筛选第62-64页
       ·F1 代基因池的构建第62页
       ·荧光AFLP 反应体系的建立第62-64页
       ·荧光AFLP 图谱分析第64页
     ·本实验所使用的软件第64-65页
3. 结果与分析第65-83页
   ·新疆红肉与白肉苹果果皮、果肉花青苷组分与含量的比较分析第65-66页
     ·新疆红肉与白肉苹果果皮、果肉花青苷含量的比较分析第65页
     ·新疆红肉苹果果皮与果肉花青苷组分及其含量的比较分析第65-66页
   ·新疆红肉苹果MsMY810 基因的克隆及原核表达第66-73页
     ·总RNA 提取第66-67页
     ·新疆红肉苹果MsMY810 基因全长cDNA 的克隆及序列分析第67-70页
       ·cDNA 的克隆第67-68页
       ·序列分析第68-69页
       ·进化树分析第69-70页
     ·MsMY810 基因组gDNA 全长的克隆及序列分析第70-71页
       ·gDNA 的克隆第70-71页
       ·gDNA全长的序列分析第71页
     ·原核表达载体的构建及重组子的鉴定第71-72页
     ·MsMY810 蛋白的原核表达分析第72-73页
   ·新疆红肉与白肉苹果花青苷合成相关基因的荧光定量表达分析第73-79页
     ·花青苷合成相关转录因子基因的荧光定量表达分析第73-75页
     ·花青苷合成相关结构基因的荧光定量表达分析第75-79页
   ·与新疆红肉苹果红色性状连锁的AFLP 分子标记的筛选第79-83页
     ·DNA-AFLP 技术体系的建立第79-80页
     ·基因池差异带的筛选第80-81页
     ·差异带在F1 分离群体中的验证第81-83页
4. 讨论第83-90页
   ·新疆红肉苹果果皮、果肉花青苷组分与含量的比较分析第83页
   ·新疆红肉苹果 MsMYB10 基因的克隆与原核表达第83-85页
   ·新疆红肉苹果花青苷合成代谢相关基因的荧光定量表达分析第85-88页
   ·新疆红肉苹果叶片红色性状 AFLP 标记的筛选第88-90页
5. 结论与创新点第90-91页
   ·结论第90页
   ·创新点第90-91页
参考文献第91-111页
附录Ⅰ 本文涉及到的引物第111-112页
附录Ⅱ 常用缓冲液及培养基的配制第112-113页
致谢第113-114页
攻读博士学位期间发表和已接受论文第114-115页
博士学位论文内容简介及自评第115页

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