| 中文摘要 | 第4-6页 |
| 英文摘要 | 第6-7页 |
| 第1章 综述eRNA与去势抵抗型前列腺癌和enzalutamide抵抗的研究进展 | 第13-33页 |
| 1.1 前言 | 第13-14页 |
| 1.2 前列腺癌概述 | 第14-23页 |
| 1.2.1 激素敏感型前列腺癌 | 第14-15页 |
| 1.2.2 去势抵抗型前列腺癌 | 第15-22页 |
| 1.2.3 去势抵抗型前列腺癌的治疗 | 第22-23页 |
| 1.3 enzalutamide概述 | 第23-28页 |
| 1.3.1 enzalutamide作用机制 | 第23-26页 |
| 1.3.2 enzalutamide抵抗 | 第26-28页 |
| 1.4 eRNA概述 | 第28-30页 |
| 1.4.1 eRNA | 第28-29页 |
| 1.4.2 eRNA与癌症 | 第29-30页 |
| 1.5 结语 | 第30-33页 |
| 第2章 激素敏感型前列腺癌、去势抵抗型前列腺癌和enzalutamide抵抗型前列腺癌模型的建立 | 第33-43页 |
| 1 材料与方法 | 第35-37页 |
| 1.1 实验材料 | 第35页 |
| 1.1.1 试剂 | 第35页 |
| 1.1.2 主要实验材料 | 第35页 |
| 1.2 主要实验仪器 | 第35页 |
| 1.3 实验方法 | 第35-37页 |
| 1.3.1 细胞培养 | 第35-36页 |
| 1.3.2 MTT检测enzalutamide对激素敏感型前列腺癌和去势抵抗型前列腺癌细胞生长的影响 | 第36页 |
| 1.3.3 细胞形态学研究 | 第36-37页 |
| 2 实验结果 | 第37-40页 |
| 2.1 enzalutamide对激素敏感型前列腺癌的生长具有细胞毒性作用 | 第37页 |
| 2.2 enzalutamide对去势抵抗型前列腺癌的生长具有细胞生长停滞作用 | 第37-38页 |
| 2.3 长期enzalutamide处理对激素敏感型前列腺癌细胞形态具神经内分泌分化作用 | 第38-39页 |
| 2.4 长期enzalutamide处理对去势抵抗型前列腺癌细胞形态具有神经内分泌分化作用 | 第39-40页 |
| 3 讨论 | 第40-43页 |
| 第3章 去势抵抗和enzalutamide抵抗相关eRNA和对应m RNA的表达以及增强子-启动子相互作用的调控研究 | 第43-75页 |
| 第1节 去势抵抗和enzalutamide抵抗相关eRNA和对应m RNA的表达 | 第43-64页 |
| 1 材料与方法 | 第45-50页 |
| 1.1 主要试剂 | 第45页 |
| 1.2 主要实验设备和仪器 | 第45-46页 |
| 1.3 细胞 | 第46页 |
| 1.4 实验方法 | 第46-50页 |
| 1.4.1 雄激素受体Ch IP-seq | 第46-47页 |
| 1.4.2 RNA-seq | 第47页 |
| 1.4.3 UCSC浏览器验证 | 第47-48页 |
| 1.4.4 实时定量RT-PCR | 第48-50页 |
| 2 实验结果 | 第50-61页 |
| 2.1 激素敏感型和去势抵抗型前列腺癌细胞中受enzalutamide调控的eRNA筛选 | 第50-52页 |
| 2.2 受enzalutamide调控在激素敏感型前列腺癌细胞中下调，同时在去势抵抗型前列腺癌细胞中上调的eRNA筛选 | 第52-59页 |
| 2.3 去势抵抗型前列腺癌细胞中在enzalutamide调控下表达上调的eRNA和m RNA表达检测 | 第59-60页 |
| 2.4 激素敏感型前列腺癌细胞中在enzalutamide调控下表达下调的eRNA和m RNA表达检测 | 第60-61页 |
| 3 讨论 | 第61-64页 |
| 第2节 去势抵抗和enzalutamide抵抗相关增强子和启动子的相互作用研究 | 第64-75页 |
| 1 材料与方法 | 第65-68页 |
| 1.1 主要试剂 | 第65页 |
| 1.2 主要仪器 | 第65-66页 |
| 1.3 细胞 | 第66页 |
| 1.3.1 细胞培养 | 第66页 |
| 1.4 实验方法 | 第66-68页 |
| 1.4.1 细胞处理 | 第66页 |
| 1.4.2 3C实验 | 第66-67页 |
| 1.4.3 DNA提取 | 第67页 |
| 1.4.4 RT-PCR | 第67-68页 |
| 2 实验结果 | 第68-72页 |
| 2.1 NCAM2和MARC1位点启动子和增强子相互作用的检测 | 第68-69页 |
| 2.2 激素敏感型和去势抵抗型前列腺癌细胞中enzalutamide对NCAM2位点启动子和增强子相互作用的影响 | 第69-70页 |
| 2.3 激素敏感型和去势抵抗型前列腺癌细胞中enzalutamide对MARC1位点启动子和增强子相互作用的影响 | 第70-72页 |
| 3 讨论 | 第72-75页 |
| 第4章 潜在危险基因位点对不同类型前列腺癌细胞生长和enzalutamide抵抗的影响作用研究 | 第75-89页 |
| 1 材料与方法 | 第76-80页 |
| 1.1 主要试剂 | 第76页 |
| 1.2 主要设备及仪器 | 第76页 |
| 1.3 实验材料 | 第76页 |
| 1.3.1 慢病毒载体系统 | 第76页 |
| 1.4 实验方法 | 第76-80页 |
| 1.4.1 感受态细胞的转化 | 第76-77页 |
| 1.4.2 质粒提取 | 第77页 |
| 1.4.3 sh RNA慢病毒质粒的制备 | 第77页 |
| 1.4.4 sh RNA-慢病毒转染C4-2 enzalutamide抵抗细胞 | 第77页 |
| 1.4.5 转染效率及沉默效率检测 | 第77-78页 |
| 1.4.6 MTT检测sh LUZP2和sh MARC1脂质体转染对细胞生长的影响 | 第78页 |
| 1.4.7 病人样本中RNA提取及实时定量PCR | 第78-80页 |
| 2 实验结果 | 第80-86页 |
| 2.1 LUZP2和MARC1被充分敲除 | 第80-81页 |
| 2.2 sh LUZP2脂质体转染抑制enzalutamide抵抗型去势抵抗型前列腺癌细胞的生长 | 第81页 |
| 2.3 sh MARC1脂质体转染促进enzalutamide抵抗型去势抵抗型前列腺癌细胞的生长 | 第81-82页 |
| 2.4 激素敏感型前列腺癌中LUZP2与正常前列腺组织相比表达上调 | 第82页 |
| 2.5 去势抵抗型前列腺癌中LUZP2与激素敏感型前列腺癌相比表达下调 | 第82-86页 |
| 3 讨论 | 第86-89页 |
| 结论 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-110页 |
| 研究的创新点 | 第110-112页 |
| 作者简介 | 第112页 |
| 博士在读期间发表论文 | 第112-113页 |
| 致谢 | 第113页 |
