前言 | 第4-6页 |
摘要 | 第6-9页 |
abstract | 第9-11页 |
第1章 综述 | 第17-33页 |
1.1 前列腺癌综述 | 第17-22页 |
1.1.1 前列腺癌的流行病学 | 第17页 |
1.1.2 前列腺癌发病的危险因素 | 第17-18页 |
1.1.3 前列腺癌的诊断 | 第18-19页 |
1.1.4 前列腺癌的普查 | 第19页 |
1.1.5 前列腺癌的危害 | 第19页 |
1.1.6 前列腺癌的防治 | 第19-21页 |
1.1.7 中药在前列腺癌中的应用 | 第21-22页 |
1.2 柴胡皂苷d概述 | 第22-32页 |
1.2.1 柴胡皂苷(SS)的结构和分类 | 第23-24页 |
1.2.2 SSd的化学结构及理化性质 | 第24-25页 |
1.2.3 柴胡皂苷d的药理作用研究 | 第25-32页 |
1.3 SSd在前列腺癌中的应用 | 第32页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第32-33页 |
第2章 实验材料与实验方法 | 第33-45页 |
2.1 实验材料与设备 | 第33-36页 |
2.1.1 实验试剂与实验对象 | 第33-35页 |
2.1.2 主要设备和统计分析软件 | 第35-36页 |
2.2 实验方法 | 第36-45页 |
2.2.1 细胞培养 | 第36-37页 |
2.2.2 MTT 比色法 | 第37-38页 |
2.2.3 利用倒置显微镜观察 SSd 对细胞形态学的影响 | 第38页 |
2.2.4 免疫细胞化学染色 | 第38-39页 |
2.2.5 台盼蓝染色观察药物对小鼠脾细胞的影响 | 第39-40页 |
2.2.6 流式细胞仪检测 SSd 处理 DU145 细胞后对细胞凋亡的影响 | 第40-41页 |
2.2.7 Hoechst 33258 核染色方法 | 第41页 |
2.2.8 制备细胞蜡块及H&E染色 | 第41-42页 |
2.2.9 流式细胞仪检测细胞周期 | 第42-43页 |
2.2.10 细胞内活性氧水平检测 | 第43页 |
2.2.11 细胞内线粒体膜电位的检测 | 第43-44页 |
2.2.12 Western blot检测相关蛋白在细胞内的表达 | 第44-45页 |
第3章 实验结果 | 第45-69页 |
3.1 SSd对DU145细胞活力的影响 | 第45-47页 |
3.1.1 SSd对DU145细胞活力抑制作用的MTT法检测结果 | 第45-46页 |
3.1.2 SSd对DU145细胞活力抑制作用的形态学分析结果 | 第46-47页 |
3.2 利用细胞蜡块和细胞涂片行免疫细胞化学染色法观察细胞增殖指数的变化 | 第47-49页 |
3.3 SSd对原代培养的小鼠脾细胞的毒性作用 | 第49-50页 |
3.4 SSd对DU145细胞细胞周期的影响 | 第50-54页 |
3.4.1 不同作用浓度的SSd对DU145细胞周期阻滞的影响 | 第50-52页 |
3.4.2 SSd对细胞周期阻滞的时间依赖性 | 第52-53页 |
3.4.3 细胞周期阻滞与Caspase凋亡途径的关系 | 第53-54页 |
3.5 SSd对DU145细胞的凋亡诱导作用 | 第54-60页 |
3.5.1 利用Hoechst 33258 荧光染料染色观察显微镜下的形态学变化 | 第54-55页 |
3.5.2 观察细胞形态学变化 | 第55-56页 |
3.5.3 利用流式细胞术测定SSd对前列腺癌细胞DU145的凋亡诱导作用 | 第56-60页 |
3.6 SSd对DU145凋亡诱导作用的机制 | 第60-63页 |
3.6.1 SSd对DU145细胞活性氧水平的影响 | 第60页 |
3.6.2 SSd对DU145细胞MMP的影响 | 第60-61页 |
3.6.3 SSd对DU145细胞Cyto c的释放和Caspase-3 的活化的影响 | 第61-62页 |
3.6.4 SSd对Bcl-2 蛋白家族表达的影响 | 第62-63页 |
3.7 SSd对参与G1期阻滞相关蛋白表达的影响 | 第63-65页 |
3.7.1 SSd对DU145细胞内p53和p21蛋白表达的影响 | 第63-64页 |
3.7.2 SSd对Cyclin D1和CDK4、CDK6蛋白表达的影响 | 第64-65页 |
3.8 SSd对DU145细胞内AKT、ERK、FOXO3a蛋白表达的影响 | 第65-69页 |
第4章 讨论 | 第69-75页 |
4.1 SSd对DU145细胞活力的影响 | 第69-70页 |
4.2 SSd对DU145细胞的凋亡诱导作用及相关机制 | 第70-71页 |
4.3 SSd对DU145细胞的细胞周期阻滞作用及相关机制 | 第71-72页 |
4.4 SSd对细胞信号通路的关键蛋白AKT、ERK和FOXO3a的影响 | 第72-73页 |
4.5 展望 | 第73-75页 |
第5章 结论 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-89页 |
在学期间论文发表情况 | 第89-91页 |
致谢 | 第91页 |