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柴胡皂苷d对人前列腺癌DU145细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用及机制研究

前言第4-6页
摘要第6-9页
abstract第9-11页
第1章 综述第17-33页
    1.1 前列腺癌综述第17-22页
        1.1.1 前列腺癌的流行病学第17页
        1.1.2 前列腺癌发病的危险因素第17-18页
        1.1.3 前列腺癌的诊断第18-19页
        1.1.4 前列腺癌的普查第19页
        1.1.5 前列腺癌的危害第19页
        1.1.6 前列腺癌的防治第19-21页
        1.1.7 中药在前列腺癌中的应用第21-22页
    1.2 柴胡皂苷d概述第22-32页
        1.2.1 柴胡皂苷(SS)的结构和分类第23-24页
        1.2.2 SSd的化学结构及理化性质第24-25页
        1.2.3 柴胡皂苷d的药理作用研究第25-32页
    1.3 SSd在前列腺癌中的应用第32页
    1.4 本研究的目的和意义第32-33页
第2章 实验材料与实验方法第33-45页
    2.1 实验材料与设备第33-36页
        2.1.1 实验试剂与实验对象第33-35页
        2.1.2 主要设备和统计分析软件第35-36页
    2.2 实验方法第36-45页
        2.2.1 细胞培养第36-37页
        2.2.2 MTT 比色法第37-38页
        2.2.3 利用倒置显微镜观察 SSd 对细胞形态学的影响第38页
        2.2.4 免疫细胞化学染色第38-39页
        2.2.5 台盼蓝染色观察药物对小鼠脾细胞的影响第39-40页
        2.2.6 流式细胞仪检测 SSd 处理 DU145 细胞后对细胞凋亡的影响第40-41页
        2.2.7 Hoechst 33258 核染色方法第41页
        2.2.8 制备细胞蜡块及H&E染色第41-42页
        2.2.9 流式细胞仪检测细胞周期第42-43页
        2.2.10 细胞内活性氧水平检测第43页
        2.2.11 细胞内线粒体膜电位的检测第43-44页
        2.2.12 Western blot检测相关蛋白在细胞内的表达第44-45页
第3章 实验结果第45-69页
    3.1 SSd对DU145细胞活力的影响第45-47页
        3.1.1 SSd对DU145细胞活力抑制作用的MTT法检测结果第45-46页
        3.1.2 SSd对DU145细胞活力抑制作用的形态学分析结果第46-47页
    3.2 利用细胞蜡块和细胞涂片行免疫细胞化学染色法观察细胞增殖指数的变化第47-49页
    3.3 SSd对原代培养的小鼠脾细胞的毒性作用第49-50页
    3.4 SSd对DU145细胞细胞周期的影响第50-54页
        3.4.1 不同作用浓度的SSd对DU145细胞周期阻滞的影响第50-52页
        3.4.2 SSd对细胞周期阻滞的时间依赖性第52-53页
        3.4.3 细胞周期阻滞与Caspase凋亡途径的关系第53-54页
    3.5 SSd对DU145细胞的凋亡诱导作用第54-60页
        3.5.1 利用Hoechst 33258 荧光染料染色观察显微镜下的形态学变化第54-55页
        3.5.2 观察细胞形态学变化第55-56页
        3.5.3 利用流式细胞术测定SSd对前列腺癌细胞DU145的凋亡诱导作用第56-60页
    3.6 SSd对DU145凋亡诱导作用的机制第60-63页
        3.6.1 SSd对DU145细胞活性氧水平的影响第60页
        3.6.2 SSd对DU145细胞MMP的影响第60-61页
        3.6.3 SSd对DU145细胞Cyto c的释放和Caspase-3 的活化的影响第61-62页
        3.6.4 SSd对Bcl-2 蛋白家族表达的影响第62-63页
    3.7 SSd对参与G1期阻滞相关蛋白表达的影响第63-65页
        3.7.1 SSd对DU145细胞内p53和p21蛋白表达的影响第63-64页
        3.7.2 SSd对Cyclin D1和CDK4、CDK6蛋白表达的影响第64-65页
    3.8 SSd对DU145细胞内AKT、ERK、FOXO3a蛋白表达的影响第65-69页
第4章 讨论第69-75页
    4.1 SSd对DU145细胞活力的影响第69-70页
    4.2 SSd对DU145细胞的凋亡诱导作用及相关机制第70-71页
    4.3 SSd对DU145细胞的细胞周期阻滞作用及相关机制第71-72页
    4.4 SSd对细胞信号通路的关键蛋白AKT、ERK和FOXO3a的影响第72-73页
    4.5 展望第73-75页
第5章 结论第75-77页
参考文献第77-89页
在学期间论文发表情况第89-91页
致谢第91页

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