| 前言 | 第4-5页 |
| 中文摘要 | 第5-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 英文缩写词 | 第17-18页 |
| 第1章 绪论 | 第18-20页 |
| 第2章 文献综述 | 第20-32页 |
| 2.1 胶质瘤治疗的现状 | 第20-21页 |
| 2.1.1 手术治疗 | 第20页 |
| 2.1.2 放射治疗 | 第20-21页 |
| 2.1.3 化学治疗 | 第21页 |
| 2.1.4 新疗法 | 第21页 |
| 2.2 凋亡 | 第21-22页 |
| 2.3 程序性坏死 | 第22-28页 |
| 2.3.1 程序性坏死启动 | 第23-24页 |
| 2.3.2 程序性坏死执行 | 第24-26页 |
| 2.3.3 程序性坏死与疾病的关系 | 第26页 |
| 2.3.4 程序性坏死与肿瘤的关系 | 第26-27页 |
| 2.3.5 程序性坏死对肿瘤耐药的意义 | 第27-28页 |
| 2.3.6 程序性坏死对神经胶质瘤的意义 | 第28页 |
| 2.4 AIF | 第28-29页 |
| 2.5 JNK | 第29-30页 |
| 2.6 ROS | 第30-31页 |
| 2.7 扁塑藤素研究现状 | 第31-32页 |
| 第3章 实验材料与方法 | 第32-56页 |
| 3.1 主要器材与试剂 | 第32-35页 |
| 3.1.1 主要实验器材 | 第32-33页 |
| 3.1.2 主要实验试剂 | 第33-35页 |
| 3.2 细胞系及细胞培养 | 第35页 |
| 3.3 实验液体及配制方法 | 第35-37页 |
| 3.4 细胞复苏、传代及冻存 | 第37-38页 |
| 3.5 实验技术 | 第38-56页 |
| 3.5.1 MTT法检测胶质瘤细胞增殖活性 | 第38-39页 |
| 3.5.2 透射电镜观察细胞形态学变化 | 第39-40页 |
| 3.5.3 流式细胞术检测细胞的存活率及死亡方式 | 第40-42页 |
| 3.5.4 细胞内线粒体膜电位检测 | 第42-43页 |
| 3.5.5 Western Blot法检测细胞胞浆及胞核内蛋白的变化 | 第43-48页 |
| 3.5.6 si RNA沉默AIF、JNK基因 | 第48-49页 |
| 3.5.7 Hoechst 33342 及PI双染色观察细胞的形态学变化 | 第49-50页 |
| 3.5.8 细胞内ROS测定 | 第50-51页 |
| 3.5.9 细胞内谷胱甘肽GSH水平的测定 | 第51-52页 |
| 3.5.10 激光共聚焦扫描显微镜观察细胞胞浆、胞核内AIF蛋白水平的变化 | 第52-53页 |
| 3.5.11 DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第53-54页 |
| 3.5.12 裸鼠皮下移植胶质瘤模型实验 | 第54-55页 |
| 3.5.13 统计学分析 | 第55-56页 |
| 第4章 实验结果 | 第56-88页 |
| 4.1 扁塑藤素抑制体外胶质细胞的细胞活性 | 第56-57页 |
| 4.1.1 扁塑藤素以时间和浓度依赖的方式抑制C6和U251胶质瘤细胞的增殖 | 第56-57页 |
| 4.2 扁塑藤素诱导胶质瘤细胞发生坏死 | 第57-62页 |
| 4.2.1 流式细胞术检测扁塑藤素诱导胶质瘤细胞的死亡方式 | 第57-58页 |
| 4.2.2 PIP-1 抑制剂Nec-1、PARP抑制剂 3AB以及凋亡抑制剂Z-VAD的预处理对扁塑藤素诱导胶质瘤细胞死亡率的影响 | 第58-59页 |
| 4.2.3 流式细胞术检测shikonin、MG-132 诱导胶质瘤细胞的死亡方式 | 第59-60页 |
| 4.2.4 Hoechst 33342/PI双染观察扁塑藤素作用于胶质瘤细胞后引起的细胞变化 | 第60-61页 |
| 4.2.5 DNA琼脂糖凝胶电泳法检测扁塑藤素诱导胶质瘤细胞DNA损伤与断裂 | 第61页 |
| 4.2.6 透射电镜观察扁塑藤素作用于胶质瘤细胞后引起的细胞形态学变化 | 第61-62页 |
| 4.3 扁塑藤素诱导胶质瘤细胞线粒体的去极化和AIF的核聚集 | 第62-66页 |
| 4.3.1 流式细胞术检测扁塑藤素诱导胶质瘤细胞线粒体膜电位的变化 | 第63页 |
| 4.3.2 扁塑藤素诱导胶质瘤细胞坏死过程中BCL-2、Bax蛋白水平的变化 | 第63-64页 |
| 4.3.3 扁塑藤素时间梯度作用于胶质瘤细胞引发胞浆、胞核内AIF蛋白水平的变化 | 第64页 |
| 4.3.4 激光共聚焦显微镜法观察扁塑藤素作用于胶质瘤细胞胞浆、胞核内AIF蛋白水平的变化 | 第64-65页 |
| 4.3.5 扁塑藤素时间梯度以及MG13224h作用于胶质瘤细胞引起胞浆内Caspase3、Cleaved-Caspase3蛋白水平的变化 | 第65-66页 |
| 4.4 AIF促进扁塑藤素诱导的胶质瘤细胞坏死 | 第66-69页 |
| 4.4.1 si RNA沉默AIF基因对扁塑藤素诱导胶质瘤细胞胞浆及胞核内AIF蛋白表达的影响 | 第66-67页 |
| 4.4.2 si RNA沉默AIF基因对扁塑藤素诱导胶质瘤细胞死亡率的影响 | 第67-68页 |
| 4.4.3 流式细胞术检测si RNA沉默AIF基因对扁塑藤素诱导胶质瘤细胞坏死的影响。 | 第68页 |
| 4.4.4 荧光显微镜观察FAM-si RNA沉默AIF基因对扁塑藤素作用于胶质瘤细胞引起的细胞变化 | 第68-69页 |
| 4.5 JNK的活化调控了线粒体去极化和AIF的核聚集 | 第69-77页 |
| 4.5.1 扁塑藤素时间梯度作用于胶质瘤细胞引起胞浆内JNK、p-JNK蛋白水平的变化 | 第70-71页 |
| 4.5.2 JNK抑制剂SP600125预处理对扁塑藤素作用于胶质瘤细胞引起胞浆内JNK、p-JNK蛋白水平的变化 | 第71页 |
| 4.5.3 JNK抑制剂SP600125预处理对扁塑藤素诱导胶质瘤细胞死亡率的影响 | 第71-72页 |
| 4.5.4 流式细胞术检测JNK抑制剂SP600125预处理对扁塑藤素诱导胶质瘤细胞坏死的影响 | 第72-73页 |
| 4.5.5 JNK抑制剂SP600125预处理对扁塑藤素诱导胶质瘤细胞胞浆、胞核内AIF蛋白水平变化的影响 | 第73页 |
| 4.5.6 流式细胞术检测JNK抑制剂SP600125预处理对扁塑藤素诱导胶质瘤细胞线粒体膜电位变化的影响 | 第73-74页 |
| 4.5.7 JNK抑制剂SP600125预处理对扁塑藤素诱导胶质瘤细胞胞浆内Bax、BCL-2 蛋白水平变化的影响 | 第74页 |
| 4.5.8 si RNA沉默JNK基因对扁塑藤素诱导胶质瘤细胞胞浆内JNK、p-JNK、Bax、BCL-2、AIF以及胞核内AIF蛋白水平变化的影响 | 第74-75页 |
| 4.5.9 流式细胞术检测si RNA沉默JNK基因对扁塑藤素诱导胶质瘤细胞线粒体膜电位变化的影响 | 第75-76页 |
| 4.5.10 流式细胞术检测si RNA沉默JNK基因对扁塑藤素诱导胶质瘤细胞死亡率的影响 | 第76-77页 |
| 4.6 扁塑藤素抑制体内胶质瘤的生长 | 第77-80页 |
| 4.6.1 裸鼠皮下移植胶质瘤模型观察扁塑藤素浓度梯度和时间梯度对移植胶质瘤的影响 | 第77-78页 |
| 4.6.2 扁塑藤素浓度梯度作用于裸鼠皮下移植胶质瘤导致移植瘤细胞胞浆内JNK、p-JNK、Bax、BCL-2、AIF以及胞核内AIF蛋白水平的变化 | 第78-80页 |
| 4.7 ROS促进了扁塑藤素诱导的JNK活化 | 第80-87页 |
| 4.7.1 荧光显微镜观察扁塑藤素诱导胶质瘤细胞内ROS的变化 | 第81页 |
| 4.7.2 DCFH-DA探针检测抗氧化剂NAC对扁塑藤素诱导胶质瘤细胞内ROS变化的影响 | 第81-82页 |
| 4.7.3 荧光显微镜（Mito SOX染色）观察扁塑藤素诱导胶质瘤细胞线粒体内ROS变化的影响 | 第82-83页 |
| 4.7.4 Mito SOX染色检测扁塑藤素诱导胶质瘤细胞线粒体内ROS的变化 | 第83页 |
| 4.7.5 谷胱甘肽检测试剂盒检测扁塑藤素诱导胶质瘤细胞细胞内GSH水平的变化 | 第83页 |
| 4.7.6 抗氧化剂NAC预处理对扁塑藤素诱导胶质瘤细胞坏死的影响 | 第83-84页 |
| 4.7.7 流式细胞术检测抗氧化剂NAC对扁塑藤素诱导胶质瘤细胞坏死的影响 | 第84-85页 |
| 4.7.8 抗氧化剂NAC预处理对扁塑藤素诱导胶质瘤细胞胞浆内JNK、p-JNK、Bax、BCL-2、AIF以及胞核内AIF蛋白水平变化的影响 | 第85-86页 |
| 4.7.9 抗氧化剂NAC预处理对扁塑藤素诱导胶质瘤细胞线粒体膜电位变化的影响 | 第86-87页 |
| 4.8 扁塑藤素诱导胶质瘤细胞坏死的分子机制 | 第87-88页 |
| 第5章 讨论 | 第88-92页 |
| 第6章 结论 | 第92-94页 |
| 参考文献 | 第94-110页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第110-112页 |
| 致谢 | 第112页 |
