| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-36页 |
| 1 副猪嗜血杆菌病概述 | 第12-16页 |
| 1.1 病原学 | 第12页 |
| 1.2 流行病学 | 第12-13页 |
| 1.3 副猪嗜血杆菌的发病机制和毒力因子 | 第13-15页 |
| 1.3.1 副猪嗜血杆菌的发病机制 | 第13-14页 |
| 1.3.2 副猪嗜血杆菌的毒力因子 | 第14-15页 |
| 1.4 副猪嗜血杆菌病诊断与治疗 | 第15-16页 |
| 1.4.1 副猪嗜血杆菌病的诊断 | 第15-16页 |
| 1.4.2 副猪嗜血杆菌病的治疗 | 第16页 |
| 2 细胞自噬概述 | 第16-21页 |
| 2.1 自噬与自噬体的形态及发生过程 | 第16-17页 |
| 2.2 自噬的检测手段 | 第17-19页 |
| 2.2.1 静态检测手段 | 第17-18页 |
| 2.2.2 动态检测手段 | 第18-19页 |
| 2.3 自噬的分子机制及信号通路 | 第19-20页 |
| 2.3.1 自噬形成的分子机制 | 第19-20页 |
| 2.3.2 自噬的信号通路 | 第20页 |
| 2.4 自噬的生理及病理功能 | 第20-21页 |
| 2.4.1 自噬的生理功能 | 第20-21页 |
| 2.4.2 自噬的病理功能 | 第21页 |
| 3 转化生长因子(TGF-β)与细菌感染 | 第21-23页 |
| 3.1 转化生长因子TGF-β概述 | 第21-22页 |
| 3.2 TGF-β1参与细菌对组织的粘附作用 | 第22-23页 |
| 4 转化生长因子(TGF-β)与自噬 | 第23-24页 |
| 4.1 TGF-β调控自噬的相关基因 | 第23-24页 |
| 4.2 TGF-β调控自噬的信号通路 | 第24页 |
| 5 总结 | 第24-26页 |
| 参考文献 | 第26-36页 |
| 第二章 副猪嗜血杆菌感染诱导PK-15细胞发生自噬 | 第36-60页 |
| 1 材料与方法 | 第37-45页 |
| 1.1 细菌与细胞 | 第37页 |
| 1.2 主要试剂 | 第37页 |
| 1.3 细胞培养 | 第37-38页 |
| 1.4 细菌保存与培养 | 第38-39页 |
| 1.5 细菌感染实验 | 第39页 |
| 1.6 细菌的吸附与侵入实验 | 第39页 |
| 1.7 细胞转染实验 | 第39-40页 |
| 1.8 副猪嗜血杆菌诱导自噬研究 | 第40-43页 |
| 1.8.1 Rapa和3-MA的药物毒性试验 | 第40页 |
| 1.8.2 通过Western-blot研究自噬诱导情况 | 第40-42页 |
| 1.8.3 通过激光共聚焦研究自噬诱导情况 | 第42-43页 |
| 1.8.4 通过透射电镜研究自噬诱导情况 | 第43页 |
| 1.9 副猪嗜血杆菌毒力与自噬 | 第43-44页 |
| 1.10 副猪嗜血杆菌诱导自噬机制探究 | 第44页 |
| 1.10.1 紫外线对副猪嗜血杆菌的灭活时间筛选 | 第44页 |
| 1.10.2 强弱毒株副猪嗜血杆菌的侵入试验 | 第44页 |
| 1.10.3 紫外灭活菌株诱导自噬情况 | 第44页 |
| 1.11 自噬对副猪嗜血杆菌的清除作用 | 第44页 |
| 1.12 副猪嗜血杆菌诱导自噬的信号通路 | 第44-45页 |
| 1.13 实验数据统计学分析 | 第45页 |
| 2 实验结果 | 第45-53页 |
| 2.1 Rapa和3-MA的药物毒性试验 | 第45-46页 |
| 2.2 副猪嗜血杆菌感染诱导PK-15细胞产生自噬 | 第46-50页 |
| 2.2.1 副猪嗜血杆菌感染PK-15细胞LC3-Ⅱ蛋白表达 | 第46-47页 |
| 2.2.2 共聚焦显微镜观察副猪嗜血杆菌诱导PK-15细胞自噬发生 | 第47-48页 |
| 2.2.3 优化副猪嗜血杆菌诱导PK-15细胞产生自噬的条件 | 第48-49页 |
| 2.2.4 透射电镜证实副猪嗜血杆菌诱导PK-15细胞发生自噬 | 第49-50页 |
| 2.3 副猪嗜血杆菌毒力与PK-15细胞产生自噬的关系 | 第50页 |
| 2.4 副猪嗜血杆菌诱导自噬与细菌吸附和侵入的关系 | 第50-51页 |
| 2.5 自噬对副猪嗜血杆菌的清除作用 | 第51-52页 |
| 2.6 副猪嗜血杆菌诱导自噬的信号通路 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 第三章 TGF-β1对副猪嗜血杆菌感染PK-15细胞的影响 | 第60-76页 |
| 1 材料与方法 | 第61-66页 |
| 1.1 细菌与细胞 | 第61页 |
| 1.2 主要试剂 | 第61页 |
| 1.3 细菌和细胞的培养 | 第61页 |
| 1.4 筛选细菌最佳吸附和侵入条件 | 第61-62页 |
| 1.5 副猪嗜血杆菌感染对细胞上清TGF-β1的影响 | 第62-64页 |
| 1.5.1 具体试验设计 | 第62-63页 |
| 1.5.2 细胞上清TGF-β1检测方法如下: | 第63-64页 |
| 1.6 TGF-β1对副猪嗜血杆菌侵入的影响 | 第64-65页 |
| 1.7 副猪嗜血杆菌感染和TGF-β1对纤连蛋白Fn和整合素蛋白α5表达量的影响 | 第65页 |
| 1.8 Fn和α5表达对副猪嗜血杆菌侵入的影响 | 第65-66页 |
| 1.8.1 通过流式细胞术筛选Fn和α5最佳干扰效果 | 第65-66页 |
| 1.8.2 Fn和α5对细菌侵入的影响 | 第66页 |
| 1.9 TGF-β1的对PK-15细胞自噬的影响 | 第66页 |
| 2 实验结果 | 第66-72页 |
| 2.1 副猪嗜血杆菌最佳吸附与侵入MOI与作用时间 | 第66-67页 |
| 2.2 副猪嗜血杆菌感染促进PK-15细胞上清TGF-β1的表达 | 第67-68页 |
| 2.3 TGF-β1处理抑制副猪嗜血杆菌的侵入 | 第68页 |
| 2.4 副猪嗜血杆菌感染和TGF-β1处理促进Fn和α5的表达 | 第68-69页 |
| 2.5 Fn和α5表达抑制副猪嗜血杆菌的吸附和侵入 | 第69-71页 |
| 2.6 TGF-β1促进PK-15细胞发生自噬 | 第71-72页 |
| 3 讨论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-76页 |
| 全文总结 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78-80页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 | 第80-82页 |
| 附录 常用试剂的配制 | 第82-84页 |
