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组成型表达猪抗菌肽PF1-PR39的重组干酪乳杆菌构建及生物学活性分析

摘要第8-10页
英文摘要第10-11页
1 前言第12-20页
    1.1 抗菌肽结构与特性的研究进展第12-15页
        1.1.1 抗菌肽的来源第12-13页
        1.1.2 抗菌肽的结构特征第13-14页
        1.1.3 猪源抗菌肽的分类及其特性第14-15页
    1.2 抗菌肽的生物学功能第15-17页
        1.2.1 抗细菌的功能第15-16页
        1.2.2 抗病毒和抗肿瘤的功能第16页
        1.2.3 抗真菌的功能第16页
        1.2.4 抗寄生虫和原虫的功能第16页
        1.2.5 免疫调节功能第16-17页
    1.3 PR39、PF1的结构及抗菌特性和机制第17-18页
    1.4 乳酸菌的益生特性和作为基因工程宿主菌的研究进展第18-19页
    1.5 研究目的与意义第19-20页
2 材料与方法第20-34页
    2.1 材料第20-22页
        2.1.1 菌种与质粒第20页
        2.1.2 实验动物第20页
        2.1.3 引物第20页
        2.1.4 抗体和主要生化试剂第20-21页
        2.1.5 主要实验仪器与设备第21-22页
    2.2 试验方法第22-34页
        2.2.1 猪抗菌肽PF1-PR39基因序列的获得第22-25页
        2.2.2 组成型表达猪抗菌肽PF1-PR39重组干酪乳杆菌的构建第25-28页
        2.2.3 重组干酪乳杆菌的表达与鉴定第28-29页
        2.2.4 重组干酪乳杆菌体外抑菌活性检测第29-30页
        2.2.5 重组干酪乳杆菌饲喂小鼠体内生物学活性检测第30-33页
        2.2.6 统计学分析第33-34页
3 结果第34-47页
    3.1 猪抗菌肽PF1-PR39基因序列的获得第34-35页
        3.1.1 合成基因PF1-PR39的PCR扩增结果第34页
        3.1.2 重组质粒pMD19-Ts-PF1-PR39的鉴定结果第34-35页
    3.2 重组质粒PPH-PPG612-PF1-PR39的鉴定结果第35-36页
    3.3 重组干酪乳杆菌的构建和鉴定第36-37页
    3.4 重组干酪乳杆菌的表达鉴定第37-38页
        3.4.1 重组菌表达蛋白的Western-blot检测第37页
        3.4.2 间接免疫荧光鉴定重组蛋白的表达第37-38页
    3.5 重组干酪乳杆菌的体外抑菌试验结果第38-40页
        3.5.1 动态生长曲线法测量抑菌活性第38-39页
        3.5.2 琼脂孔穴扩散法测量抑菌活性第39-40页
    3.6 重组干酪乳杆菌对小鼠生理功能的影响第40-47页
        3.6.1 重组干酪乳杆菌对小鼠生长性能的影响第40-41页
        3.6.2 重组干酪乳杆菌对小鼠免疫学指标和血液生理指标的影响第41-43页
        3.6.3 小鼠体内抗致病菌感染的保护性实验结果第43-47页
4 讨论第47-51页
    4.1 猪抗菌肽PF1-PR39在干酪乳杆菌中的表达第47-48页
    4.2 重组干酪乳杆菌体外抑菌效果评价第48页
    4.3 重组干酪乳杆菌对小鼠生长性能的影响第48-49页
    4.4 重组干酪乳杆菌对小鼠的免疫调节作用第49-50页
    4.5 表达PF1-PR39的重组干酪乳杆菌作为饲料添加剂的应用前景第50-51页
5 结论第51-52页
致谢第52-53页
参考文献第53-60页
附录第60-64页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第64页

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