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组成型表达鸡致病性大肠杆菌fimA与ompC融合蛋白的重组乳酸杆菌的构建及其在鸡肠道定殖特性的研究

摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-18页
    1.1 禽致病性大肠杆菌及其病原特性第12-14页
        1.1.1 禽大肠杆菌病流行及危害第12-13页
        1.1.2 禽致病性大肠杆菌生物学特性第13-14页
    1.2 禽大肠杆菌病的防治现状第14-15页
    1.3 乳酸杆菌做为黏膜免疫递送载体的研究进展第15-17页
        1.3.1 黏膜免疫的机理研究第15页
        1.3.2 乳酸杆菌递送载体的研究现状第15-17页
    1.4 研究的目的与意义第17-18页
2 材料与方法第18-34页
    2.1 材料第18-19页
        2.1.1 菌种和质粒第18页
        2.1.2 实验动物第18页
        2.1.3 引物合成第18-19页
        2.1.4 主要试剂第19页
        2.1.5 主要实验仪器与设备第19页
    2.2 试验方法第19-34页
        2.2.1 鸡肠道乳酸菌的分离及生化反应特性鉴定第19-22页
        2.2.2 乳杆菌生理特性试验第22页
        2.2.3 乳杆菌体外粘附实验第22-23页
        2.2.4 表达Omp C-FimA融合基因的重组乳酸杆菌的构建第23-31页
        2.2.5 重组乳酸杆菌的表达及鉴定第31页
        2.2.6 重组乳酸杆菌在鸡肠道内的定殖特性第31-34页
3 结果第34-53页
    3.1 鸡肠道内定殖的乳酸菌分离及生化反应特性研究第34-36页
    3.2 乳酸杆菌生理特性试验第36-40页
        3.2.1 乳酸杆菌在 37℃和 42℃生长特性的测定第36-38页
        3.2.2 抑菌实验结果第38页
        3.2.3 药物敏感性实验结果第38-40页
    3.3 乳酸杆菌体外粘附实验结果第40-41页
    3.4 表达OmpC-FimA融合基因的重组乳酸杆菌的构建结果第41-48页
        3.4.1 APEC的O1血清型FimA与OmpC基因的PCR扩增结果第41-44页
        3.4.2 重组乳酸杆菌表达载体pPG-T7g10-PPT-OmpC-FimA的鉴定结果第44-46页
        3.4.3 重组乳酸杆菌表达产物western blot鉴定第46-48页
    3.5 重组乳酸杆菌在鸡肠道内定殖特性分析结果第48-53页
        3.5.1 重组乳酸杆菌的安全性第48-49页
        3.5.2 重组乳酸杆菌在消化道环境中的生存性能第49-50页
        3.5.3 重组乳酸杆菌在鸡肠道内的定殖能力试验第50-53页
4 讨论第53-57页
    4.1 肠道分离的乳酸杆菌的主要生物学特性第53-54页
    4.2 主要免疫保护性抗原基因的选择第54页
    4.3 外源基因在乳酸菌中的表达情况第54-55页
    4.4 外源基因电转化乳酸杆菌的影响因素第55-56页
    4.5 重组乳酸杆菌在肠道中生存和定殖情况第56-57页
5 结论第57-58页
致谢第58-59页
参考文献第59-64页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第64页

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