生物反应器(VERO细胞)培养森脑病毒工艺的摸索
摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
前言 | 第11-18页 |
1 森林脑炎病毒的生物学特性 | 第11-12页 |
2 森林脑炎的流行病学特征 | 第12-13页 |
3 森林脑炎的诊断、预防及治疗 | 第13-15页 |
3.1 森林脑炎的诊断 | 第13-14页 |
3.2 森林脑炎的预防和治疗 | 第14-15页 |
4 森林脑炎疫苗的研究现状 | 第15-16页 |
5 细胞生物反应器的发展及种类 | 第16-17页 |
6 微载体培养技术 | 第17-18页 |
材料与仪器 | 第18-22页 |
1 材料 | 第18-20页 |
1.1 细胞 | 第18页 |
1.2 毒种 | 第18页 |
1.3 主要试剂 | 第18页 |
1.4 实验动物 | 第18页 |
1.5 常用溶液配制 | 第18-20页 |
2 仪器 | 第20-22页 |
方法 | 第22-32页 |
1 生物反应器参数调节及灭菌 | 第22-23页 |
1.1 pH电极的校正 | 第22页 |
1.2 溶氧电极校正 | 第22页 |
1.3 搅拌速度 | 第22页 |
1.4 温度 | 第22页 |
1.5 pH值 | 第22页 |
1.6 溶氧 | 第22-23页 |
1.7 生物反应器高压灭菌 | 第23页 |
3 细胞培养 | 第23-24页 |
3.1 vero细胞的复苏 | 第23页 |
3.2 细胞传代培养 | 第23-24页 |
4 片状载体细胞计数 | 第24页 |
4.1 结晶紫染色计数法 | 第24页 |
4.2 胰酶消化计数法 | 第24页 |
5 细胞接种 | 第24页 |
6 病毒培养 | 第24-25页 |
6.1 病毒接种及培养 | 第24-25页 |
6.2 MOI计算 | 第25页 |
7 原液制备 | 第25页 |
7.1 超滤浓缩 | 第25页 |
7.2 病毒的灭活 | 第25页 |
7.3 柱层析纯化 | 第25页 |
8 检测 | 第25-32页 |
8.1 葡萄糖浓度测定 | 第25-26页 |
8.2 乳酸浓度测定 | 第26页 |
8.3 培养液渗透压检测 | 第26-27页 |
8.4 病毒滴度检测 | 第27页 |
8.5 病毒灭活安全试验 | 第27页 |
8.6 抗原含量检测 | 第27-28页 |
8.7 小牛血清残留量检测 | 第28-29页 |
8.8 Vero细胞宿主蛋白检测 | 第29页 |
8.9 Lowry法检测蛋白含量检测 | 第29-30页 |
8.10 DNA残留量检测 | 第30-32页 |
结果 | 第32-39页 |
1 片状载体细胞计数 | 第32-33页 |
1.1 两种不同细胞计数法的比较 | 第32页 |
1.2 不同细胞接种浓度对平台期细胞密度的影响 | 第32-33页 |
2 培养基中葡萄糖、乳酸浓度分析 | 第33-34页 |
3 渗透压的影响 | 第34页 |
4 不同细胞接种浓度对病毒滴度的影响 | 第34-36页 |
5 MOI(感染复数)对病毒增殖的影响 | 第36-37页 |
6 不同小牛血清浓度对病毒滴度的影响 | 第37-38页 |
7 四批样品检定结果 | 第38-39页 |
结论 | 第39-40页 |
讨论 | 第40-43页 |
1 片状载体的细胞计数的方法 | 第40页 |
2 葡萄糖、乳酸、渗透压的影响 | 第40-41页 |
3 细胞密度、感染复数对病毒产量的影响 | 第41-43页 |
参考文献 | 第43-47页 |
致谢 | 第47页 |