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生物反应器(VERO细胞)培养森脑病毒工艺的摸索

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
前言第11-18页
    1 森林脑炎病毒的生物学特性第11-12页
    2 森林脑炎的流行病学特征第12-13页
    3 森林脑炎的诊断、预防及治疗第13-15页
        3.1 森林脑炎的诊断第13-14页
        3.2 森林脑炎的预防和治疗第14-15页
    4 森林脑炎疫苗的研究现状第15-16页
    5 细胞生物反应器的发展及种类第16-17页
    6 微载体培养技术第17-18页
材料与仪器第18-22页
    1 材料第18-20页
        1.1 细胞第18页
        1.2 毒种第18页
        1.3 主要试剂第18页
        1.4 实验动物第18页
        1.5 常用溶液配制第18-20页
    2 仪器第20-22页
方法第22-32页
    1 生物反应器参数调节及灭菌第22-23页
        1.1 pH电极的校正第22页
        1.2 溶氧电极校正第22页
        1.3 搅拌速度第22页
        1.4 温度第22页
        1.5 pH值第22页
        1.6 溶氧第22-23页
        1.7 生物反应器高压灭菌第23页
    3 细胞培养第23-24页
        3.1 vero细胞的复苏第23页
        3.2 细胞传代培养第23-24页
    4 片状载体细胞计数第24页
        4.1 结晶紫染色计数法第24页
        4.2 胰酶消化计数法第24页
    5 细胞接种第24页
    6 病毒培养第24-25页
        6.1 病毒接种及培养第24-25页
        6.2 MOI计算第25页
    7 原液制备第25页
        7.1 超滤浓缩第25页
        7.2 病毒的灭活第25页
        7.3 柱层析纯化第25页
    8 检测第25-32页
        8.1 葡萄糖浓度测定第25-26页
        8.2 乳酸浓度测定第26页
        8.3 培养液渗透压检测第26-27页
        8.4 病毒滴度检测第27页
        8.5 病毒灭活安全试验第27页
        8.6 抗原含量检测第27-28页
        8.7 小牛血清残留量检测第28-29页
        8.8 Vero细胞宿主蛋白检测第29页
        8.9 Lowry法检测蛋白含量检测第29-30页
        8.10 DNA残留量检测第30-32页
结果第32-39页
    1 片状载体细胞计数第32-33页
        1.1 两种不同细胞计数法的比较第32页
        1.2 不同细胞接种浓度对平台期细胞密度的影响第32-33页
    2 培养基中葡萄糖、乳酸浓度分析第33-34页
    3 渗透压的影响第34页
    4 不同细胞接种浓度对病毒滴度的影响第34-36页
    5 MOI(感染复数)对病毒增殖的影响第36-37页
    6 不同小牛血清浓度对病毒滴度的影响第37-38页
    7 四批样品检定结果第38-39页
结论第39-40页
讨论第40-43页
    1 片状载体的细胞计数的方法第40页
    2 葡萄糖、乳酸、渗透压的影响第40-41页
    3 细胞密度、感染复数对病毒产量的影响第41-43页
参考文献第43-47页
致谢第47页

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