| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 引言 | 第15-17页 |
| 第一章 雌激素及其受体研究综述 | 第17-23页 |
| 1.1 雌激素在动物生殖发育中的调控作用 | 第17-18页 |
| 1.2 雌激素受体ER介导雌激素生殖调控功能的信号传递途径 | 第18-20页 |
| 1.3 雌激素及其受体在海洋无脊椎动物中的研究进展 | 第20-23页 |
| 1.3.1 雌激素在海洋无脊椎动物中的研究进展 | 第20-21页 |
| 1.3.2 雌激素受体在海洋无脊椎动物中的研究进展 | 第21-23页 |
| 第二章 基于转录组的曼氏无针乌贼生殖发育相关功能基因数据挖掘及雌激素受体ER基因解析 | 第23-31页 |
| 2.1 材料与方法 | 第23-25页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.2 总RNA提取 | 第25页 |
| 2.1.3 转录组文库构建和测序 | 第25页 |
| 2.1.4 数据分析和挖掘 | 第25页 |
| 2.2 结果与分析 | 第25-29页 |
| 2.2.1 转录组测序结果统计 | 第25-28页 |
| 2.2.2 unigene表达差异分析 | 第28页 |
| 2.2.3 雌激素受体ER基因的数据挖掘和解析 | 第28-29页 |
| 2.3 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 曼氏无针乌贼雌激素受体ER基因全序列的克隆和特征分析 | 第31-44页 |
| 3.1 材料与方法 | 第31-37页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第31-32页 |
| 3.1.2 总RNA提取 | 第32页 |
| 3.1.3 获取sjER cDNA基因全长 | 第32-37页 |
| 3.2 结果与分析 | 第37-42页 |
| 3.2.1 RNA提取结果 | 第37-38页 |
| 3.2.2 sjER cDNA基因扩增结果 | 第38页 |
| 3.2.3 sjER cDNA基因全长序列的分析 | 第38-39页 |
| 3.2.4 ER氨基酸同源序列分析 | 第39-40页 |
| 3.2.5 ER系统发育分析 | 第40-42页 |
| 3.3 讨论 | 第42-44页 |
| 第四章 曼氏无针乌贼雌激素受体的亚细胞定位和受体类型鉴定 | 第44-50页 |
| 4.1 材料与方法 | 第44-47页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第44-45页 |
| 4.1.2 sjER-EGFP载体的构建 | 第45-46页 |
| 4.1.3 HEK293细胞培养、冻存和复苏 | 第46页 |
| 4.1.4 细胞转染 | 第46-47页 |
| 4.1.5 荧光染料核染和膜染 | 第47页 |
| 4.2 结果与分析 | 第47-48页 |
| 4.2.1 sjER-EGFP表达载体的构建 | 第47页 |
| 4.2.2 sjER在细胞中的定位 | 第47-48页 |
| 4.3 讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 雌激素受体ER在曼氏无针乌贼生殖轴中的分布及在性发育周期中的变动规律研究 | 第50-59页 |
| 5.1 材料与方法 | 第50-55页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第50-51页 |
| 5.1.2 卵巢组织学观测 | 第51-53页 |
| 5.1.3 不同组织总RNA提取 | 第53页 |
| 5.1.4 cDNA模板合成 | 第53页 |
| 5.1.5 实时荧光定量PCR | 第53-54页 |
| 5.1.6 性类固醇激素雌二醇E2浓度测定 | 第54-55页 |
| 5.2 结果与分析 | 第55-56页 |
| 5.2.1 sjER在曼氏无针乌贼生殖轴中的分布 | 第55页 |
| 5.2.2 sjER及雌激素E2在曼氏无针乌贼生殖周期中的协同变动规律 | 第55-56页 |
| 5.3 讨论 | 第56-59页 |
| 5.3.1 sjER在曼氏无针乌贼生殖轴中的分布 | 第56-57页 |
| 5.3.2 sjER在曼氏无针乌贼生殖周期中的变动规律及其与雌激素的关系 | 第57-59页 |
| 第六章 曼氏无针乌贼雌激素受体ER介导的细胞信号转导功能初探 | 第59-68页 |
| 6.1 材料与方法 | 第59-63页 |
| 6.1.1 实验仪器 | 第59-60页 |
| 6.1.2 实验试剂 | 第60页 |
| 6.1.3 实验耗材 | 第60页 |
| 6.1.4 ERE-pGL3载体的构建 | 第60-61页 |
| 6.1.5 Flag-sjER | 第61-62页 |
| 6.1.6 HEK293细胞培养、冻存和复苏 | 第62页 |
| 6.1.7 细胞转染 | 第62页 |
| 6.1.8 ERE-pGL3含量检测 | 第62页 |
| 6.1.9 Ca~(2+)流检测 | 第62页 |
| 6.1.10 cAMP含量检测 | 第62-63页 |
| 6.2 结果与分析 | 第63-65页 |
| 6.2.1 曼氏无针乌贼雌激素受体激活ERE靶基因的作用特性分析 | 第63页 |
| 6.2.2 Ca~(2+)检测 | 第63-64页 |
| 6.2.3 cAMP检测 | 第64-65页 |
| 6.3 讨论 | 第65-68页 |
| 6.3.1 曼氏无针乌贼雌激素受体激活ERE靶基因的作用特性分析 | 第65-66页 |
| 6.3.2 雌激素受体介导的cAMP信号途径及Ca~(2+)流的检测 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第78页 |
