| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-30页 |
| 1.1 研究背景 | 第12页 |
| 1.2 普瑞巴林 | 第12-15页 |
| 1.2.1 普瑞巴林 | 第12-13页 |
| 1.2.2 普瑞巴林合成途径 | 第13-15页 |
| 1.3 重组大肠杆菌高密度发酵 | 第15-19页 |
| 1.3.1 培养基 | 第16-17页 |
| 1.3.2 温度 | 第17页 |
| 1.3.3 pH | 第17页 |
| 1.3.4 溶氧 | 第17-18页 |
| 1.3.5 补料策略 | 第18-19页 |
| 1.4 固定化脂肪酶 | 第19-23页 |
| 1.4.1 脂肪酶简介 | 第19-20页 |
| 1.4.2 固定化方法 | 第20-23页 |
| 1.5 选题意义及研究内容 | 第23-24页 |
| 1.5.1 本论文选题意义 | 第23-24页 |
| 1.5.2 本论文研究内容 | 第24页 |
| 参考文献 | 第24-30页 |
| 第二章 E. coli BL21(DE3)/pET28b-TLL5L发酵罐分批发酵工艺优化 | 第30-45页 |
| 2.1 前言 | 第30页 |
| 2.2 材料与方法 | 第30-33页 |
| 2.2.1 菌种与培养基 | 第30-31页 |
| 2.2.2 仪器设备(见附录Ⅰ) | 第31页 |
| 2.2.3 发酵工艺 | 第31-32页 |
| 2.2.4 发酵结果分析方法 | 第32-33页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第33-43页 |
| 2.3.1 菌体OD_(600)值与干重的关系 | 第33页 |
| 2.3.2 摇瓶发酵培养基优化 | 第33-34页 |
| 2.3.3 诱导剂对工程菌生长及其产脂肪酶的影响 | 第34-38页 |
| 2.3.4 溶氧对工程菌生长及其产脂肪酶的影响 | 第38-39页 |
| 2.3.5 pH对工程菌生长及其产脂肪酶的影响 | 第39-41页 |
| 2.3.6 诱导温度对工程菌生长及其产脂肪酶的影响 | 第41-43页 |
| 2.3.7 重复试验 | 第43页 |
| 2.4 本章小结 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-45页 |
| 第三章 E.coli BL21 (DE3) /pET28b-TLL 5L发酵罐分批补料发酵工艺研究 | 第45-56页 |
| 3.1 前言 | 第45页 |
| 3.2 材料与方法 | 第45-47页 |
| 3.2.1 材料 | 第45-46页 |
| 3.2.2 方法 | 第46-47页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第47-54页 |
| 3.3.1 不同补料培养基对工程菌生长和脂肪酶表达的影响 | 第47-48页 |
| 3.3.2 补料控制工艺的选择 | 第48-50页 |
| 3.3.3 诱导时机对工程菌生长和脂肪酶表达的影响 | 第50-51页 |
| 3.3.4 诱导剂浓度对工程菌生长和脂肪酶表达的影响 | 第51-53页 |
| 3.3.5 验证实验 | 第53-54页 |
| 3.4 本章小结 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-56页 |
| 第四章 脂肪酶交联聚集体制备及性质研究 | 第56-74页 |
| 4.1 前言 | 第56页 |
| 4.2 材料与方法 | 第56-61页 |
| 4.2.1 酶来源 | 第56页 |
| 4.2.2 培养基 | 第56页 |
| 4.2.3 仪器与设备 | 第56页 |
| 4.2.4 菌体收集 | 第56-57页 |
| 4.2.5 粗酶液制备 | 第57页 |
| 4.2.6 交联酶聚集体的制备 | 第57-59页 |
| 4.2.7 交联酶聚集体酶学性质 | 第59-60页 |
| 4.2.8 分析方法 | 第60-61页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第61-72页 |
| 4.3.1 蛋白质标准曲线 | 第61页 |
| 4.3.2 交联酶制备条件 | 第61-67页 |
| 4.3.3 交联酶性质研究 | 第67-72页 |
| 4.4 本章小结 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-74页 |
| 第五章 结论与展望 | 第74-76页 |
| 5.1 结论 | 第74-75页 |
| 5.2 展望 | 第75-76页 |
| 附录 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
