摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 绪论 | 第15-23页 |
1.1 microRNAs的概述 | 第15页 |
1.2 miRNA-149*的研究进展 | 第15-18页 |
1.2.1 心肌梗死 | 第16页 |
1.2.2 骨骼肌受损 | 第16-17页 |
1.2.3 胶质瘤 | 第17页 |
1.2.4 结肠癌 | 第17页 |
1.2.5 乳腺癌 | 第17-18页 |
1.2.6 黑色素瘤 | 第18页 |
1.3 肝脏炎症的概况 | 第18-20页 |
1.3.1 肝脏炎症的分类 | 第18-20页 |
1.3.2 肝脏炎症的防治 | 第20页 |
1.4 STAT3信号途径的简介 | 第20-21页 |
1.5 CRISPR/Cas9基因敲除 | 第21-23页 |
第二章 实验试剂材料及方法 | 第23-43页 |
2.1 实验试剂材料 | 第23-24页 |
2.1.1 实验动物 | 第23页 |
2.1.2 实验细胞 | 第23页 |
2.1.3 实验试剂 | 第23-24页 |
2.2 实验试剂的配制 | 第24-28页 |
2.3 实验步骤 | 第28-43页 |
2.3.1 小鼠鉴定 | 第28-29页 |
2.3.2 细胞培养 | 第29-30页 |
2.3.3 细胞转染 | 第30页 |
2.3.4 小鼠组织以及细胞的RNA提取 | 第30-31页 |
2.3.5 小鼠组织以及细胞的microRNA提取 | 第31页 |
2.3.6 RNA反转录 | 第31-33页 |
2.3.7 实时定量PCR | 第33-34页 |
2.3.8 肝脏组织和细胞蛋白提取 | 第34-35页 |
2.3.9 蛋白浓度测定 | 第35页 |
2.3.10 western-blot | 第35-36页 |
2.3.11 荧光素酶报告基因实验 | 第36页 |
2.3.12 AST检测 | 第36页 |
2.3.13 质粒的制备 | 第36-37页 |
2.3.14 质粒小提 | 第37-38页 |
2.3.15 质粒大提 | 第38页 |
2.3.16 质粒突变 | 第38-39页 |
2.3.17 石蜡切片制备 | 第39-40页 |
2.3.18 KI-67染色 | 第40-41页 |
2.3.19 TUNEL染色 | 第41-43页 |
第三章 实验结果与讨论 | 第43-59页 |
3.1 小鼠鉴定 | 第43-46页 |
3.2 小鼠实验 | 第46-53页 |
3.2.1 建立小鼠模型 | 第46-47页 |
3.2.2 miRNA149*对炎症基因的抑制作用 | 第47-49页 |
3.2.3 检测血清中的AST水平 | 第49-50页 |
3.2.4 对肝脏组织切片进行TUNEL染色 | 第50-51页 |
3.2.5 对肝脏组织切片进行KI-67染色 | 第51-52页 |
3.2.6 miRNA149*对p-stat3蛋白的抑制作用 | 第52-53页 |
3.2.7 小鼠实验结论 | 第53页 |
3.3 HepG2细胞实验 | 第53-57页 |
3.3.1 miRNA149*抑制stat3信号通路下游基因的表达 | 第53-54页 |
3.3.2 miRNA149*抑制LPS诱导的炎症 | 第54-55页 |
3.3.3 miRNA149*抑制IL-6诱导的stat3磷酸化 | 第55-56页 |
3.3.4 miRNA149*对HepG2细胞中STAT3转录活性的抑制作用 | 第56-57页 |
3.4 细胞实验结论 | 第57-59页 |
第四章 结论与展望 | 第59-61页 |
参考文献 | 第61-65页 |
附录 | 第65-69页 |
致谢 | 第69-71页 |
研究成果及发表的学术论文 | 第71-73页 |
作者简介 | 第73-75页 |
导师简介 | 第75-76页 |
附件 | 第76-77页 |