摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 绪论 | 第11-26页 |
1.1 谷胱甘肽概述 | 第11-13页 |
1.1.1 谷胱甘肽结构及性质 | 第11-12页 |
1.1.2 谷胱甘肽在自然界的分布 | 第12页 |
1.1.3 谷胱甘肽的生理功能 | 第12-13页 |
1.1.4 谷胱甘肽的应用 | 第13页 |
1.2 谷胱甘肽的生产 | 第13-22页 |
1.2.1 溶剂萃取法 | 第14页 |
1.2.2 化学合成法 | 第14-15页 |
1.2.3 酶法 | 第15页 |
1.2.4 发酵法 | 第15-22页 |
1.2.4.1 高产菌株优选 | 第17-20页 |
1.2.4.2 发酵工艺条件研究 | 第20-22页 |
1.3 谷胱甘肽的提取及分离纯化 | 第22-23页 |
1.3.1 谷胱甘肽提取方法的研究 | 第22页 |
1.3.2 谷胱甘肽分离纯化方法的研究 | 第22-23页 |
1.3.2.1 铜盐法 | 第22页 |
1.3.2.2 离子交换树脂法 | 第22-23页 |
1.3.2.3 双水相法 | 第23页 |
1.4 谷胱甘肽的测定方法 | 第23-25页 |
1.4.1 酶循环法 | 第23-24页 |
1.4.2 亚硝基铁氰化钠法 | 第24页 |
1.4.3 四氧嘧啶法 | 第24页 |
1.4.4 高效液相色谱法 | 第24-25页 |
1.5 本研究的意义及主要内容 | 第25-26页 |
1.5.1 研究的意义 | 第25页 |
1.5.2 研究的主要内容 | 第25-26页 |
第二章 材料与方法 | 第26-38页 |
2.1 实验材料 | 第26-29页 |
2.1.1 材料 | 第26页 |
2.1.2 主要试剂 | 第26-27页 |
2.1.3 主要仪器 | 第27-28页 |
2.1.4 主要试剂的配制 | 第28-29页 |
2.2 实验方法 | 第29-38页 |
2.2.1 菌种的选育及保藏 | 第29页 |
2.2.1.1 培养基 | 第29页 |
2.2.1.2 培养方式 | 第29页 |
2.2.2 分析测定方法 | 第29-32页 |
2.2.2.1 细胞干重的测定 | 第29-30页 |
2.2.2.2 蛋白质含量的测定 | 第30页 |
2.2.2.3 葡萄糖含量的测定 | 第30页 |
2.2.2.4 GSH含量的测定—四氧嘧啶法 | 第30-31页 |
2.2.2.5 GSH回收率的计算 | 第31页 |
2.2.2.6 蛋白去除率的计算 | 第31页 |
2.2.2.7 树脂吸附率的计算 | 第31-32页 |
2.2.3 高产菌株的筛选 | 第32页 |
2.2.4 培养基的优化实验 | 第32页 |
2.2.5 热水抽提法提取GSH的优化实验 | 第32-34页 |
2.2.5.1 料水比对提取效率的影响 | 第33页 |
2.2.5.2 pH值对提取效率的影响 | 第33页 |
2.2.5.3 温度对提取效率的影响 | 第33页 |
2.2.5.4 提取时间对提取效率的影响 | 第33页 |
2.2.5.5 热水抽提法的正交实验优化设计 | 第33-34页 |
2.2.6 乙醇抽提法提取GSH的优化实验 | 第34-35页 |
2.2.6.1 料液比对提取效率的影响 | 第34页 |
2.2.6.2 乙醇浓度对提取效率的影响 | 第34页 |
2.2.6.3 提取时间对提取效率的影响 | 第34-35页 |
2.2.6.4 乙醇抽提法的正交实验优化设计 | 第35页 |
2.2.7 GSH的分离纯化 | 第35-38页 |
2.2.7.1 大孔树脂D0017的预处理及再生 | 第35-36页 |
2.2.7.2 GSH分离静态吸附实验—上样液pH值 | 第36页 |
2.2.7.3 GSH分离静态解吸实验—洗脱液种类及其pH值 | 第36页 |
2.2.7.4 GSH分离静态解吸实验—洗脱液中添加不同浓度的NaCl | 第36页 |
2.2.7.5 GSH动态分离实验 | 第36-37页 |
2.2.7.6 Sephadex G-10的预处理及再生 | 第37页 |
2.2.7.7 Sephadex G-10分离纯化 | 第37-38页 |
第三章 结果与讨论 | 第38-53页 |
3.1 产GSH菌株的选育 | 第38-41页 |
3.1.1 菌种初筛 | 第38页 |
3.1.2 酿酒酵母培养基的优化 | 第38-41页 |
3.1.2.1 氨基酸对酿酒酵母产GSH的影响 | 第38-39页 |
3.1.2.2 L-半胱氨酸的添加时间及模式对产GSH的影响 | 第39-40页 |
3.1.2.3 补加葡萄糖对酿酒酵母产GSH的影响 | 第40-41页 |
3.2 提取GSH的两种方法 | 第41-48页 |
3.2.1 热水抽提法单因素条件 | 第41-44页 |
3.2.1.1 料水比对提取效果的影响 | 第41-42页 |
3.2.1.2 pH值对提取效果的影响 | 第42-43页 |
3.2.1.3 温度对提取效果的影响 | 第43页 |
3.2.1.4 提取时间对提取效果的影响 | 第43-44页 |
3.2.2 热水抽提条件的正交优化 | 第44-45页 |
3.2.3 乙醇提取法单因素条件 | 第45-47页 |
3.2.3.1 料液比对提取效果的影响 | 第45页 |
3.2.3.2 乙醇浓度对提取效果的影响 | 第45-46页 |
3.2.3.3 提取时间对提取效果的影响 | 第46-47页 |
3.2.4 乙醇提取条件的正交优化 | 第47页 |
3.2.5 两种提取GSH方法的比较 | 第47-48页 |
3.3 GSH的分离纯化 | 第48-53页 |
3.3.1 静态吸附解吸实验 | 第48-51页 |
3.3.1.1 前期提取GSH实验结果 | 第48页 |
3.3.1.2 上样液最佳pH值 | 第48-49页 |
3.3.1.3 洗脱液种类及其pH值 | 第49-50页 |
3.3.1.4 洗脱液中添加NaCl对分离效果的影响 | 第50-51页 |
3.3.2 动态分离GSH实验 | 第51页 |
3.3.3 GSH纯化实验 | 第51-53页 |
第四章 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
附录 | 第59页 |