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微生物法制备还原型谷胱甘肽的工艺研究

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第一章 绪论第11-26页
    1.1 谷胱甘肽概述第11-13页
        1.1.1 谷胱甘肽结构及性质第11-12页
        1.1.2 谷胱甘肽在自然界的分布第12页
        1.1.3 谷胱甘肽的生理功能第12-13页
        1.1.4 谷胱甘肽的应用第13页
    1.2 谷胱甘肽的生产第13-22页
        1.2.1 溶剂萃取法第14页
        1.2.2 化学合成法第14-15页
        1.2.3 酶法第15页
        1.2.4 发酵法第15-22页
            1.2.4.1 高产菌株优选第17-20页
            1.2.4.2 发酵工艺条件研究第20-22页
    1.3 谷胱甘肽的提取及分离纯化第22-23页
        1.3.1 谷胱甘肽提取方法的研究第22页
        1.3.2 谷胱甘肽分离纯化方法的研究第22-23页
            1.3.2.1 铜盐法第22页
            1.3.2.2 离子交换树脂法第22-23页
            1.3.2.3 双水相法第23页
    1.4 谷胱甘肽的测定方法第23-25页
        1.4.1 酶循环法第23-24页
        1.4.2 亚硝基铁氰化钠法第24页
        1.4.3 四氧嘧啶法第24页
        1.4.4 高效液相色谱法第24-25页
    1.5 本研究的意义及主要内容第25-26页
        1.5.1 研究的意义第25页
        1.5.2 研究的主要内容第25-26页
第二章 材料与方法第26-38页
    2.1 实验材料第26-29页
        2.1.1 材料第26页
        2.1.2 主要试剂第26-27页
        2.1.3 主要仪器第27-28页
        2.1.4 主要试剂的配制第28-29页
    2.2 实验方法第29-38页
        2.2.1 菌种的选育及保藏第29页
            2.2.1.1 培养基第29页
            2.2.1.2 培养方式第29页
        2.2.2 分析测定方法第29-32页
            2.2.2.1 细胞干重的测定第29-30页
            2.2.2.2 蛋白质含量的测定第30页
            2.2.2.3 葡萄糖含量的测定第30页
            2.2.2.4 GSH含量的测定—四氧嘧啶法第30-31页
            2.2.2.5 GSH回收率的计算第31页
            2.2.2.6 蛋白去除率的计算第31页
            2.2.2.7 树脂吸附率的计算第31-32页
        2.2.3 高产菌株的筛选第32页
        2.2.4 培养基的优化实验第32页
        2.2.5 热水抽提法提取GSH的优化实验第32-34页
            2.2.5.1 料水比对提取效率的影响第33页
            2.2.5.2 pH值对提取效率的影响第33页
            2.2.5.3 温度对提取效率的影响第33页
            2.2.5.4 提取时间对提取效率的影响第33页
            2.2.5.5 热水抽提法的正交实验优化设计第33-34页
        2.2.6 乙醇抽提法提取GSH的优化实验第34-35页
            2.2.6.1 料液比对提取效率的影响第34页
            2.2.6.2 乙醇浓度对提取效率的影响第34页
            2.2.6.3 提取时间对提取效率的影响第34-35页
            2.2.6.4 乙醇抽提法的正交实验优化设计第35页
        2.2.7 GSH的分离纯化第35-38页
            2.2.7.1 大孔树脂D0017的预处理及再生第35-36页
            2.2.7.2 GSH分离静态吸附实验—上样液pH值第36页
            2.2.7.3 GSH分离静态解吸实验—洗脱液种类及其pH值第36页
            2.2.7.4 GSH分离静态解吸实验—洗脱液中添加不同浓度的NaCl第36页
            2.2.7.5 GSH动态分离实验第36-37页
            2.2.7.6 Sephadex G-10的预处理及再生第37页
            2.2.7.7 Sephadex G-10分离纯化第37-38页
第三章 结果与讨论第38-53页
    3.1 产GSH菌株的选育第38-41页
        3.1.1 菌种初筛第38页
        3.1.2 酿酒酵母培养基的优化第38-41页
            3.1.2.1 氨基酸对酿酒酵母产GSH的影响第38-39页
            3.1.2.2 L-半胱氨酸的添加时间及模式对产GSH的影响第39-40页
            3.1.2.3 补加葡萄糖对酿酒酵母产GSH的影响第40-41页
    3.2 提取GSH的两种方法第41-48页
        3.2.1 热水抽提法单因素条件第41-44页
            3.2.1.1 料水比对提取效果的影响第41-42页
            3.2.1.2 pH值对提取效果的影响第42-43页
            3.2.1.3 温度对提取效果的影响第43页
            3.2.1.4 提取时间对提取效果的影响第43-44页
        3.2.2 热水抽提条件的正交优化第44-45页
        3.2.3 乙醇提取法单因素条件第45-47页
            3.2.3.1 料液比对提取效果的影响第45页
            3.2.3.2 乙醇浓度对提取效果的影响第45-46页
            3.2.3.3 提取时间对提取效果的影响第46-47页
        3.2.4 乙醇提取条件的正交优化第47页
        3.2.5 两种提取GSH方法的比较第47-48页
    3.3 GSH的分离纯化第48-53页
        3.3.1 静态吸附解吸实验第48-51页
            3.3.1.1 前期提取GSH实验结果第48页
            3.3.1.2 上样液最佳pH值第48-49页
            3.3.1.3 洗脱液种类及其pH值第49-50页
            3.3.1.4 洗脱液中添加NaCl对分离效果的影响第50-51页
        3.3.2 动态分离GSH实验第51页
        3.3.3 GSH纯化实验第51-53页
第四章 结论第53-54页
参考文献第54-58页
致谢第58-59页
附录第59页

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