| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章：热休克蛋白HSP70和MRJ协同UPAR调控肿瘤细胞的黏附和迁移 | 第11-32页 |
| 绪论 | 第11-12页 |
| 1.1 实验材料 | 第12-14页 |
| 1.1.1 药品与试剂 | 第12-13页 |
| 1.1.2 耗材和仪器 | 第13页 |
| 1.1.3 质粒 | 第13页 |
| 1.1.4 抗体及荧光染料 | 第13页 |
| 1.1.5 溶液配方 | 第13-14页 |
| 1.2 实验方法 | 第14-18页 |
| 1.2.1 细胞培养及转染 | 第14页 |
| 1.2.2 免疫荧光显微术(Immunofluorescence microscopy) | 第14页 |
| 1.2.3 流式细胞术(flow cytometry)测细胞表面uPAR | 第14-15页 |
| 1.2.4 MTT检测细胞增殖 | 第15页 |
| 1.2.5 流式细胞术检测细胞周期 | 第15页 |
| 1.2.6 细胞迁移实验(Transwell assay) | 第15-16页 |
| 1.2.7 伤口愈合实验(wound healing assay) | 第16页 |
| 1.2.8 实时定量PCR(Real-time quantitative PCR) | 第16-17页 |
| 1.2.9 Western blotting | 第17-18页 |
| 1.3 实验结果 | 第18-29页 |
| 1.3.1 免疫荧光检测HSP70和uPAR在HEK293 uPAR细胞的细胞膜上和细胞质上的共定位 | 第18-19页 |
| 1.3.2 半外源免疫荧光检测Hela细胞中HSP70和suPAR的共定位 | 第19-20页 |
| 1.3.3 siRNA介导的HSP70&MRJ的下调抑制细胞表面uPAR表达 | 第20-21页 |
| 1.3.4 MTT实验检测HSP70&MRJ下调对uPAR介导的细胞增殖的影响 | 第21页 |
| 1.3.5 HSP70&MRJ干扰对uPAR介导的细胞周期的影响 | 第21-22页 |
| 1.3.6 siRNA介导的HSP70&MRJ表达下调抑制了HCT116细胞的迁移(transwell实验) | 第22-23页 |
| 1.3.7 siRNA介导的HSP70&MRJ表达下调抑制了HCT116细胞的迁移(伤口愈合实验) | 第23-24页 |
| 1.3.8 siRNA介导的HSP70&MRJ下调对肿瘤转移基因MMP-2和MMP-9的mRNA水平的影响 | 第24-26页 |
| 1.3.9 HSP70&MRJ过表达对uPAR介导的信号通路的影响 | 第26-29页 |
| 1.4 本章小结 | 第29页 |
| 1.5 讨论 | 第29-31页 |
| 参考文献 | 第31-32页 |
| 第二章：乳癌细胞中MRJ稳定干扰导致MMP-9表达增强和细胞骨架重排 | 第32-46页 |
| 绪论 | 第32-33页 |
| 2.1 实验材料和方法 | 第33-36页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第33页 |
| 2.1.2 细胞培养和转染 | 第33页 |
| 2.1.3 MDA-MB-231/MRJsi多克隆稳定细胞系的构建 | 第33-34页 |
| 2.1.4 实时定量PCR(Real-time quantitative PCR or Q-PCR)分析 | 第34页 |
| 2.1.5 免疫荧光显微术(Immunofluorescence microscopy)分析 | 第34-35页 |
| 2.1.6 明胶酶谱法 | 第35页 |
| 2.1.7 统计学分析 | 第35-36页 |
| 2.2 实验结果 | 第36-41页 |
| 2.2.1 MDA-MB-231/MRJsi稳定细胞系的构建 | 第36-37页 |
| 2.2.2 MRJ下调对细胞骨架蛋白微丝的影响 | 第37-38页 |
| 2.2.3 MRJ下调对细胞骨架蛋白微管的影响 | 第38-39页 |
| 2.2.4 干扰MRJ对MMP-2和MMP-9酶活性的影响 | 第39-40页 |
| 2.2.5 干扰MRJ对MMP-9 mRNA的影响 | 第40-41页 |
| 2.3 本章小结 | 第41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-44页 |
| 参考文献 | 第44-46页 |
| 第三章 ：综述 | 第46-68页 |
| 第一节 UPAR和肿瘤迁移 | 第46-52页 |
| 第二节 热休克蛋白HSP70/MRJ和肿瘤 | 第52-60页 |
| 第三节 HSP70&MRJ和UPAR的生物学相关性及相互作用的特异性 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
