| 摘要 | 第9-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 第一章 前言 | 第16-39页 |
| 1 水平基因转移的意义 | 第16-17页 |
| 2 细菌转化 | 第17-18页 |
| 3 自然遗传转化 | 第18-28页 |
| 3.1 自然转化的起源与目的学说 | 第19-20页 |
| 3.2 感受态的建立机制 | 第20-25页 |
| 3.3 DNA摄取机制 | 第25-28页 |
| 4 大肠杆菌自然遗传转化 | 第28-36页 |
| 4.1 低浓度钙离子条件下的转化 | 第29-30页 |
| 4.2 平板条件下的自然转化 | 第30-31页 |
| 4.3 大肠杆菌感受态同源基因的研究 | 第31-36页 |
| 4.4 本研究组建立的自然遗传转化体系 | 第36页 |
| 5 固相基质表面应答及与自然遗传转化的关系 | 第36-37页 |
| 6 本研究的目的和意义 | 第37-39页 |
| 第二章 营养条件对自然遗传转化的影响 | 第39-50页 |
| 1 引言 | 第39-41页 |
| 1.1 菌株和质粒 | 第39-40页 |
| 1.2 培养基和溶液 | 第40页 |
| 1.3 实验仪器和试剂 | 第40-41页 |
| 2 实验方法 | 第41-42页 |
| 2.1 质粒提取 | 第41页 |
| 2.2 转化体系 | 第41-42页 |
| 2.3 碳氮源对自然遗传转化的影响实验 | 第42页 |
| 3 实验结果 | 第42-48页 |
| 3.1 碳源对自然遗传转化的影响 | 第42-44页 |
| 3.2 氮源对自然遗传转化的影响 | 第44-45页 |
| 3.3 碳氮比对自然遗传转化的影响 | 第45-46页 |
| 3.4 丰富营养及寡营养与自然遗传转化的关系 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-49页 |
| 5 小结 | 第49-50页 |
| 第三章 cAMP-CRP对自然遗传转化的影响 | 第50-82页 |
| 1 引言 | 第50-52页 |
| 2 实验材料 | 第52-57页 |
| 2.1 菌株、质粒和引物 | 第52-55页 |
| 2.2 培养基和溶液 | 第55-56页 |
| 2.3 实验仪器和试剂 | 第56-57页 |
| 3 实验方法 | 第57-65页 |
| 3.1 总蛋白含量测定 | 第57页 |
| 3.2 cAMP含量测定 | 第57-58页 |
| 3.3 大肠杆菌人工转化方法 | 第58-59页 |
| 3.4 crp回补质粒及回补菌株的构建 | 第59页 |
| 3.5 β-半乳糖苷酶活性测定 | 第59-60页 |
| 3.6 pRPZ质粒浓度检测 | 第60页 |
| 3.7 Western Blotting方法检测RpoS蛋白含量 | 第60-61页 |
| 3.8 构建CRP结合位点突变的rpoS表达载体 | 第61-62页 |
| 3.9 一步法基因敲除 | 第62-64页 |
| 3.10 诱导型表达质粒pARA构建 | 第64-65页 |
| 3.11 单基因敲除菌株鉴定 | 第65页 |
| 4 实验结果 | 第65-78页 |
| 4.1 碳源转运代谢协同PTS对自然遗传转化的作用 | 第65-66页 |
| 4.2 碳源与cAMP的关系以及对自然遗传转化的影响 | 第66-67页 |
| 4.3 cAMP-CRP对自然遗传转化具有抑制作用 | 第67-70页 |
| 4.4 cAMP-CRP对rpoS的调控方式研究 | 第70-74页 |
| 4.5 cAMP-CRP对自然遗传转化的抑制作用与rpoS的关系 | 第74-76页 |
| 4.6 碳源对rpoS表达的影响 | 第76-78页 |
| 5 讨论 | 第78-80页 |
| 6 小结 | 第80-82页 |
| 第四章 围绕rpoS调控通路和其他通路的探索 | 第82-98页 |
| 1 引言 | 第82-83页 |
| 2 实验材料 | 第83-89页 |
| 2.1 菌株、质粒和引物 | 第83-89页 |
| 2.2 实验仪器和试剂 | 第89页 |
| 3 实验方法 | 第89-90页 |
| 4 实验结果 | 第90-96页 |
| 4.1 rpoS上下游相关基因的筛选 | 第90-92页 |
| 4.2 氧化压力相关基因的筛选 | 第92-93页 |
| 4.3 其他相关通路基因的筛选 | 第93-96页 |
| 5 讨论 | 第96-97页 |
| 6 小结 | 第97-98页 |
| 第五章 氧化压力对自然遗传转化的作用 | 第98-112页 |
| 1 引言 | 第98-99页 |
| 2 实验材料 | 第99-100页 |
| 2.1 菌株、质粒和引物 | 第99-100页 |
| 2.2 实验仪器和试剂 | 第100页 |
| 3 实验方法 | 第100页 |
| 4 实验结果 | 第100-109页 |
| 4.1 氧化压力相关基因缺失对自然遗传转化的影响 | 第100-103页 |
| 4.2 过氧化氢及超氧化物对自然遗传转化的作用 | 第103-105页 |
| 4.3 胞内铁离子与ROS的协同效应与自然遗传转化的关系 | 第105-107页 |
| 4.4 过氧化氢对人工转化的影响 | 第107-108页 |
| 4.5 rpoS、oxyR及与自然遗传转化之间的关系 | 第108-109页 |
| 5 讨论 | 第109-110页 |
| 6 小结 | 第110-112页 |
| 总结与展望 | 第112-115页 |
| 参考文献 | 第115-130页 |
| 博士研究生期间科研成果 | 第130-131页 |
| 致谢 | 第131-132页 |
