| 论文创新点 | 第5-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 中英文对照表 | 第14-15页 |
| 第1章 前言 | 第15-62页 |
| 1.1 蛋白质错误折叠和相关疾病 | 第15-30页 |
| 1.1.1 蛋白质错误折叠相关疾病 | 第15-17页 |
| 1.1.2 蛋白质折叠和错误折叠机制 | 第17-20页 |
| 1.1.3 蛋白质质量控制系统 | 第20-24页 |
| 1.1.4 神经退行性疾病 | 第24-28页 |
| 1.1.5 Tau蛋白相关疾病 | 第28-30页 |
| 1.2 蛋白质结构和功能 | 第30-34页 |
| 1.2.1 Tau蛋白结构与功能 | 第30-32页 |
| 1.2.2 PDI的结构与功能 | 第32-34页 |
| 1.3 Tau蛋白错误折叠和致病机制 | 第34-44页 |
| 1.3.1 Tauopathies致病机制 | 第34-39页 |
| 1.3.2 Tau蛋白错误折叠机制 | 第39-42页 |
| 1.3.3 纤维形成片段 | 第42-44页 |
| 1.4 在体外/体内/细胞水平研究Tau蛋白错误折叠 | 第44-50页 |
| 1.4.1 在体外/体内水平研究Tau蛋白错误折叠 | 第44-48页 |
| 1.4.2 细胞模型中研究Tau蛋白错误折叠 | 第48-50页 |
| 1.5 本课题的研究内容和意义 | 第50-52页 |
| 1.6 研究方法 | 第52-62页 |
| 1.6.1 荧光光谱法 | 第52-53页 |
| 1.6.2 紫外光谱法 | 第53-54页 |
| 1.6.3 等温滴定量热法 | 第54-56页 |
| 1.6.4 负染法透射电子显微镜观察 | 第56-57页 |
| 1.6.5 免疫技术 | 第57-59页 |
| 1.6.6 量子点标记技术 | 第59-60页 |
| 1.6.7 细胞凋亡检测技术 | 第60-62页 |
| 第2章 可诱导的细胞模型中人Tau蛋白的错误折叠具有序列依赖性 | 第62-114页 |
| 2.1 摘要 | 第62-63页 |
| 2.2 引言 | 第63-64页 |
| 2.3 实验器材 | 第64-66页 |
| 2.3.1 实验材料 | 第64-66页 |
| 2.3.2 仪器 | 第66页 |
| 2.4 实验方法 | 第66-76页 |
| 2.4.1 载体构建 | 第66-68页 |
| 2.4.2 蛋白纯化 | 第68-69页 |
| 2.4.3 细胞培养和转染 | 第69页 |
| 2.4.4 稳转细胞系的建立 | 第69-70页 |
| 2.4.5 刚果红与Tau蛋白结合分析 | 第70-71页 |
| 2.4.6 透射电子显微镜观察 | 第71页 |
| 2.4.7 免疫染色结合激光扫描共聚焦荧光显微镜观察 | 第71-73页 |
| 2.4.8 免疫染色结合超高分辨率荧光显微镜观察 | 第73页 |
| 2.4.9 免疫印迹检测 | 第73-74页 |
| 2.4.10 免疫电子显微镜观察 | 第74-75页 |
| 2.4.11 量子点标记探针结合Annexin V-FITC染色观察细胞凋亡 | 第75页 |
| 2.4.12 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第75-76页 |
| 2.4.13 MTT检测细胞毒性 | 第76页 |
| 2.5 实验结果 | 第76-109页 |
| 2.5.1 体外水平刚果红诱导Tau蛋白的聚集具有序列依赖性 | 第76-84页 |
| 2.5.2 可诱导细胞模型中过表达的Tau蛋白的聚集具有序列依赖性 | 第84-93页 |
| 2.5.3 可诱导细胞模型中过表达的Tau蛋白诱导内源Tau蛋白的磷酸化修饰和聚集具有序列依赖性 | 第93-98页 |
| 2.5.4 超高分辨率荧光显微镜观察细胞水平磷酸化修饰Tau蛋白的定位 | 第98-104页 |
| 2.5.5 Tau蛋白异常聚集诱导的细胞凋亡具有序列依赖性 | 第104-109页 |
| 2.6 讨论 | 第109-114页 |
| 第3章 人Tau蛋白和二硫键异构酶相互作用机制的研究 | 第114-148页 |
| 3.1 摘要 | 第114页 |
| 3.2 引言 | 第114-116页 |
| 3.3 实验器材 | 第116-118页 |
| 3.3.1 实验材料 | 第116-117页 |
| 3.3.2 仪器 | 第117-118页 |
| 3.4 实验方法 | 第118-125页 |
| 3.4.1 载体构建 | 第118-120页 |
| 3.4.2 蛋白质的表达和纯化 | 第120-121页 |
| 3.4.3 生物信息学方法预测PDI与Tau蛋白相互作用时的关键位点 | 第121-122页 |
| 3.4.4 ThT荧光法检测Tau244-372纤维化进程的动力学 | 第122-123页 |
| 3.4.5 等温滴定量热法测定Tau蛋白和PDI的相互作用 | 第123-124页 |
| 3.4.6 透射电子显微镜观察PDI对Tau蛋白形成纤维形态的影响 | 第124页 |
| 3.4.7 免疫印迹检测PDI对Tau蛋白磷酸化的影响 | 第124-125页 |
| 3.4.8 免疫荧光检测PDI对Tau蛋白磷酸化和聚集的影响 | 第125页 |
| 3.5 实验结果 | 第125-146页 |
| 3.5.1 生物信息学方法预测PDI与Tau蛋白相互作用的关键位点位于催化结构域 | 第125-128页 |
| 3.5.2 PDI催化结构域的半胱氨酸是关键的相互作用位点 | 第128-134页 |
| 3.5.3 体外水平PDI及其半胱氨酸突变体可以抑制Tau蛋白的聚集 | 第134-139页 |
| 3.5.4 细胞水平PDI及其半胱氨酸突变体可以抑制Tau蛋白的磷酸化修饰 | 第139-144页 |
| 3.5.5 细胞水平PDI及其半胱氨酸突变体可以抑制Tau蛋白的聚集 | 第144-146页 |
| 3.6 讨论 | 第146-148页 |
| 参考文献 | 第148-161页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文目录 | 第161-162页 |
| 致谢 | 第162页 |
