中文摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-13页 |
第一章 前言 | 第14-42页 |
1.1 胞内菌作为活疫苗载体的研究概况 | 第14-26页 |
1.1.1 减毒活疫苗载体在预防感染性疾病和治疗癌症中的应用 | 第14-17页 |
1.1.2 沙门氏菌毒力与沙门氏菌免疫 | 第17-20页 |
1.1.3 沙门氏菌作为载体传递异源抗原 | 第20-23页 |
1.1.4 沙门氏菌作为活疫苗载体的应用 | 第23-25页 |
1.1.5 沙门氏菌载体在抗肿瘤治疗中的应用 | 第25-26页 |
1.2 流感病毒概述 | 第26-34页 |
1.2.1 A型流感病毒的宿主范围 | 第27-28页 |
1.2.2 A型流感病毒的进化 | 第28-30页 |
1.2.3 A型流感病毒的致病机理 | 第30页 |
1.2.4 流感病毒感染的社会影响和防治措施 | 第30-31页 |
1.2.5 流感疫苗 | 第31-34页 |
1.3 乙肝病毒概述 | 第34-40页 |
1.3.1 乙肝病毒感染引起的疾病及药物治疗 | 第36-37页 |
1.3.2 乙肝病毒感染的基因治疗 | 第37-38页 |
1.3.3 基因疗法抵御乙肝病毒的作用机理 | 第38-40页 |
1.4 研究目的与意义 | 第40-42页 |
第二章 实验材料和实验方法 | 第42-61页 |
2.1 生物材料 | 第42页 |
2.2 实验设备和仪器 | 第42-43页 |
2.3 实验材料和试剂 | 第43-44页 |
2.3.1 分子生物学相关实验材料和试剂 | 第43页 |
2.3.2 细胞生物学相关实验材料和试剂 | 第43-44页 |
2.3.3 蛋白质分析相关实验材料和试剂 | 第44页 |
2.3.4 病毒学与动物学相关实验材料和试剂 | 第44页 |
2.4 分子克隆实验 | 第44-49页 |
2.4.1 大肠杆菌DH5α化转感受态细胞的制备及使用 | 第44-45页 |
2.4.2 Red重组法构建沙门氏菌缺失突变株SL368和SL301 | 第45-46页 |
2.4.3 沙门氏菌电转感受态细胞的制备及使用 | 第46-47页 |
2.4.4 质粒的提取 | 第47页 |
2.4.5 抗生素的配制 | 第47-48页 |
2.4.6 限制性酶切和PCR实验 | 第48-49页 |
2.5 细胞水平相关实验 | 第49-52页 |
2.5.1 细胞传代培养 | 第49-50页 |
2.5.2 细胞转染(脂质体转染法) | 第50-51页 |
2.5.3 沙门氏菌感染细胞 | 第51页 |
2.5.4 收获细胞 | 第51页 |
2.5.5 RNA的提取 | 第51-52页 |
2.6 蛋白质水平实验 | 第52-53页 |
2.6.1 SDS-PAGE及Western-blot | 第52-53页 |
2.7 病毒学相关实验 | 第53-55页 |
2.7.1 流感病毒的增殖 | 第53-54页 |
2.7.2 流感病毒滴度测定 | 第54-55页 |
2.7.3 流感病毒的保存 | 第55页 |
2.8 动物学及免疫学相关实验 | 第55-61页 |
2.8.1 动物的免疫及攻毒 | 第55-56页 |
2.8.2 酶联免疫实验(ELISA) | 第56-57页 |
2.8.3 小鼠脾细胞分离 | 第57-58页 |
2.8.4 酶联免疫斑点实验(ELISPOT) | 第58-59页 |
2.8.5 血凝抑制实验 | 第59页 |
2.8.6 HE染色实验 | 第59-60页 |
2.8.7 免疫组化实验 | 第60-61页 |
第三章 以减毒沙门氏菌为载体的新型口服流感疫苗及其免疫效力的研究 | 第61-79页 |
3.1 研究背景 | 第61-63页 |
3.2 实验结果 | 第63-76页 |
3.2.1 沙门氏菌口服流感疫苗Sal-HA-NA的构建 | 第63-66页 |
3.2.2 Sal-HA-NA介导流感病毒抗原蛋白在细胞、小鼠体内传递和表达 | 第66-70页 |
3.2.3 Sal-HA-NA能够诱导机体产生特异性体液免疫应答和黏膜免疫应答 | 第70-71页 |
3.2.4 Sal-HA-NA能够有效增强小鼠特异性细胞免疫应答 | 第71-72页 |
3.2.5 Sal-HA-NA能够提高小鼠针对H5N1亚型和H1N1亚型流感病毒感染的免疫保护 | 第72-76页 |
3.3 讨论 | 第76-79页 |
第四章 以减毒沙门氏菌为载体的新型乙肝治疗药物的研究 | 第79-89页 |
4.1 研究背景 | 第79-80页 |
4.2 实验结果 | 第80-86页 |
4.2.1 miR-122在小鼠体内可有效抑制乙肝病毒基因的表达 | 第80-82页 |
4.2.2 以减毒沙门氏菌为载体的乙肝治疗药物Sal-miR122的构建 | 第82-83页 |
4.2.3 miR-122通过减毒沙门氏菌SL301介导在细胞内的传递和表达 | 第83-85页 |
4.2.4 Sal-miR122能够有效抑制小鼠体内乙肝病毒基因的表达 | 第85-86页 |
4.3 讨论 | 第86-89页 |
研究总结 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-108页 |
缩略词表 | 第108-110页 |
攻读博士期间的学术成果 | 第110-111页 |
致谢 | 第111页 |