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以减毒沙门氏菌为载体的H5N1流感疫苗及乙肝基因治疗药物研究

中文摘要第10-12页
Abstract第12-13页
第一章 前言第14-42页
    1.1 胞内菌作为活疫苗载体的研究概况第14-26页
        1.1.1 减毒活疫苗载体在预防感染性疾病和治疗癌症中的应用第14-17页
        1.1.2 沙门氏菌毒力与沙门氏菌免疫第17-20页
        1.1.3 沙门氏菌作为载体传递异源抗原第20-23页
        1.1.4 沙门氏菌作为活疫苗载体的应用第23-25页
        1.1.5 沙门氏菌载体在抗肿瘤治疗中的应用第25-26页
    1.2 流感病毒概述第26-34页
        1.2.1 A型流感病毒的宿主范围第27-28页
        1.2.2 A型流感病毒的进化第28-30页
        1.2.3 A型流感病毒的致病机理第30页
        1.2.4 流感病毒感染的社会影响和防治措施第30-31页
        1.2.5 流感疫苗第31-34页
    1.3 乙肝病毒概述第34-40页
        1.3.1 乙肝病毒感染引起的疾病及药物治疗第36-37页
        1.3.2 乙肝病毒感染的基因治疗第37-38页
        1.3.3 基因疗法抵御乙肝病毒的作用机理第38-40页
    1.4 研究目的与意义第40-42页
第二章 实验材料和实验方法第42-61页
    2.1 生物材料第42页
    2.2 实验设备和仪器第42-43页
    2.3 实验材料和试剂第43-44页
        2.3.1 分子生物学相关实验材料和试剂第43页
        2.3.2 细胞生物学相关实验材料和试剂第43-44页
        2.3.3 蛋白质分析相关实验材料和试剂第44页
        2.3.4 病毒学与动物学相关实验材料和试剂第44页
    2.4 分子克隆实验第44-49页
        2.4.1 大肠杆菌DH5α化转感受态细胞的制备及使用第44-45页
        2.4.2 Red重组法构建沙门氏菌缺失突变株SL368和SL301第45-46页
        2.4.3 沙门氏菌电转感受态细胞的制备及使用第46-47页
        2.4.4 质粒的提取第47页
        2.4.5 抗生素的配制第47-48页
        2.4.6 限制性酶切和PCR实验第48-49页
    2.5 细胞水平相关实验第49-52页
        2.5.1 细胞传代培养第49-50页
        2.5.2 细胞转染(脂质体转染法)第50-51页
        2.5.3 沙门氏菌感染细胞第51页
        2.5.4 收获细胞第51页
        2.5.5 RNA的提取第51-52页
    2.6 蛋白质水平实验第52-53页
        2.6.1 SDS-PAGE及Western-blot第52-53页
    2.7 病毒学相关实验第53-55页
        2.7.1 流感病毒的增殖第53-54页
        2.7.2 流感病毒滴度测定第54-55页
        2.7.3 流感病毒的保存第55页
    2.8 动物学及免疫学相关实验第55-61页
        2.8.1 动物的免疫及攻毒第55-56页
        2.8.2 酶联免疫实验(ELISA)第56-57页
        2.8.3 小鼠脾细胞分离第57-58页
        2.8.4 酶联免疫斑点实验(ELISPOT)第58-59页
        2.8.5 血凝抑制实验第59页
        2.8.6 HE染色实验第59-60页
        2.8.7 免疫组化实验第60-61页
第三章 以减毒沙门氏菌为载体的新型口服流感疫苗及其免疫效力的研究第61-79页
    3.1 研究背景第61-63页
    3.2 实验结果第63-76页
        3.2.1 沙门氏菌口服流感疫苗Sal-HA-NA的构建第63-66页
        3.2.2 Sal-HA-NA介导流感病毒抗原蛋白在细胞、小鼠体内传递和表达第66-70页
        3.2.3 Sal-HA-NA能够诱导机体产生特异性体液免疫应答和黏膜免疫应答第70-71页
        3.2.4 Sal-HA-NA能够有效增强小鼠特异性细胞免疫应答第71-72页
        3.2.5 Sal-HA-NA能够提高小鼠针对H5N1亚型和H1N1亚型流感病毒感染的免疫保护第72-76页
    3.3 讨论第76-79页
第四章 以减毒沙门氏菌为载体的新型乙肝治疗药物的研究第79-89页
    4.1 研究背景第79-80页
    4.2 实验结果第80-86页
        4.2.1 miR-122在小鼠体内可有效抑制乙肝病毒基因的表达第80-82页
        4.2.2 以减毒沙门氏菌为载体的乙肝治疗药物Sal-miR122的构建第82-83页
        4.2.3 miR-122通过减毒沙门氏菌SL301介导在细胞内的传递和表达第83-85页
        4.2.4 Sal-miR122能够有效抑制小鼠体内乙肝病毒基因的表达第85-86页
    4.3 讨论第86-89页
研究总结第89-90页
参考文献第90-108页
缩略词表第108-110页
攻读博士期间的学术成果第110-111页
致谢第111页

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