摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 引言 | 第12-25页 |
1.1 概述 | 第12页 |
1.2 病原学 | 第12-16页 |
1.2.1 背景 | 第12-13页 |
1.2.2 病原分类地位 | 第13页 |
1.2.3 AMDV的形态结构和理化特征 | 第13-14页 |
1.2.4 AMDV毒株及培养特性 | 第14页 |
1.2.5 AMDV分子生物学特征 | 第14-16页 |
1.3 AD的流行病学 | 第16-18页 |
1.3.1 AD的宿主 | 第16-17页 |
1.3.2 AD传播方式 | 第17-18页 |
1.4 AMDV的致病机制 | 第18-19页 |
1.5 AD临诊症状 | 第19-20页 |
1.6 AD病理变化 | 第20-21页 |
1.7 AD诊断方法 | 第21-23页 |
1.7.1 病原分离鉴定 | 第21页 |
1.7.2 血清学诊断方法 | 第21-22页 |
1.7.3 分子生物学诊断方法 | 第22-23页 |
1.8 AD的防治 | 第23页 |
1.9 研究目的与意义 | 第23-25页 |
2 材料与方法 | 第25-36页 |
2.1 材料 | 第25-27页 |
2.1.1 试验动物 | 第25页 |
2.1.2 细胞、菌种及感染动物组织病料的采集 | 第25页 |
2.1.3 主要生物制剂和化学试剂 | 第25-26页 |
2.1.4 主要仪器与设备 | 第26页 |
2.1.5 使用溶液及其配制 | 第26-27页 |
2.2 试验方法 | 第27-36页 |
2.2.1 AMDV的分离、鉴定及基因组进化分析 | 第27-30页 |
2.2.2 AMDV分离株致病性 | 第30-33页 |
2.2.3 水貂阿留申病对流免疫电泳检测方法的建立 | 第33页 |
2.2.4 利用环介导等温扩增技术(LAMP)检测AMDV方法的建立及应用 | 第33-36页 |
3 结果与分析 | 第36-65页 |
3.1 AMDV分离、鉴定及基因序列分析 | 第36-48页 |
3.1.1 现地AMDV感染水貂的临诊主要表现 | 第36页 |
3.1.2 CIEP鉴定结果 | 第36页 |
3.1.3 病毒分离培养 | 第36-37页 |
3.1.4 PCR鉴定 | 第37-38页 |
3.1.5 病毒基因组PCR扩增 | 第38-39页 |
3.1.6 基因测序及其拼接 | 第39页 |
3.1.7 部分NS1的基因组特征及进化规律 | 第39-42页 |
3.1.8 VP2基因及其编码的蛋白序列特征及进化规律 | 第42-48页 |
3.2 分离株AMDV-HLJ致病性 | 第48-59页 |
3.2.1 分离株TCID50测定 | 第48页 |
3.2.2 AMDV人工感染动物临诊主要症状 | 第48-49页 |
3.2.3 AMDV感染水貂大体病变 | 第49-51页 |
3.2.4 AMDV感染水貂主要组织病理变化 | 第51-57页 |
3.2.5 AMDV感染水貂组织抗原检测 | 第57-58页 |
3.2.6 AMDV实验感染水貂病毒的分离鉴定 | 第58-59页 |
3.3 AMDV对流免疫电泳检测方法的建立 | 第59-61页 |
3.3.1 抗原电镜检测结果 | 第59-60页 |
3.3.2 抗原工作浓度优化 | 第60页 |
3.3.3 抗原对比试验 | 第60-61页 |
3.3.4 抗原特异性检测 | 第61页 |
3.4 环介导等温扩增技术(LAMP)检测AMDV方法的建立及应用 | 第61-65页 |
3.4.1 LAMP引物的设计 | 第61-62页 |
3.4.2 利用设计引物扩增AMDV基因组 | 第62页 |
3.4.3 反应条件优化 | 第62-64页 |
3.4.4 LAMP检测结果的判定 | 第64页 |
3.4.5 应用建立的LAMP方法检测现地样品 | 第64-65页 |
4 讨论 | 第65-73页 |
4.1 AMDV分离鉴定及基因组序列分析 | 第65-66页 |
4.2 AMDV-HLJ分离株对水貂的致病性 | 第66-68页 |
4.3 水貂阿留申病对流免疫电泳检测方法建立 | 第68-70页 |
4.4 可视化LAMP检测AMDV方法的建立及其应用 | 第70-73页 |
5 结论 | 第73-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-84页 |
附录 | 第84-86页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第86页 |