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水貂阿留申病毒分离鉴定及其致病性研究和诊断方法的建立

摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 引言第12-25页
    1.1 概述第12页
    1.2 病原学第12-16页
        1.2.1 背景第12-13页
        1.2.2 病原分类地位第13页
        1.2.3 AMDV的形态结构和理化特征第13-14页
        1.2.4 AMDV毒株及培养特性第14页
        1.2.5 AMDV分子生物学特征第14-16页
    1.3 AD的流行病学第16-18页
        1.3.1 AD的宿主第16-17页
        1.3.2 AD传播方式第17-18页
    1.4 AMDV的致病机制第18-19页
    1.5 AD临诊症状第19-20页
    1.6 AD病理变化第20-21页
    1.7 AD诊断方法第21-23页
        1.7.1 病原分离鉴定第21页
        1.7.2 血清学诊断方法第21-22页
        1.7.3 分子生物学诊断方法第22-23页
    1.8 AD的防治第23页
    1.9 研究目的与意义第23-25页
2 材料与方法第25-36页
    2.1 材料第25-27页
        2.1.1 试验动物第25页
        2.1.2 细胞、菌种及感染动物组织病料的采集第25页
        2.1.3 主要生物制剂和化学试剂第25-26页
        2.1.4 主要仪器与设备第26页
        2.1.5 使用溶液及其配制第26-27页
    2.2 试验方法第27-36页
        2.2.1 AMDV的分离、鉴定及基因组进化分析第27-30页
        2.2.2 AMDV分离株致病性第30-33页
        2.2.3 水貂阿留申病对流免疫电泳检测方法的建立第33页
        2.2.4 利用环介导等温扩增技术(LAMP)检测AMDV方法的建立及应用第33-36页
3 结果与分析第36-65页
    3.1 AMDV分离、鉴定及基因序列分析第36-48页
        3.1.1 现地AMDV感染水貂的临诊主要表现第36页
        3.1.2 CIEP鉴定结果第36页
        3.1.3 病毒分离培养第36-37页
        3.1.4 PCR鉴定第37-38页
        3.1.5 病毒基因组PCR扩增第38-39页
        3.1.6 基因测序及其拼接第39页
        3.1.7 部分NS1的基因组特征及进化规律第39-42页
        3.1.8 VP2基因及其编码的蛋白序列特征及进化规律第42-48页
    3.2 分离株AMDV-HLJ致病性第48-59页
        3.2.1 分离株TCID50测定第48页
        3.2.2 AMDV人工感染动物临诊主要症状第48-49页
        3.2.3 AMDV感染水貂大体病变第49-51页
        3.2.4 AMDV感染水貂主要组织病理变化第51-57页
        3.2.5 AMDV感染水貂组织抗原检测第57-58页
        3.2.6 AMDV实验感染水貂病毒的分离鉴定第58-59页
    3.3 AMDV对流免疫电泳检测方法的建立第59-61页
        3.3.1 抗原电镜检测结果第59-60页
        3.3.2 抗原工作浓度优化第60页
        3.3.3 抗原对比试验第60-61页
        3.3.4 抗原特异性检测第61页
    3.4 环介导等温扩增技术(LAMP)检测AMDV方法的建立及应用第61-65页
        3.4.1 LAMP引物的设计第61-62页
        3.4.2 利用设计引物扩增AMDV基因组第62页
        3.4.3 反应条件优化第62-64页
        3.4.4 LAMP检测结果的判定第64页
        3.4.5 应用建立的LAMP方法检测现地样品第64-65页
4 讨论第65-73页
    4.1 AMDV分离鉴定及基因组序列分析第65-66页
    4.2 AMDV-HLJ分离株对水貂的致病性第66-68页
    4.3 水貂阿留申病对流免疫电泳检测方法建立第68-70页
    4.4 可视化LAMP检测AMDV方法的建立及其应用第70-73页
5 结论第73-74页
致谢第74-75页
参考文献第75-84页
附录第84-86页
攻读博士学位期间发表的学术论文第86页

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