| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 中英文缩写一览表 | 第10-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-15页 |
| 1.1 Cdc42与巨噬细胞、炎症的关系及国内外研究现状 | 第11-12页 |
| 1.2 脓毒症 | 第12-13页 |
| 1.3 本研究目的与意义 | 第13-14页 |
| 1.4 实验设计 | 第14页 |
| 1.5 统计分析 | 第14-15页 |
| 第2章 巨噬细胞中敲除Cdc42加重小鼠对脓毒症的敏感性 | 第15-25页 |
| 2.1 引言 | 第15页 |
| 2.2 材料与方法 | 第15-20页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第15-16页 |
| 2.2.2 小鼠尾巴DNA提取及基因鉴定 | 第16-17页 |
| 2.2.3 盲肠结扎穿刺（Cecal Ligation Puncture, CLP）手术构建脓毒症模型 | 第17页 |
| 2.2.4 取小鼠血清并酶联免疫吸附实验（ELISA）检测 | 第17-18页 |
| 2.2.5 石蜡包埋 | 第18页 |
| 2.2.6 苏木素-伊红（HE）染色 | 第18-19页 |
| 2.2.7 免疫组化（IHC）染色 | 第19-20页 |
| 2.2.8 免疫荧光（IF）染色 | 第20页 |
| 2.3 实验结果 | 第20-25页 |
| 2.3.1 小鼠基因型的鉴定 | 第20页 |
| 2.3.2 脓毒症模型小鼠死亡曲线 | 第20-21页 |
| 2.3.3 脓毒症造模 12h后肺组织HE染色 | 第21-22页 |
| 2.3.4 脓毒症造模 12h后脾脏HE染色 | 第22页 |
| 2.3.5 脾脏巨噬细胞免疫组化及免疫荧光染色 | 第22-24页 |
| 2.3.6 小鼠血清中IL-6 和TNF-α 浓度 | 第24页 |
| 2.3.7 小鼠脾脏体重比 | 第24-25页 |
| 第3章 Cdc42影响巨噬细胞的趋化运动 | 第25-29页 |
| 3.1 引言 | 第25页 |
| 3.2 材料与方法 | 第25-27页 |
| 3.2.1 小鼠血常规检测 | 第25-26页 |
| 3.2.2 收集小鼠腹腔巨噬细胞 | 第26页 |
| 3.2.3 细胞划痕实验 | 第26-27页 |
| 3.3 实验结果 | 第27-29页 |
| 3.3.1 小鼠血常规分析 | 第27页 |
| 3.3.2 腹腔巨噬细胞划痕实验 | 第27-29页 |
| 第4章 Cdc42不影响巨噬细胞的分化 | 第29-38页 |
| 4.1 引言 | 第29页 |
| 4.2 材料与方法 | 第29-34页 |
| 4.2.1 骨髓细胞提取 | 第29-30页 |
| 4.2.2 骨髓单核细胞的体外诱导 | 第30页 |
| 4.2.3 流式细胞术样本制备 | 第30-31页 |
| 4.2.4 RNA提取及逆转录 | 第31-32页 |
| 4.2.5 RT-qPCR | 第32页 |
| 4.2.6 蛋白提取及定量 | 第32-33页 |
| 4.2.7 Western blot | 第33-34页 |
| 4.3 实验结果 | 第34-38页 |
| 4.3.1 骨髓单核细胞体外诱导为M1型巨噬细胞 | 第34-35页 |
| 4.3.2 单核细胞体外诱导分化为M1型巨噬细胞后流式分析 | 第35-36页 |
| 4.3.3 单核细胞体外诱导分化为M1型巨噬细胞后mRNA水平检测 | 第36-37页 |
| 4.3.4 腹腔巨噬细胞体外培养加LPS刺激后蛋白水平的检测 | 第37-38页 |
| 第5章 敲除Cdc42促进巨噬细胞分泌促炎因子 | 第38-42页 |
| 5.1 引言 | 第38页 |
| 5.2 材料与方法 | 第38-39页 |
| 5.2.1 RT-qPCR | 第38-39页 |
| 5.2.2 ELISA检测细胞上清中IL-6 浓度 | 第39页 |
| 5.2.3 Western blot 检测细胞中 TNF-α 的蛋白表达水平 | 第39页 |
| 5.3 实验结果 | 第39-42页 |
| 5.3.1 巨噬细胞体外刺激分化RT-qPCR检测炎症因子 | 第39-40页 |
| 5.3.2 ELISA检测上清IL-6 和TNF-α 浓度 | 第40页 |
| 5.3.3 Western blot检测细胞中TNF-α 的蛋白表达水平 | 第40-42页 |
| 第6章 讨论 | 第42-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-49页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第49-50页 |
| 综述 | 第50-55页 |
| 参考文献 | 第53-55页 |
