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长链非编码RNA SNHG3通过c-Myc/SNHG3/SREBP-1c通路促进肝癌细胞脂质形成的机制研究

摘要第3-6页
abstract第6-9页
第1章 绪论第14-23页
    1.1 研究意义第14页
    1.2 国内外研究现状及发展动态分析第14-23页
        1.2.1 肝癌及其流行病学研究进展第14-15页
        1.2.2 肿瘤细胞脂肪酸代谢异常研究进展第15-16页
        1.2.3 lncRNAs发挥功能的机制第16-18页
        1.2.4 lncRNAs与microRNA的相互作用机制第18-19页
        1.2.5 lncRNAs在HCC的研究进展第19-20页
        1.2.6 snoRNA宿主基因第20-21页
        1.2.7 c-Myc与癌细胞脂质代谢的联系第21-23页
第2章 实验方法第23-44页
    2.1 主要方法第23-38页
        2.1.1 细胞培养第23页
        2.1.2 细胞冻存第23-24页
        2.1.3 细胞传代第24页
        2.1.4 细胞转染实验第24页
        2.1.5 贴壁细胞转染程序第24-25页
        2.1.6 Lipofectamine2000转染(Life technologies)第25页
        2.1.7 磷酸钙转染第25-26页
        2.1.8 PEI转染第26页
        2.1.9 Superfectin转染(普飞生物)第26-27页
        2.1.10 RNA提取第27-28页
        2.1.11 实时定量Real-timePCR第28-30页
        2.1.12 Western blot第30-32页
        2.1.13 细胞甘油三酯检测第32-33页
        2.1.14 组织胆固醇的检测第33-34页
        2.1.15 BCA蛋白定量第34-35页
        2.1.16 油红染色实验第35-36页
        2.1.17 过表达质粒的构建(pcDNA3.0-SNHG3由生工合成)第36页
        2.1.18 感受态细胞的制备第36页
        2.1.19 小量质粒提取(OMEGA小提试剂盒)第36-37页
        2.1.20 大量质粒提取(TIANGEN大提试剂盒)第37页
        2.1.21 统计学分析第37-38页
    2.2 试剂及设备第38-44页
        2.2.1 实验试剂第38-39页
        2.2.2 试剂配制第39-44页
第3章 实验结果第44-61页
    3.1 SNHG3在HCC中表达量显著上升第44-46页
        3.1.1 芯片及数据库分析显示SNHG3在HCC中表达量明显上升第44-45页
        3.1.2 癌组织中SNHG3表达量明显高于癌旁组织第45页
        3.1.3 不同肝癌细胞系中SNHG3表达量均为明显高于正常肝细胞第45-46页
    3.2 SNHG3不具有cis(顺式)调控作用第46-49页
    3.3 SNHG3可能调控HCC细胞脂肪酸代谢途径第49-55页
        3.3.1 GO分析表明SNHG3可能参与肝癌细胞的脂质代谢调节过程第49-50页
        3.3.2 敲除SNHG3基因减少HepG2细胞脂质积累第50-52页
        3.3.3 敲除SNHG3基因减少肝癌细胞HepG2内SREBP-1c表达量第52页
        3.3.4 敲除SNHG3基因降低了转录因子SREBP-1c下游靶基因的表达水平第52-54页
        3.3.5 过表达SNHG3基因促进HepG2细胞脂质积累水平第54页
        3.3.6 过表达SNHG3后HepG2细胞内转录因子SREBP-1C表达影响第54-55页
    3.4 SNHG3可能受c-Myc的转录激活调控第55-58页
        3.4.1 c-Myc转录调控SNHG3的启动子位点预测第55-57页
        3.4.2 SNHG3的表达受转录因子C-Myc的调控第57-58页
        3.4.3 c-Myc可能影响SREBP-1c的转录活性第58页
    3.5 SNHG3结合的microRNA预测第58-60页
    3.6 结论第60-61页
第4章 讨论第61-64页
参考文献第64-67页
攻读学位期间的研究成果第67-68页
致谢第68-69页
综述第69-82页
    参考文献第79-82页

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