摘要 | 第3-6页 |
abstract | 第6-9页 |
第1章 绪论 | 第14-23页 |
1.1 研究意义 | 第14页 |
1.2 国内外研究现状及发展动态分析 | 第14-23页 |
1.2.1 肝癌及其流行病学研究进展 | 第14-15页 |
1.2.2 肿瘤细胞脂肪酸代谢异常研究进展 | 第15-16页 |
1.2.3 lncRNAs发挥功能的机制 | 第16-18页 |
1.2.4 lncRNAs与microRNA的相互作用机制 | 第18-19页 |
1.2.5 lncRNAs在HCC的研究进展 | 第19-20页 |
1.2.6 snoRNA宿主基因 | 第20-21页 |
1.2.7 c-Myc与癌细胞脂质代谢的联系 | 第21-23页 |
第2章 实验方法 | 第23-44页 |
2.1 主要方法 | 第23-38页 |
2.1.1 细胞培养 | 第23页 |
2.1.2 细胞冻存 | 第23-24页 |
2.1.3 细胞传代 | 第24页 |
2.1.4 细胞转染实验 | 第24页 |
2.1.5 贴壁细胞转染程序 | 第24-25页 |
2.1.6 Lipofectamine2000转染(Life technologies) | 第25页 |
2.1.7 磷酸钙转染 | 第25-26页 |
2.1.8 PEI转染 | 第26页 |
2.1.9 Superfectin转染(普飞生物) | 第26-27页 |
2.1.10 RNA提取 | 第27-28页 |
2.1.11 实时定量Real-timePCR | 第28-30页 |
2.1.12 Western blot | 第30-32页 |
2.1.13 细胞甘油三酯检测 | 第32-33页 |
2.1.14 组织胆固醇的检测 | 第33-34页 |
2.1.15 BCA蛋白定量 | 第34-35页 |
2.1.16 油红染色实验 | 第35-36页 |
2.1.17 过表达质粒的构建(pcDNA3.0-SNHG3由生工合成) | 第36页 |
2.1.18 感受态细胞的制备 | 第36页 |
2.1.19 小量质粒提取(OMEGA小提试剂盒) | 第36-37页 |
2.1.20 大量质粒提取(TIANGEN大提试剂盒) | 第37页 |
2.1.21 统计学分析 | 第37-38页 |
2.2 试剂及设备 | 第38-44页 |
2.2.1 实验试剂 | 第38-39页 |
2.2.2 试剂配制 | 第39-44页 |
第3章 实验结果 | 第44-61页 |
3.1 SNHG3在HCC中表达量显著上升 | 第44-46页 |
3.1.1 芯片及数据库分析显示SNHG3在HCC中表达量明显上升 | 第44-45页 |
3.1.2 癌组织中SNHG3表达量明显高于癌旁组织 | 第45页 |
3.1.3 不同肝癌细胞系中SNHG3表达量均为明显高于正常肝细胞 | 第45-46页 |
3.2 SNHG3不具有cis(顺式)调控作用 | 第46-49页 |
3.3 SNHG3可能调控HCC细胞脂肪酸代谢途径 | 第49-55页 |
3.3.1 GO分析表明SNHG3可能参与肝癌细胞的脂质代谢调节过程 | 第49-50页 |
3.3.2 敲除SNHG3基因减少HepG2细胞脂质积累 | 第50-52页 |
3.3.3 敲除SNHG3基因减少肝癌细胞HepG2内SREBP-1c表达量 | 第52页 |
3.3.4 敲除SNHG3基因降低了转录因子SREBP-1c下游靶基因的表达水平 | 第52-54页 |
3.3.5 过表达SNHG3基因促进HepG2细胞脂质积累水平 | 第54页 |
3.3.6 过表达SNHG3后HepG2细胞内转录因子SREBP-1C表达影响 | 第54-55页 |
3.4 SNHG3可能受c-Myc的转录激活调控 | 第55-58页 |
3.4.1 c-Myc转录调控SNHG3的启动子位点预测 | 第55-57页 |
3.4.2 SNHG3的表达受转录因子C-Myc的调控 | 第57-58页 |
3.4.3 c-Myc可能影响SREBP-1c的转录活性 | 第58页 |
3.5 SNHG3结合的microRNA预测 | 第58-60页 |
3.6 结论 | 第60-61页 |
第4章 讨论 | 第61-64页 |
参考文献 | 第64-67页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第67-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
综述 | 第69-82页 |
参考文献 | 第79-82页 |