| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 缩略语 | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 第1章 综述 | 第8-21页 |
| 1.1 前言 | 第8页 |
| 1.2 桔霉素 | 第8-14页 |
| 1.2.1 桔霉素 | 第8-9页 |
| 1.2.2 桔霉素生物合成研究 | 第9-11页 |
| 1.2.3 桔霉素合成相关基因 | 第11-12页 |
| 1.2.4 桔霉素的检测 | 第12-13页 |
| 1.2.5 桔霉素含量的控制 | 第13-14页 |
| 1.3 基因敲除技术 | 第14-19页 |
| 1.3.1 基因敲除的概念 | 第14-15页 |
| 1.3.2 基因敲除的常用技术 | 第15-16页 |
| 1.3.3 丝状真菌基因敲除的技术路线与方法 | 第16-18页 |
| 1.3.4 基因敲除在丝状真菌研究中的应用 | 第18-19页 |
| 1.4 研究目的和意义 | 第19-21页 |
| 第2章 orf3基因缺失株的构建及其功能分析 | 第21-48页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第21页 |
| 2.1.2 酶和试剂 | 第21页 |
| 2.1.3 缓冲溶液 | 第21-22页 |
| 2.1.4 培养基 | 第22-23页 |
| 2.1.5 主要仪器与设备 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-32页 |
| 2.2.1 orf3基因生物信息学分析 | 第23-24页 |
| 2.2.2 打靶载体 | 第24页 |
| 2.2.3 引物序列 | 第24-25页 |
| 2.2.4 红曲菌的培养 | 第25页 |
| 2.2.5 红曲菌原生质体的制备与转化 | 第25-26页 |
| 2.2.6 红曲菌转化子的培养 | 第26页 |
| 2.2.7 红曲菌基因组DNA的小量提取(玻璃珠法) | 第26页 |
| 2.2.8 红曲菌基因组DNA的大量提取(简便法) | 第26-27页 |
| 2.2.9 目的缺失菌株的验证 | 第27-31页 |
| 2.2.10 orf3基因缺失菌株桔霉素和色素分析 | 第31-32页 |
| 2.3 实验结果 | 第32-42页 |
| 2.3.1 orf3基因的生物信息学分析结果 | 第32-33页 |
| 2.3.2 打靶载体pORF3-HPH的转化 | 第33页 |
| 2.3.3 目的缺失菌株的验证 | 第33-36页 |
| 2.3.4 orf3基因缺失株桔霉素和色素分析 | 第36-42页 |
| 2.4 讨论 | 第42-47页 |
| 2.4.1 打靶载体的选择 | 第42页 |
| 2.4.2 原生质体的制备 | 第42-44页 |
| 2.4.3 原生质体的转化与再生 | 第44页 |
| 2.4.4 转化子基因组DNA的提取 | 第44-45页 |
| 2.4.5 orf3基因功能分析 | 第45-47页 |
| 2.5 小结 | 第47-48页 |
| 第3章 ctnE基因缺失株的构建及其功能分析 | 第48-63页 |
| 3.1 红曲菌与质粒 | 第48页 |
| 3.2 实验方法 | 第48-52页 |
| 3.2.1 ctnE基因生物信息学分析 | 第48页 |
| 3.2.2 打靶载体 | 第48-49页 |
| 3.2.3 引物序列 | 第49页 |
| 3.2.4 红曲菌的培养 | 第49页 |
| 3.2.5 红曲菌原生质体的制备与转化 | 第49页 |
| 3.2.6 红曲菌转化子的培养 | 第49页 |
| 3.2.7 红曲菌基因组DNA的小量提取 | 第49页 |
| 3.2.8 红曲菌基因组DNA的大量提取 | 第49页 |
| 3.2.9 目的缺失菌株的验证 | 第49-52页 |
| 3.2.10 ctnE基因缺失株棺霉素和色素分析 | 第52页 |
| 3.3 实验结果 | 第52-60页 |
| 3.3.1 ctnE基因的生物信息学分析结果 | 第52-53页 |
| 3.3.2 打靶载体pCTNE-HPH的转化 | 第53页 |
| 3.3.3 目的缺失菌株的验证 | 第53-56页 |
| 3.3.4 ctnE基因缺失株桔霉素和色素分析 | 第56-60页 |
| 3.4 讨论 | 第60-62页 |
| 3.4.1 打靶载体的选择 | 第60-61页 |
| 3.4.2 ctnE基因功能分析 | 第61-62页 |
| 3.5 小结 | 第62-63页 |
| 第4章 结论与展望 | 第63-64页 |
| 4.1 主要研究结论 | 第63页 |
| 4.2 进一步工作的方向 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 个人简介 | 第70页 |
