| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 中英符号缩略表 | 第10-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-21页 |
| 1.1 国内外葫芦科作物主要病毒病研究 | 第12-16页 |
| 1.1.1 黄瓜花叶病毒（CMV） | 第12-13页 |
| 1.1.2 小西葫芦黄花叶病毒（ZYMV） | 第13-14页 |
| 1.1.3 西瓜花叶病毒（WMV） | 第14-15页 |
| 1.1.4 番木瓜环斑病毒西瓜株系（PRSV-W） | 第15-16页 |
| 1.2 不同检测技术在葫芦科病毒病中的应用 | 第16-19页 |
| 1.2.1 生物学检测 | 第16页 |
| 1.2.2 血清学检测 | 第16-17页 |
| 1.2.3 电子显微镜检测 | 第17页 |
| 1.2.4 核酸杂交技术 | 第17-18页 |
| 1.2.5 RT-PCR及多重PCR技术 | 第18页 |
| 1.2.6 实时荧光定量PCR技术 | 第18-19页 |
| 1.3 本研究的目的及意义 | 第19-21页 |
| 第二章 石河子地区籽用西葫病毒病害发生情况的调查 | 第21-26页 |
| 2.1 调查地点 | 第21页 |
| 2.2 方法 | 第21页 |
| 2.2.1 田间病毒病发生发展调查 | 第21页 |
| 2.2.2 病毒病的症状类型及发病程度的调查 | 第21页 |
| 2.2.3 数据处理 | 第21页 |
| 2.3 结果与分析 | 第21-24页 |
| 2.3.1 籽用西葫芦病毒病症状调查 | 第21-23页 |
| 2.3.2 籽用西葫芦田间病毒病的发生及发展 | 第23页 |
| 2.3.3 不同种植区籽用西葫芦病毒病症状类型及分布 | 第23-24页 |
| 2.3.4 籽用西葫芦病毒病发病率及病情指数的调查 | 第24页 |
| 2.4 结论 | 第24-25页 |
| 2.5 讨论 | 第25-26页 |
| 第三章 籽用西葫芦病毒病原种类的分子鉴定与检测 | 第26-47页 |
| 3.1 材料与方法 | 第26-31页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第26-28页 |
| 3.1.2 常用试剂及溶液的配制 | 第28页 |
| 3.1.3 引物合成 | 第28页 |
| 3.1.4 植物组织总RNA的提取 | 第28-29页 |
| 3.1.5 病毒c DNA合成及PCR反应 | 第29页 |
| 3.1.6 纯化PCR产物 | 第29-30页 |
| 3.1.7 PCR产物的克隆 | 第30页 |
| 3.1.8 PCR产物的连接、转化 | 第30-31页 |
| 3.1.9 重组质粒的鉴定 | 第31页 |
| 3.1.10 病毒的测序及分析 | 第31页 |
| 3.2 结果与分析 | 第31-46页 |
| 3.2.1 RNA提取 | 第31-32页 |
| 3.2.2 病毒种类的分子鉴定 | 第32-40页 |
| 3.2.2.1 RT-PCR检测病毒种类 | 第32-33页 |
| 3.2.2.2 籽用西葫芦病毒分离物与其他分离物同源性分析 | 第33-40页 |
| 3.2.3 籽用西葫芦病毒病毒原的分子检测 | 第40-46页 |
| 3.2.3.1 不同种植区籽用西葫芦病毒病毒原的检出率 | 第40-42页 |
| 3.2.3.2 不同种植区籽用西葫芦病毒病毒原的复合侵染率 | 第42-44页 |
| 3.2.3.3 籽用西葫芦病毒病症状对应的毒原种类 | 第44-46页 |
| 3.3 结论 | 第46页 |
| 3.4 讨论 | 第46-47页 |
| 第四章 多重PCR检测籽用西葫芦种子病毒及热处理脱毒效果分析 | 第47-56页 |
| 4.1 材料和方法 | 第47-50页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第47页 |
| 4.1.2 试剂 | 第47页 |
| 4.1.3.设计并合成引物 | 第47-48页 |
| 4.1.4 建立多重PCR反应体系 | 第48-49页 |
| 4.1.4.1 优化多重PCR反应体系 | 第48页 |
| 4.1.4.2 检测多重PCR灵敏度 | 第48-49页 |
| 4.1.5 检测籽用西葫芦种子带毒率 | 第49页 |
| 4.1.5.1 籽用西葫芦幼苗的培育 | 第49页 |
| 4.1.5.2 RNA提取 | 第49页 |
| 4.1.5.3 多重PCR检测 | 第49页 |
| 4.1.5.4 PCR产物的克隆及测序 | 第49页 |
| 4.1.6 籽用西葫芦种子的热处理 | 第49-50页 |
| 4.1.6.1 热处理方法 | 第49-50页 |
| 4.1.6.2 分析热处理效果的方法 | 第50页 |
| 4.2 结果与分析 | 第50-54页 |
| 4.2.1 多重PCR反应体系的建立 | 第50-52页 |
| 4.2.1.1 多重PCR的特异性 | 第50-51页 |
| 4.2.1.2 多重PCR反应体系的优化 | 第51页 |
| 4.2.1.3 多重PCR的灵敏度 | 第51-52页 |
| 4.2.2 籽用西葫芦种子带毒检测 | 第52-53页 |
| 4.2.3 热处理对籽用西葫芦种子脱毒的影响 | 第53-54页 |
| 4.2.4 温度处理对种子发芽率及发芽势的影响 | 第54页 |
| 4.3 结论 | 第54-55页 |
| 4.4 讨论 | 第55-56页 |
| 第五章 全文小结 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 附录A 常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器 | 第65-67页 |
| 附录B 常用培养基及缓冲液配方 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者 简介 | 第69-70页 |
| 石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 | 第70页 |
