| 摘要 | 第7-8页 |
| abstract | 第8页 |
| 第1章 绪论 | 第12-31页 |
| 1.1 活性维生素D简介 | 第12页 |
| 1.2 活性维生素D的生物转化 | 第12-15页 |
| 1.2.1 链霉菌属的微生物转化 | 第13-14页 |
| 1.2.2 假诺卡氏菌属的微生物转化 | 第14-15页 |
| 1.3 VD羟基化酶简介 | 第15-23页 |
| 1.3.1 人体中的VD羟基化酶 | 第18-20页 |
| 1.3.2 微生物中的VD羟基化酶 | 第20页 |
| 1.3.3 维生素D羟基化酶的克隆表达 | 第20-23页 |
| 1.4 序列比对简介 | 第23-26页 |
| 1.4.1 Needleman-Wunsch算法 | 第24页 |
| 1.4.2 Smith-Waterman算法 | 第24-25页 |
| 1.4.3 FASTA算法 | 第25页 |
| 1.4.4 BLAST算法 | 第25-26页 |
| 1.4.5 CLUSTALW算法 | 第26页 |
| 1.5 同源建模简介 | 第26-27页 |
| 1.6 分子对接简介 | 第27-28页 |
| 1.6.1 分子对接的步骤 | 第27-28页 |
| 1.6.2 分子对接的分类 | 第28页 |
| 1.7 维生素D羟基化酶的同源建模与分子对接 | 第28-29页 |
| 1.8 论文设计思想及主要内容 | 第29-31页 |
| 1.8.1 论文设计思想 | 第29-30页 |
| 1.8.2 论文主要内容 | 第30-31页 |
| 第2章 VD羟基化酶序列的分析 | 第31-38页 |
| 2.1 CGMCC5098菌基因组的提取测序 | 第31-35页 |
| 2.1.1 实验菌株 | 第31页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第31-32页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第32页 |
| 2.1.4 实验方法 | 第32-34页 |
| 2.1.5 实验结果 | 第34-35页 |
| 2.2 VD羟基化酶基因的序列比对 | 第35-37页 |
| 2.2.1 与羟基化酶高保守片段BLAST比对 | 第35-36页 |
| 2.2.2 NCBI数据库在线BLAST比对 | 第36页 |
| 2.2.3 BLAST比对结果 | 第36-37页 |
| 2.3 本章小结 | 第37-38页 |
| 第3章 VD羟基化酶基因异源表达 | 第38-60页 |
| 3.1 VD羟基化酶基因的克隆鉴定 | 第38-43页 |
| 3.1.1 实验菌株 | 第38页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第38页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第38页 |
| 3.1.4 实验方法 | 第38-41页 |
| 3.1.5 实验结果 | 第41-43页 |
| 3.2 表达载体的构建及重组菌的转化 | 第43-51页 |
| 3.2.1 实验仪器 | 第43页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第43-44页 |
| 3.2.3 实验方法 | 第44-49页 |
| 3.2.4 实验结果 | 第49-51页 |
| 3.3 VD羟基化酶的诱导表达及其鉴定 | 第51-55页 |
| 3.3.1 实验菌株 | 第51页 |
| 3.3.2 实验仪器 | 第51页 |
| 3.3.3 实验试剂 | 第51-52页 |
| 3.3.4 实验方法 | 第52-53页 |
| 3.3.5 实验结果 | 第53-55页 |
| 3.4 VD羟基化酶的功能鉴定 | 第55-58页 |
| 3.4.1 实验菌株 | 第55页 |
| 3.4.2 实验仪器 | 第55页 |
| 3.4.3 实验试剂 | 第55页 |
| 3.4.4 实验方法 | 第55-56页 |
| 3.4.5 实验结果 | 第56-58页 |
| 3.5 本章小结 | 第58-60页 |
| 第4章 羟基化酶基因的建模与对接 | 第60-63页 |
| 4.1 建模 | 第60-61页 |
| 4.1.1 建模方法 | 第60页 |
| 4.1.2 建模优化结果 | 第60-61页 |
| 4.2 分子对接 | 第61-62页 |
| 4.2.1 分子对接方法 | 第61页 |
| 4.2.2 分子对接结果 | 第61-62页 |
| 4.3 本章小结 | 第62-63页 |
| 第5章 电子传递链的构建 | 第63-68页 |
| 5.1 实验材料 | 第63-64页 |
| 5.1.1 实验菌株 | 第63页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第63页 |
| 5.1.3 实验试剂 | 第63-64页 |
| 5.2 实验方法 | 第64-65页 |
| 5.2.1 Fdx与Fdr基因序列的查找 | 第64页 |
| 5.2.2 氧传电子链的基因对的扩增及表达载体构建 | 第64页 |
| 5.2.3 重组质粒的导入与重组菌的培养 | 第64-65页 |
| 5.3 实验结果 | 第65-66页 |
| 5.3.1 Fdx和Fdr序列查找结果 | 第65-66页 |
| 5.3.2 重组菌的转化 | 第66页 |
| 5.4 本章小节 | 第66-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-80页 |
| 附录 | 第80-118页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及科研成果 | 第118页 |