中文摘要 | 第8-10页 |
ABSTRCT | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第12-26页 |
1.热应激的研究进展 | 第12-16页 |
1.1 热应激概述 | 第12-13页 |
1.2 热应激对细胞结构和功能的影响 | 第13-14页 |
1.3 热应激对动物机能的影响 | 第14-15页 |
1.4 热应激对猪繁殖性能的影响 | 第15-16页 |
2.自噬的研究概况 | 第16-22页 |
2.1 自噬的分类 | 第16-17页 |
2.2 自噬的过程 | 第17-19页 |
2.3 自噬的生物学功能 | 第19页 |
2.4 自噬的诱因 | 第19-21页 |
2.5 自噬与凋亡的关系 | 第21-22页 |
2.6 自噬与生精过程 | 第22页 |
3.支持细胞分泌的乳酸与精子生成 | 第22-24页 |
3.1 支持细胞乳酸生成的过程 | 第22-23页 |
3.2 支持细胞乳酸生成的调控机制 | 第23-24页 |
3.3 乳酸对生精细胞的作用 | 第24页 |
4.小结 | 第24-26页 |
第二章 引言 | 第26-28页 |
第三章 实验材料与方法 | 第28-41页 |
1.实验材料 | 第28-32页 |
1.1 实验材料 | 第28页 |
1.2 主要仪器和耗材 | 第28-29页 |
1.3 主要相关试剂 | 第29-30页 |
1.4 主要试剂的配制 | 第30-32页 |
2.实验方法 | 第32-40页 |
2.1 支持细胞的原代培养 | 第32-33页 |
2.2 支持细胞热处理 | 第33页 |
2.3 自噬抑制剂处理支持细胞 | 第33-34页 |
2.4 目标基因表达量的测定 | 第34-36页 |
2.5 目标蛋白表达量的测定 | 第36-39页 |
2.6 免疫荧光 | 第39页 |
2.7 凋亡率检测 | 第39-40页 |
2.8 乳酸浓度检测 | 第40页 |
3.统计分析 | 第40-41页 |
第四章 实验结果 | 第41-55页 |
1.支持细胞total RNA完整性检测 | 第41页 |
2.荧光定量PCR的扩增曲线和熔解曲线分析 | 第41-43页 |
2.1 荧光定量PCR的扩增曲线 | 第41-42页 |
2.2 荧光定量PCR的熔解曲线分析 | 第42-43页 |
3.热应激对支持细胞自噬的影响 | 第43-45页 |
3.1 热应激对自溶酶体形成的影响 | 第43-44页 |
3.2 热应激对LC3B-II/LC3B-I(LC3B)表达的影响 | 第44-45页 |
4.热应激诱导的自噬对凋亡的影响 | 第45-46页 |
4.1 热应激诱导的自噬对凋亡率的影响 | 第45页 |
4.2 热应激诱导的自噬对Cleaved- Caspase-3 和CASP3表达的影响 | 第45-46页 |
5.热应激诱导的自噬对支持细胞乳酸合成的影响 | 第46-48页 |
5.1 热应激诱导的自噬对乳酸分泌的影响 | 第46-47页 |
5.2 热应激诱导的自噬对GLUT3、LDHA、MCT1表达的影响 | 第47-48页 |
5.3 热应激诱导的自噬对SLC2A3、LDHA和SLC16A1表达的影响 | 第48页 |
6.LY294002抑制支持细胞自噬 | 第48-50页 |
6.1 LY294002抑制自溶酶体的形成 | 第48-49页 |
6.2 LY294002抑制LC3B-II/I和LC3B的表达 | 第49-50页 |
7.LY294002抑制自噬后对凋亡的影响 | 第50-53页 |
7.1 LY294002对支持细胞凋亡率的影响 | 第50-51页 |
7.2 LY294002对支持细胞Cleaved- Caspase-3 和CASP3表达的影响 | 第51-53页 |
8.LY294002抑制自噬后对乳酸合成的影响 | 第53-55页 |
8.1 LY294002对支持细胞乳酸分泌的影响 | 第53页 |
8.2 LY294002对支持细胞GLUT3、LDHA、MCT1表达的影响 | 第53-54页 |
8.3 LY294002对支持细胞SLC2A3、LDHA和SLC16A1表达的影响 | 第54-55页 |
第五章 讨论 | 第55-58页 |
第六章 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-70页 |
致谢 | 第70页 |