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碳离子辐照对绿藻光合系统的影响及诱变机理研究

致谢第5-7页
摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
第一章 引言第17-40页
    1.1 微藻应用前景及优良藻种的选育第17-23页
        1.1.1 微藻应用前景第17-20页
            1.1.1.1 第三代生物质能源材料-微藻第18-19页
            1.1.1.2 微藻的高附加值代谢产物-色素第19-20页
        1.1.2 优良藻种的选育第20-23页
            1.1.2.1 正向遗传学选育优良藻种第20-22页
            1.1.2.2 反向遗传学选育优良藻种第22-23页
    1.2 重离子辐照育种现状第23-29页
        1.2.1 重离子束概念第23-24页
        1.2.2 重离子束优势第24-25页
            1.2.2.1 重离子束具有尖锐的Bragg峰第24页
            1.2.2.2 重离子束传能线密度(LET)、相对生物学效应(RBE)高第24-25页
        1.2.3 重离子束诱变育种进展(以花色突变和叶色突变为主)第25-26页
        1.2.4 重离子束诱变机理研究进展第26-29页
            1.2.4.1 重离子束的主要攻击目标-DNA分子第26-28页
            1.2.4.2 重离子束等离子辐射对光合系统的影响第28-29页
    1.3 光合系统第29-37页
        1.3.1 光合作用的发生场所-叶绿体第29-30页
        1.3.2 光合作用的排头兵-捕光天线分子第30-34页
            1.3.2.1 捕光天线分子蛋白组成第30-31页
            1.3.2.2 捕光天线的色素组成-叶绿素分子第31-33页
            1.3.2.3 捕光天线的色素组成-叶黄素分子第33-34页
        1.3.3 提高光合效率的途径第34-37页
    1.4 蛋白质组学的研究进展第37-38页
    1.5 本课题的研究目的与意义第38-40页
第二章 碳离子辐照两种绿藻光合系统诱变效应研究第40-65页
    2.1 前言第40页
    2.2 材料方法第40-47页
        2.2.1 藻种选取及培养第40-41页
        2.2.2 碳离子辐照处理第41-42页
        2.2.3 辐照后样品处理第42页
        2.2.4 叶绿素荧光参数测定第42页
        2.2.5 叶绿素定量测定第42页
        2.2.6 叶黄素循环色素定量测定第42-43页
        2.2.7 捕光天线蛋白基因的实时荧光定量PCR第43-46页
            2.2.7.1 引物设计第43-44页
            2.2.7.2 总RNA提取第44-45页
            2.2.7.3 第一链cDNA的合成第45-46页
            2.2.7.4 荧光定量反应第46页
        2.2.8 实验数据分析第46-47页
    2.3 实验结果第47-59页
        2.3.1 不同剂量辐照两种绿藻后短时间内叶绿素荧光指标变化第47-51页
            2.3.1.1 不同剂量辐照后Fv/Fm 48 h内变化第47-48页
            2.3.1.2 不同剂量辐照后 ΦPSII 48 h内变化第48-50页
            2.3.1.3 不同剂量辐照后NPQ 48 h内变化第50-51页
        2.3.2 不同剂量辐照两种绿藻后短时间内叶黄素类色素变化第51-55页
            2.3.2.1 不同剂量辐照后DES 48 h内变化第51-52页
            2.3.2.2 不同剂量辐照后叶绿素含量 48 h内变化第52-53页
            2.3.2.3 不同剂量辐照后叶黄素含量 48 h内变化第53-55页
        2.3.3 不同剂量辐照两种绿藻后 24 h内捕光天线主要蛋白转录水平表达差异第55-59页
            2.3.3.1 不同剂量辐照四尾栅藻后UG11023、CL188624 h内表达差异第55-57页
            2.3.3.2 不同剂量辐照羊角月牙藻后LHCBM5、CL1886、LHCB524 h内基因表达差异第57-59页
    2.4 讨论第59-65页
        2.4.1 不同剂量辐照后 48 h内叶绿素荧光指标变化第59-61页
            2.4.1.1 不同剂量辐照四尾栅藻后 48 h内Fv/Fm、ΦPSII、NPQ变化第59-60页
            2.4.1.2 不同剂量辐照羊角月牙藻后 48 h内Fv/Fm、ΦPSII变化第60-61页
        2.4.2 不同剂量辐照后 48 h内叶黄素循环和叶黄素变化第61-63页
            2.4.2.1 不同剂量辐照羊角月牙藻后 48 h内DES、叶绿素a、叶黄素变化第61-62页
            2.4.2.2 不同剂量辐照四尾栅藻后 48 h内叶绿素a、叶黄素变化第62-63页
        2.4.3 不同剂量辐照后 24 h内捕光天线主要蛋白转录水平表达差异第63-65页
            2.4.3.1 不同剂量辐照后四尾栅藻UG11023、CL188624 h内表达差异第63页
            2.4.3.2 不同剂量辐照羊角月牙藻后LHCBM5、CL1886、LHCB524 h内表达差异第63-65页
第三章 羊角月牙藻突变藻株的光合特性研究第65-80页
    3.1 前言第65页
    3.2 材料与方法第65-68页
        3.2.0 羊角月牙藻培养及碳离子辐照处理第65页
        3.2.1 羊角月牙藻稳定突变藻株的筛选第65-66页
        3.2.2 叶绿素定量检测第66页
        3.2.3 生物量检测第66页
        3.2.4 叶绿素荧光指标检测第66页
        3.2.5 叶黄素循环色素定量检测第66-67页
        3.2.6 透射电镜观察细胞形态第67页
        3.2.7 捕光天线主要蛋白基因表达检测第67-68页
        3.2.8 实验数据统计分析第68页
    3.3 实验结果第68-77页
        3.3.1 羊角月牙藻突变藻株筛选第68-69页
        3.3.2 突变藻株生物量变化第69页
        3.3.3 突变藻株叶绿素荧光指标变化第69-73页
            3.3.3.1 正常培养条件下突变藻株叶绿素荧光变化第69-71页
            3.3.3.2 高光胁迫下突变藻株叶绿素荧光指标变化第71-73页
        3.3.4 高光胁迫下叶黄素循环和叶黄素变化第73-75页
        3.3.5 突变藻株透射电镜形态学观察第75-76页
        3.3.6 突变藻株捕光天线主要蛋白基因表达差异第76-77页
    3.4 讨论第77-80页
        3.4.1 色素受损突变藻株筛选第77-78页
        3.4.2 突变藻株叶绿素荧光变化第78页
        3.4.3 高光胁迫下突变藻株叶黄素循环变化及捕光天线主要蛋白转录水平变化第78-80页
第四章 四尾栅藻突变藻株蛋白组学和光合特性探究第80-113页
    4.1 前言第80页
    4.2 材料与方法第80-86页
        4.2.1 四尾栅藻培养及碳离子辐照处理第80页
        4.2.2 四尾栅藻稳定突变藻株筛选第80-81页
        4.2.3 叶绿素定量测定第81页
        4.2.4 生物量检测第81页
        4.2.5 RNA-seq测序第81-82页
        4.2.6 蛋白质组学iTRAQ检测第82-83页
        4.2.7 叶绿素荧光指标检测第83页
        4.2.8 叶黄素循环色素定量检测第83页
        4.2.9 扫描电镜和透射电镜观察细胞形态第83-84页
        4.2.10 差异蛋白编码基因RT-PCR验证第84-85页
        4.2.11 实验结果统计分析第85-86页
    4.3 实验结果第86-109页
        4.3.1 四尾栅藻突变藻株筛选第86页
        4.3.2 突变藻株生物量变化第86-88页
        4.3.3 突变藻株蛋白组学结果第88-94页
            4.3.3.1 蛋白组学基本鉴定信息第88-89页
            4.3.3.2 差异蛋白统计第89-94页
        4.3.4 突变藻株差异蛋白验证第94-97页
        4.3.5 突变藻株叶绿素荧光指标变化第97-100页
        4.3.6 高光胁迫下突变藻株光合效率变化第100-103页
        4.3.7 高光胁迫下突变藻株叶黄素循环和叶黄素变化第103-107页
        4.3.8 突变藻株扫描电镜和透射电镜观察第107-109页
    4.4 讨论第109-113页
        4.4.1 色素受损突变藻株筛选第109页
        4.4.2 突变藻株蛋白组学研究结果第109-110页
        4.4.3 突变藻株叶绿素荧光变化第110-111页
        4.4.4 高光胁迫下突变藻株叶黄素循环与叶黄素变化第111-113页
第五章 结论与展望第113-116页
    5.1 结论第113-115页
    5.2 展望第115-116页
参考文献第116-133页
附录一 缩略词表第133-134页
附录二 仪器列表第134-135页
作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果第135页

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