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精氨酸脱亚胺酶在钝齿棒杆菌中的克隆表达及其高效合成L-瓜氨酸

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第一章 绪论第9-17页
    1.1 L-瓜氨酸及其生产方法第9-12页
        1.1.1 L-瓜氨酸的结构及其性质第9页
        1.1.2 L-瓜氨酸功能及应用第9-10页
        1.1.3 L-瓜氨酸的生产方法第10-12页
    1.2 精氨酸脱亚胺酶的研究概况第12-14页
        1.2.1 精氨酸脱亚胺酶性质研究第12-14页
        1.2.2 精氨酸脱亚胺酶的功能及应用第14页
    1.3 精氨酸脱亚胺酶生产的国内外研究进展第14-15页
        1.3.1 精氨酸脱亚胺酶生产的国外研究进展第14-15页
        1.3.2 精氨酸脱亚胺酶生产的国内研究进展第15页
    1.4 论文研究内容第15-17页
        1.4.1 论文立题背景和研究意义第15-16页
        1.4.2 论文研究内容第16-17页
第二章 材料与方法第17-26页
    2.1 实验材料第17-20页
        2.1.1 菌种和质粒第17页
        2.1.2 引物设计第17页
        2.1.3 主要实验仪器第17-18页
        2.1.4 培养基与培养条件第18-19页
        2.1.5 主要实验试剂第19页
        2.1.6 相关试剂的配制第19-20页
    2.2 实验方法第20-26页
        2.2.1 E. fecalis基因组的提取第20页
        2.2.2 目的基因的克隆第20页
        2.2.3 重组表达载体和重组菌的构建第20页
        2.2.4 感受态细胞的制备和转化方法第20-21页
        2.2.5 重组菌精氨酸脱亚胺酶的表达第21页
        2.2.6 精氨酸脱亚胺酶的酶活分析第21页
        2.2.7 精氨酸脱亚胺酶的纯化及酶学性质分析第21-22页
        2.2.8 重组菌转化L-瓜氨酸的验证第22-23页
        2.2.9 全细胞转化法生产L-瓜氨酸的条件优化第23-24页
        2.2.10 5-L发酵罐全细胞多批次转化生产L-瓜氨酸第24-25页
        2.2.11 氨基酸分析方法第25-26页
第三章 结果和讨论第26-40页
    3.1 C. crenatum SYPA 5-5/pXMJ19-arcA的构建及其功能验证第26-29页
        3.1.1 E. faecalis精氨酸脱亚胺酶基因arcA的克隆及序列分析第26页
        3.1.2 重组质粒pXMJ19-arcA的构建与转化第26-28页
        3.1.3 arcA在C. crenatum SYPA 5-5中的表达及酶活分析第28-29页
    3.2 精氨酸脱亚胺酶的纯化以及酶学性质研究第29-32页
        3.2.1 精氨酸脱亚胺酶的纯化第29页
        3.2.2 精氨酸脱亚胺酶的最适pH和pH稳定性第29-30页
        3.2.3 精氨酸脱亚胺酶的温度稳定性和温度稳定性第30-31页
        3.2.4 金属离子和EDTA对精氨酸脱亚胺酶活的影响第31页
        3.2.5 精氨酸脱亚胺酶的反应动力学常数测定第31-32页
    3.3 重组菌全细胞转化L-精氨酸生产L-瓜氨酸第32-37页
        3.3.1 重组菌C. crenatum SYPA 5-5/pXMJ19-arcA转化L-瓜氨酸的初步验证第32-34页
        3.3.2 转化温度的优化第34页
        3.3.3 初始转化pH的优化第34-35页
        3.3.4 底物L-精氨酸添加浓度的优化第35-36页
        3.3.5 转化缓冲液浓度的优化第36-37页
        3.3.6 重组菌C. crenatum SYPA 5-5/pXMJ19-arcA全细胞转化生产L-瓜氨酸第37页
    3.4 重组菌5-L发酵罐全细胞转化L-精氨酸生产L-瓜氨酸条件优化第37-40页
        3.4.1 初始诱导时间的优化第37页
        3.4.2 诱导时长的优化第37-38页
        3.4.3 5-L发酵罐全细胞多批次转化底物L-精氨酸生产L-瓜氨酸第38-40页
主要结论和展望第40-42页
    主要结论第40页
    展望第40-42页
致谢第42-43页
参考文献第43-47页
附录:作者在攻读硕士学位论文期间发表的论文第47页

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