| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 上篇文献 综述 | 第13-50页 |
| 第一章 植物病原菌效应分子的毒性功能 | 第14-36页 |
| 1 细菌效应分子 | 第14-20页 |
| 1.1 细菌效应分子抑制植物识别PAMPs | 第15-17页 |
| 1.2 细菌效应分子作用于抗病蛋白复合体 | 第17-19页 |
| 1.3 细菌效应分子抑制MAPK信号通路 | 第19页 |
| 1.4 细菌效应分子干扰植物免疫的其他方式 | 第19-20页 |
| 2 真菌效应分子 | 第20-22页 |
| 2.1 真菌效应分子抑制植物PTI信号途径 | 第20-21页 |
| 2.2 真菌效应分子调控植物激素信号途径 | 第21-22页 |
| 3 卵菌效应分子 | 第22-26页 |
| 3.1 RXLR效应分子家族的毒性功能 | 第22-24页 |
| 3.2 CRN效应分子家族的毒性功能 | 第24页 |
| 3.3 其它卵菌效应分子抑制植物免疫 | 第24-26页 |
| 参考文献 | 第26-36页 |
| 第二章 Nudix蛋白家族与植物免疫 | 第36-50页 |
| 1 Nudix蛋白家族 | 第36-42页 |
| 1.1 Nudix蛋白家族的生物学功能研究 | 第36-39页 |
| 1.2 植物Nudix蛋白调控免疫反应 | 第39-42页 |
| 2 病原菌Nudix效应分子的功能研究 | 第42-45页 |
| 2.1 细菌含Nudix功能域的三型效应分子的初步研究 | 第42页 |
| 2.2 真菌效应分子CtNUDIX调控植物免疫的功能研究 | 第42-43页 |
| 2.3 卵菌RXLR-Nudix效应分子调控植物免疫的功能研究 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 下篇 研究内容 | 第50-140页 |
| 第一章 大豆疫霉无毒效应分子Avr3b是调节植物免疫的NADH和ADP-ribose焦磷酸化酶 | 第52-78页 |
| 1 材料与方法 | 第54-59页 |
| 1.1 供试植物和供试菌株的培养和保存 | 第54-55页 |
| 1.2 Inoue法制备大肠杆菌超级感受态 | 第55页 |
| 1.3 农杆菌冻融感受态细胞的制备及转化 | 第55-56页 |
| 1.4 植物表达系统 | 第56页 |
| 1.5 辣椒疫霉接种烟草叶片测定效应分子的毒性 | 第56-57页 |
| 1.6 Real-Time PCR | 第57页 |
| 1.7 DAB染色检测活性氧积累 | 第57-58页 |
| 1.8 叶片台盼蓝(Trypen blue)染色 | 第58页 |
| 1.9 Nudix水解酶活性分析 | 第58-59页 |
| 2 结果与分析 | 第59-69页 |
| 2.1 Avr3b是RXLR-Nudix类效应分子 | 第59页 |
| 2.2 Avr3b有Nudix水解酶活性 | 第59-62页 |
| 2.3 Avr3b抑制植物的活性氧积累并促进疫霉菌的侵染 | 第62-65页 |
| 2.4 Avr3b的毒性功能依赖于Nudix水解酶的活性 | 第65-68页 |
| 2.5 Avr3b通过Nudix水解酶的活性抑制植物的ETI | 第68-69页 |
| 3 讨论 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 第二章 Avr3b需要植物cyclophilin蛋白激活自身的Nudix水解酶活性 | 第78-112页 |
| 1 材料与方法 | 第80-88页 |
| 1.1 供试植物和供试菌株的培养和保存 | 第80-81页 |
| 1.2 培养基及试剂配制 | 第81页 |
| 1.3 酵母转化系统 | 第81-82页 |
| 1.4 大豆cDNA文库的构建 | 第82页 |
| 1.5 蛋白原核表达 | 第82-84页 |
| 1.6 植物表达系统 | 第84页 |
| 1.7 GST Pull-down体外验证蛋白互作 | 第84-85页 |
| 1.8 植物总蛋白提取操作过程: | 第85-86页 |
| 1.9 PPlase活性测定 | 第86页 |
| 1.10 辣椒疫霉菌丝生物量测定 | 第86页 |
| 1.11 植物基因枪瞬时表达 | 第86-88页 |
| 2 研究结果 | 第88-106页 |
| 2.1 Avr3b在植物体内被激活 | 第88-89页 |
| 2.2 Avr3b互作蛋白的筛选 | 第89-90页 |
| 2.3 Avr3b与GmCYP1在体内和体外互作 | 第90-91页 |
| 2.4 GmCYP1是大豆组成性表达的肽脯氨酰顺反异构酶 | 第91-92页 |
| 2.5 GmCYP1激活Avr3b依赖于PPIase活性 | 第92-96页 |
| 2.6 Avr3b第132位脯氨酸在与GmCYP1的互作过程中具有重要作用 | 第96-100页 |
| 2.7 Avr3b与烟草NbCYP3和NbCYP4蛋白互作 | 第100-102页 |
| 2.8 NbCYP3和NbCYP4是Avr3b在烟草体内的激活因子 | 第102-104页 |
| 2.9 Avr3b与cyclophilin互作具有特异性 | 第104-106页 |
| 3 讨论 | 第106-108页 |
| 参考文献 | 第108-112页 |
| 第三章 GmCYP1参与Avr3b被抗病蛋白Rps3b的识别过程 | 第112-126页 |
| 1 材料与方法 | 第114-115页 |
| 1.1 供试植物和供试菌株的培养和保存 | 第114-115页 |
| 1.2 转录水平分析 | 第115页 |
| 1.3 载体构建 | 第115页 |
| 1.4 植物基因枪瞬时表达 | 第115页 |
| 2 研究结果 | 第115-119页 |
| 2.1 GmCYP1参与了Avr3b被抗病蛋白识别的过程 | 第115-117页 |
| 2.2 Avr3b被抗病蛋白Rps3b识别依赖于GmCYP1的PPlase活性 | 第117-119页 |
| 2.3 132位单氨基酸突变体Avr3bP132A不能被抗病基因识别 | 第119页 |
| 3 讨论 | 第119-121页 |
| 参考文献 | 第121-126页 |
| 第四章 RXLR类Nudix蛋白是疫霉菌基因组中普遍存在的一类效应分子 | 第126-140页 |
| 1 材料与方法 | 第128-130页 |
| 1.1 供试菌株 | 第128页 |
| 1.2 基因组DNA的提取 | 第128页 |
| 1.3 RNA提取 | 第128-129页 |
| 1.4 RNA逆转录 | 第129-130页 |
| 1.5 Inoue法制备大肠杆菌超级感受态 | 第130页 |
| 1.6 农杆菌冻融感受态细胞的制备及转化 | 第130页 |
| 1.7 抑制细胞死亡分析 | 第130页 |
| 2 结果与分析 | 第130-135页 |
| 2.1 RXLR-Nudix在疫霉菌中广泛存在 | 第130-131页 |
| 2.2 疫霉菌RXLR-Nudix效应分子的序列特征 | 第131-132页 |
| 2.3 疫霉菌RXLR-Nudix效应分子存在功能的多样性 | 第132-133页 |
| 2.4 真菌和卵菌两种类型的Nudix效应分子具有不同的进化来源 | 第133-135页 |
| 3 讨论 | 第135-138页 |
| 参考文献 | 第138-140页 |
| 附录表一 引物列表 | 第140-144页 |
| 全文总结及创新点 | 第144-146页 |
| 攻读博士学位期间发表的研究论文 | 第146-148页 |
| 致谢 | 第148页 |
