摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
1 前言 | 第9-22页 |
1.1 植物基因启动子 | 第9-13页 |
1.1.1 植物启动子的基本结构及功能 | 第9-10页 |
1.1.2 启动子类型 | 第10-11页 |
1.1.3 研究启动子常用的方法与技术 | 第11-13页 |
1.2 迷迭香酸 | 第13-18页 |
1.2.1 简介 | 第13-14页 |
1.2.2 迷迭香酸的生物活性 | 第14-16页 |
1.2.3 迷迭香酸的合成方法 | 第16-18页 |
1.3 HPPR的研究进展 | 第18-19页 |
1.3.1 HPPR概述 | 第18-19页 |
1.3.2 HPPR研究现状及展望 | 第19页 |
1.4 转化方法 | 第19-21页 |
1.4.1 农杆菌介导转化法 | 第19-20页 |
1.4.2 基因枪法 | 第20页 |
1.4.3 PEG介导法 | 第20页 |
1.4.4 激光微束穿刺法 | 第20页 |
1.4.5 电击穿孔法 | 第20-21页 |
1.4.6 花粉管通道法 | 第21页 |
1.5 本论文研究的目的与意义 | 第21页 |
1.6 本论文研究的内容 | 第21-22页 |
2 材料与方法 | 第22-37页 |
2.1 材料及试剂 | 第22-25页 |
2.1.1 植物材料 | 第22页 |
2.1.2 菌株和载体 | 第22页 |
2.1.3 培养基及溶液的配置 | 第22-23页 |
2.1.4 实验试剂 | 第23-25页 |
2.1.5 实验主要仪器 | 第25页 |
2.2 实验方法 | 第25-37页 |
2.2.1 植物的处理 | 第25页 |
2.2.2 提取紫苏基因组DNA的方法及检测 | 第25-26页 |
2.2.3 HPPR基因DNA的克隆及测序 | 第26-28页 |
2.2.4 利用Genomic Walking扩增5'端侧翼序列 | 第28-31页 |
2.2.5 目的片段的克隆与测序 | 第31-32页 |
2.2.6 HPPR启动子5'端连续缺失片段引物设计及缺失片段的扩增 | 第32-34页 |
2.2.7 表达载体的构建及农杆菌转化 | 第34-36页 |
2.2.8 HPPR基因启动子驱动GUS基因在烟草中的瞬时表达 | 第36-37页 |
3 结果与讨论 | 第37-53页 |
3.1 分离HPPR基因启动子 | 第37-43页 |
3.1.1 紫苏基因组DNA的提取 | 第37页 |
3.1.2 HPPR基因DNA的克隆 | 第37-38页 |
3.1.3 HPPR基因DNA测序 | 第38-39页 |
3.1.4 基因组步移分离启动子 | 第39-40页 |
3.1.5 目的片段的克隆 | 第40-41页 |
3.1.6 HPPR基因启动子测序 | 第41-43页 |
3.2 HPPR基因启动子区域序列的生物信息学分析 | 第43-45页 |
3.2.1 光调控元件 | 第44页 |
3.2.2 与激素响应相关的顺式元件 | 第44页 |
3.2.3 与抗逆境胁迫相关及其他类型调控元件 | 第44-45页 |
3.3 目的片段与载体结合转入农杆菌 | 第45-50页 |
3.3.1 目的片段的获得 | 第45-47页 |
3.3.2 含目标启动子载体的构建 | 第47-49页 |
3.3.3 表达载体转化农杆菌 | 第49-50页 |
3.4 GUS组织化学染色 | 第50-53页 |
4 结论 | 第53-54页 |
5 展望 | 第54-55页 |
6 参考文献 | 第55-62页 |
7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第62-63页 |
8 致谢 | 第63页 |