| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 1 前言 | 第8-21页 |
| 1.1 Hsp的研究概况 | 第9-11页 |
| 1.1.1 Hsp的发现 | 第9页 |
| 1.1.2 Hsp的分类 | 第9-10页 |
| 1.1.3 Hsp应用研究的意义 | 第10-11页 |
| 1.2 Hsp110的研究概况 | 第11-17页 |
| 1.2.1 Hsp110的分布和分类 | 第12页 |
| 1.2.2 Hsp110(Sse1)的结构特征 | 第12-15页 |
| 1.2.3 Hsp110的生物学功能 | 第15-17页 |
| 1.3 蛋白质表达纯化技术 | 第17-19页 |
| 1.3.1 异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达蛋白原理 | 第17-18页 |
| 1.3.2 蛋白质表达纯化方法 | 第18-19页 |
| 1.4 本课题研究的目的、意义及主要内容 | 第19-21页 |
| 1.4.1 研究目的及意义 | 第19页 |
| 1.4.2 本课题研究内容 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-24页 |
| 2.1.1 实验试剂 | 第21-23页 |
| 2.1.2 实验器材 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-36页 |
| 2.2.1 Sse1定点突变DNA的制备 | 第24-28页 |
| 2.2.2 蛋白质的诱导表达 | 第28-29页 |
| 2.2.3 蛋白质的纯化 | 第29-32页 |
| 2.2.4 蛋白质与多肽结合实验 | 第32-33页 |
| 2.2.5 体内生长测试 | 第33-34页 |
| 2.2.6 蛋白质免疫印迹实验 | 第34-36页 |
| 3 结果与讨论 | 第36-49页 |
| 3.1 定点突变质粒的构建 | 第36-38页 |
| 3.2 Sse1蛋白质高效表达及纯化结果 | 第38-44页 |
| 3.2.1 Sse1蛋白质的表达 | 第38页 |
| 3.2.2 Ni亲和层析柱纯化Sse1 | 第38-41页 |
| 3.2.3 反向Ni亲和柱层析进一步纯化Sse1 | 第41-42页 |
| 3.2.4 阴离子交换柱纯化Sse1 | 第42-44页 |
| 3.3 Sse1及其突变体的的多肽结合 | 第44-45页 |
| 3.4 Sse1中loop12,loop78对其表型生长无影响 | 第45-46页 |
| 3.5 Sse1系列突变体的蛋白表达均正常 | 第46-49页 |
| 4 结论 | 第49-50页 |
| 5 展望 | 第50-51页 |
| 6 参考文献 | 第51-59页 |
| 7 硕士期间发表论文情况 | 第59-60页 |
| 8 致谢 | 第60-61页 |
| 9 附录 | 第61-65页 |