| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 前言 | 第10-16页 |
| 1 病原体简介 | 第10-11页 |
| ·菌体特征 | 第10页 |
| ·培养特征 | 第10-11页 |
| ·毒素特征 | 第11页 |
| 2 流行病学及临床症状特征 | 第11-12页 |
| 3 实验室诊断方法 | 第12-13页 |
| ·传统的诊断方法 | 第12页 |
| ·血清学诊断方法 | 第12-13页 |
| ·分子生物学诊断 | 第13页 |
| 4 气肿疽的危害 | 第13-14页 |
| 5 防治措施 | 第14页 |
| 6 Dot-ELISA简介 | 第14-15页 |
| 7 本试验研究的目的及意义 | 第15-16页 |
| 材料与方法 | 第16-28页 |
| 1 材料 | 第16-21页 |
| ·制备抗原用试剂 | 第16页 |
| ·SDS-PAGE和Western blotting | 第16-19页 |
| ·Dot-ELISA用材料 | 第19页 |
| ·间接ELISA用材料 | 第19-20页 |
| ·PCR和AGID | 第20页 |
| ·试验动物 | 第20页 |
| ·试验仪器 | 第20-21页 |
| 2 方法 | 第21-28页 |
| ·肝片肉汤培养基 | 第21页 |
| ·血液琼脂培养基 | 第21-22页 |
| ·气肿疽梭菌培养 | 第22页 |
| ·生长曲线的测定 | 第22页 |
| ·抗原的初步提取 | 第22页 |
| ·气肿疽梭菌抗原的纯化 | 第22页 |
| ·纯化抗原反应原性分析 | 第22-23页 |
| ·豚鼠的免疫程序 | 第23页 |
| ·动物模型的建立及被检抗原的提取 | 第23页 |
| ·双抗体夹心Dot-ELISA方法的建立 | 第23-24页 |
| ·最佳工作条件的筛选 | 第24-26页 |
| ·特异性试验 | 第26页 |
| ·重复性试验 | 第26页 |
| ·敏感性实验 | 第26页 |
| ·比较试验 | 第26-27页 |
| ·快诊膜对已知病牛样本的检测 | 第27页 |
| ·快速诊断膜的保存期试验 | 第27-28页 |
| 结果 | 第28-43页 |
| 1 气肿疽梭菌培养结果 | 第28-29页 |
| 2 生长曲线的测定 | 第29页 |
| 3 初提抗原的制备及被检抗原含量测定 | 第29页 |
| 4 气肿疽梭菌纯化抗原的洗脱曲线 | 第29-30页 |
| 5 纯化抗原SDS-PAGE分析 | 第30-31页 |
| 6 纯化抗原Western blot分析 | 第31-32页 |
| 7 气肿疽梭菌标准血清制备结果 | 第32-33页 |
| ·豚鼠免疫程序 | 第32页 |
| ·间接ELISA方法条件的优化 | 第32-33页 |
| 8 Dot-ELISA的判定标准 | 第33-34页 |
| 9 Dot-ELISA程序的优化 | 第34-38页 |
| ·血清最适稀释倍数的确定 | 第34页 |
| ·被检抗原最适浓度的确定 | 第34-35页 |
| ·酶标二抗最适稀释倍数的确定 | 第35-36页 |
| ·最适封闭液及封闭时间的确定 | 第36页 |
| ·底物最适显色温度及时间的确定 | 第36页 |
| ·最适包被液的确定 | 第36-37页 |
| ·最适样品稀释液的确定 | 第37页 |
| ·洗涤液及洗涤次数的确定 | 第37页 |
| ·最适反应温度的确定 | 第37页 |
| ·最适反应时间的确定 | 第37页 |
| ·快诊膜的选择 | 第37-38页 |
| 10 特异性试验 | 第38-40页 |
| ·交叉反应试验 | 第38-39页 |
| ·阻断试验 | 第39-40页 |
| 11 重复性试验 | 第40页 |
| 12 敏感性试验 | 第40-41页 |
| 13 比较试验 | 第41页 |
| 14 快诊膜对已知病牛样本的检测 | 第41-42页 |
| 15 诊断膜的保存期试验 | 第42-43页 |
| 讨论 | 第43-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 作者简介 | 第51页 |