| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 引言 | 第10-25页 |
| ·研究的目的与意义 | 第10-11页 |
| ·文献综述 | 第11-24页 |
| ·aiiA 基因及其应用 | 第11-13页 |
| ·TuMV-CP 基因及其应用 | 第13-16页 |
| ·花粉管通道法 | 第16-21页 |
| ·大白菜抗病基因工程研究进展 | 第21-24页 |
| ·研究内容 | 第24页 |
| ·技术路线 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-46页 |
| ·aiiA 基因的获得和植物表达载体的构建 | 第25-30页 |
| ·试验材料 | 第25-26页 |
| ·试验方法 | 第26-30页 |
| ·aiiA 原核表达载体的构建及AiiA 蛋白活性的检测 | 第30-37页 |
| ·实验材料 | 第30-31页 |
| ·试验方法 | 第31-37页 |
| ·花粉管通道法介导aiiA，TuMV-CP 基因转化大白菜 | 第37-39页 |
| ·实验材料 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-39页 |
| ·抗性苗的筛选及分子生物学鉴定 | 第39-46页 |
| ·转化株的筛选 | 第39-40页 |
| ·转基因植株分子生物学鉴定 | 第40-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-61页 |
| ·aiiA 基因的获得和植物表达载体的构建 | 第46-49页 |
| ·aiiA 基因的PCR 扩增 | 第46页 |
| ·aiiA 基因与克隆载体pMD19-T simple vector 的连接 | 第46-47页 |
| ·重组质粒pMD19-T-aiiA 的双酶切鉴定 | 第47页 |
| ·aiiA 基因的序列测定和验证 | 第47-49页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第49页 |
| ·aiiA 原核表达载体的构建及AiiA 蛋白活性的检测 | 第49-55页 |
| ·原核表达载体pET29a-aiiA 的构建 | 第49-50页 |
| ·AiiA 蛋白的融合表达条件的优化 | 第50-52页 |
| ·纯化结果 | 第52-53页 |
| ·AiiA 蛋白活性的检测 | 第53-55页 |
| ·花粉管通道法介导 aiiA,TuMV-CP 基因转化大白菜 | 第55-61页 |
| ·种子收获 | 第55-56页 |
| ·抗性植株的筛选 | 第56页 |
| ·抗性植株的分子生物学检测 | 第56-61页 |
| 4 讨论 | 第61-65页 |
| ·目的基因的选择 | 第61页 |
| ·AiiA 蛋白的可溶性表达 | 第61-62页 |
| ·外源 DNA 片段大小对转化效果的影响 | 第62页 |
| ·花粉管通道技术在大白菜遗传改良中的应用前景 | 第62-64页 |
| ·今后研究方向与展望 | 第64-65页 |
| 5 结论 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 图版 | 第74-75页 |
| 附录 | 第75-76页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第76页 |
