| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 专业词汇中英文对照表 | 第10-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-43页 |
| ·低氧诱导与肿瘤发生 | 第15-22页 |
| ·低氧诱导因子HIF | 第15-16页 |
| ·HIFα亚基的稳定性 | 第16-17页 |
| ·HIF转录调控 | 第17-19页 |
| ·低氧诱导与干细胞 | 第19页 |
| ·低氧诱导与癌症发生 | 第19-21页 |
| ·低氧诱导与肾癌 | 第21-22页 |
| ·肾癌研究进展 | 第22-27页 |
| ·概述 | 第22-23页 |
| ·肾癌的遗传背景 | 第23-24页 |
| ·其他肾脏肿瘤的遗传变异 | 第24-25页 |
| ·肾癌表观遗传变异 | 第25-26页 |
| ·肾癌治疗进展 | 第26-27页 |
| ·SPOP蛋白 | 第27-31页 |
| ·SPOP在蛋白泛素化降解中的功能 | 第27-28页 |
| ·SBC基序 | 第28-30页 |
| ·SPOP在癌症中的功能研究进展 | 第30-31页 |
| ·双特异性磷酸酶DUSP | 第31-39页 |
| ·蛋白磷酸酶 | 第31-34页 |
| ·双特异性磷酸酶与癌症 | 第34-35页 |
| ·PI3K/Akt/mTOR信号通路 | 第35-37页 |
| ·肿瘤抑制因子PTEN | 第37-39页 |
| ·泛素化降解途径 | 第39-43页 |
| 第二章 材料与方法 | 第43-63页 |
| ·实验材料 | 第43-50页 |
| ·细胞系 | 第43页 |
| ·抗体 | 第43-44页 |
| ·质粒 | 第44-45页 |
| ·引物序列 | 第45-46页 |
| ·siRNA序列 | 第46-47页 |
| ·突变氨基酸序列 | 第47页 |
| ·试剂与试剂盒 | 第47-49页 |
| ·常用溶液 | 第49页 |
| ·实验仪器 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-63页 |
| ·质粒构建与扩增 | 第50页 |
| ·TRIzol提取总RNA | 第50-51页 |
| ·实时荧光定量PCR(qPCR) | 第51-52页 |
| ·重组蛋白表达和纯化 | 第52-53页 |
| ·细胞培养 | 第53-54页 |
| ·质粒转染 | 第54页 |
| ·siRNA转染 | 第54页 |
| ·SDS-PAGE电泳与免疫印迹检测蛋白水平 | 第54-57页 |
| ·染色体免疫共沉淀检测染色体与蛋白结合 | 第57-58页 |
| ·荧光素酶报告实验 | 第58-59页 |
| ·免疫共沉淀检测蛋白互作 | 第59页 |
| ·免疫荧光检测蛋白在细胞内定位 | 第59-60页 |
| ·免疫组织化学检测蛋白在组织中的表达水平 | 第60-61页 |
| ·流式细胞技术检测细胞凋亡 | 第61页 |
| ·体内泛素化实验 | 第61页 |
| ·体外泛素化实验 | 第61-62页 |
| ·建立稳定细胞系 | 第62页 |
| ·裸鼠移植瘤实验 | 第62-63页 |
| 第三章 研究结果 | 第63-83页 |
| ·HIFs转录调控SPOP表达 | 第63-67页 |
| ·SPOP蛋白在肾癌组织中过表达 | 第63页 |
| ·ChIP-seq发现SPOP第一内含子上含有HIF-1α的结合位点 | 第63-65页 |
| ·HIFs可以转录调控SPOP表达 | 第65-67页 |
| ·肾癌中SPOP定位于细胞质 | 第67-68页 |
| ·低氧诱导驱使SPOP定位于细胞质中 | 第68-69页 |
| ·累积在细胞质中的SPOP可以促进细胞增殖和肿瘤形成 | 第69-72页 |
| ·细胞质SPOP可以促进细胞增殖 | 第69-70页 |
| ·细胞质SPOP可以促进肿瘤形成 | 第70-71页 |
| ·敲低肾癌中SPOP的表达可以促进肾癌细胞凋亡 | 第71-72页 |
| ·SPOP可以介导PTEN的泛素化降解 | 第72-76页 |
| ·SPOP可以与肿瘤抑制因子PTEN结合 | 第72-75页 |
| ·SPOP可以促进PTEN降解 | 第75页 |
| ·SPOP介导对PTEN的泛素化 | 第75-76页 |
| ·SPOP可以介导ERK磷酸酶DUSP7的泛素化降解 | 第76-79页 |
| ·细胞质中的SPOP是促进肾癌形成的调控枢纽 | 第79-83页 |
| 第四章 分析讨论 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-103页 |
| 附录 | 第103-105页 |
| 附录A HIF-laCMP-seq数据结果 | 第103-104页 |
| 附录B SPOPMATH结构域与PTENSBC肽段结晶结构实验釗R | 第104-105页 |
| 作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第105-106页 |
