| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-13页 |
| 缩略词英文对照表 | 第13-16页 |
| 第一部分：文献综述 | 第16-23页 |
| 1 兰州大尾羊简介 | 第16页 |
| 2 有关脂肪代谢功能的四个重要候选基因概述 | 第16-19页 |
| ·激素敏感性脂肪酶(HSL) | 第16-17页 |
| ·酰基辅酶A：二酰甘油酰基转移酶(DGAT1) | 第17-18页 |
| ·过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR) | 第18-19页 |
| ·促分裂素原活化蛋白激酶(MAPK) | 第19页 |
| 3 cDNA末端快速扩增技术(RACE)概述 | 第19-22页 |
| ·RACE技术反应原理 | 第20-21页 |
| ·SMARTERTM 3'-RACE的原理 | 第20页 |
| ·SMARTERTM 5'-RACE的原理 | 第20-21页 |
| ·RACE技术反应特点 | 第21-22页 |
| 4 本论研究的目的及其意义 | 第22-23页 |
| ·保护兰州大尾羊种质资源 | 第22-23页 |
| ·为兰州大尾羊生产性能和脂肪代谢规律提供重要的理论参考 | 第23页 |
| ·为PPARG和MAPK13脂肪代谢相关基因提供分子生物学参考 | 第23页 |
| 第二部分 试验研究 | 第23-45页 |
| 第一章 PPARG和MAPK13基因全序列的克隆 | 第23-31页 |
| 1 材料及仪器设备 | 第23-25页 |
| ·实验动物 | 第23-24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24-25页 |
| 2 试验步骤及方法 | 第25-29页 |
| ·总RNA的提取及检测 | 第25页 |
| ·总RNA的提取 | 第25页 |
| ·总RNA的检测 | 第25页 |
| ·引物的设计与合成 | 第25-26页 |
| ·RACE末端的获得 | 第26-27页 |
| ·cDNA第一链合成(RACE) | 第26-27页 |
| ·目的cDNA末端快速扩增反应 | 第27页 |
| ·CDS区目的片段的获得 | 第27-29页 |
| ·CDS区目的片段第一链的获得 | 第27-28页 |
| ·CDS区目的片段扩增反应(RT-PCR) | 第28-29页 |
| ·PPARG和MAPK13基因全序列的获得 | 第29页 |
| 3 试验结果 | 第29-31页 |
| ·RNA检测结果与分析 | 第29页 |
| ·纯度检测结果 | 第29页 |
| ·产量检测结果 | 第29页 |
| ·完整性检测结果 | 第29页 |
| ·PPARG和MAPK13基因PCR产物凝胶电泳结果 | 第29-31页 |
| ·拼接结果分析 | 第31页 |
| 第二章 PPARG和MAPK13基因序列生物信息学分析 | 第31-43页 |
| 1 生物信息学分析方法 | 第31-32页 |
| 2 生物信息学分析结果 | 第32-39页 |
| ·兰州大尾羊PPARG和MAPK13基因cDNA序列分析 | 第32-34页 |
| ·兰州大尾羊PPARG和MAPK13蛋白质结构分析 | 第34-39页 |
| ·PPARG和MAPK13基因蛋白理化性质分析 | 第34页 |
| ·PPARG和MAPK13基因蛋白二级结构与三级结构预测及分析 | 第34-36页 |
| ·基因蛋白的保守结构域分析 | 第36-37页 |
| ·基因蛋白跨膜结构与亲疏水性分析 | 第37-38页 |
| ·基因蛋白的亚细胞定位 | 第38页 |
| ·基因蛋白磷酸化与糖基化位点分析 | 第38-39页 |
| 3 兰州大尾羊PPAGR和MAPK13基因及其编码蛋白与其他动物同源性比较 | 第39-43页 |
| 第三章 PPARG和MAPK13基因蛋白SDS-PAGE检测 | 第43-45页 |
| 1 材料及仪器设备 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43页 |
| ·仪器设备 | 第43页 |
| 2 实验步骤和方法 | 第43-44页 |
| ·酶切 | 第43-44页 |
| ·链接 | 第44页 |
| ·转化 | 第44页 |
| ·培养与诱导 | 第44页 |
| ·菌种培养 | 第44页 |
| ·IPTG诱导表达 | 第44页 |
| ·蛋白质抽提 | 第44页 |
| ·提取液电泳 | 第44页 |
| 3 SDS-PAGE结果分析 | 第44-45页 |
| 第三部分：分析讨论 | 第45-47页 |
| 1 PPARG基因及其功能的分析讨论 | 第45-46页 |
| 2 MAPK13基因及其功能的分析讨论 | 第46-47页 |
| 第四部分：结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |
| 硕士期间已发表论文 | 第53页 |
| 硕士期间参与的课题研究 | 第53页 |
