| 缩略词表 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-27页 |
| 1 前言 | 第13-14页 |
| 2 IBDV 致病机理 | 第14-17页 |
| ·IBDV 对体液免疫的影响 | 第14-15页 |
| ·IBDV 对细胞免疫的影响 | 第15页 |
| ·IBDV 对先天免疫的影响 | 第15-17页 |
| 3 PD-1 及配体概述 | 第17-25页 |
| ·PD-1 及其配体的结构 | 第17-18页 |
| ·PD-1 及配体的表达 | 第18-19页 |
| ·PD-1:PD-Ls 通路在中枢免疫和外周免疫反应中传递免疫耐受和免疫抑制信号 | 第19-25页 |
| 4 展望 | 第25-27页 |
| 引言 | 第27-29页 |
| 第二章 鸡 PD-1、PD-L1、PD-L2 及细胞因子 IL-2、IL-6、IFN-γ实时荧光定量 RT-PCR 检测方法的建立 | 第29-44页 |
| 1 材料 | 第29-31页 |
| ·实验动物和菌种 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29-30页 |
| ·主要试剂的配制 | 第30页 |
| ·主要仪器设备 | 第30-31页 |
| 2 方法 | 第31-34页 |
| ·引物设计与合成 | 第31页 |
| ·总 RNA 的提取与反转录 | 第31-32页 |
| ·待测基因及参考基因β-actin 的 PCR 扩增 | 第32页 |
| ·待测基因及参考基因β-actin 的 PCR 产物的回收 | 第32-33页 |
| ·待测基因及参考基因β-actin 与 pMD18-T-simple 克隆载体连接 | 第33页 |
| ·待测基因及参考基因β-actin 重组克隆质粒浓度的测定 | 第33页 |
| ·待测基因及参考基因β-actin 实时荧光定量 RT-PCR 标准曲线的建立 | 第33-34页 |
| ·敏感性、特异性和重复性试验 | 第34页 |
| ·临床样品的应用研究 | 第34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-40页 |
| ·待测基因及参考基因β-actin PCR 结果 | 第34-35页 |
| ·质粒标准品的制备 | 第35页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第35-37页 |
| ·特异性、敏感性及重复性分析 | 第37-39页 |
| ·临床样品的应用研究 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-43页 |
| ·参考基因的选择 | 第40-41页 |
| ·SYBR GreenⅠ实时荧光定量 PCR 的优势 | 第41页 |
| ·标准品的制备 | 第41页 |
| ·SYBR GreenⅠ实时荧光定量 RT-PCR 检测方法的建立 | 第41-43页 |
| 5 小结 | 第43-44页 |
| 第三章 IBDV 感染后 PD-1 及其配体 PD-L1、PD-L2 及细胞因子的表达情况初步研究 | 第44-54页 |
| 1 材料与方法 | 第44-46页 |
| ·实验动物和菌种 | 第44页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第44-45页 |
| ·主要试剂的配制 | 第45页 |
| ·主要仪器设备 | 第45页 |
| ·引物的设计与合成 | 第45页 |
| ·感染后法氏囊内 IBDV 载量检测 | 第45-46页 |
| ·IBDV 感染后鸡 PD-1、PD-L1、PD-L2 和细胞因子 IL-2、IL-6 及 IFN-γ表达水平检测 | 第46页 |
| ·数据分析 | 第46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-48页 |
| ·IBDV 感染后法氏囊内 IBDV 载量检测 | 第46-47页 |
| ·IBDV 感染后鸡 PD-1、PD-L1、PD-L2 表达变化 | 第47-48页 |
| ·IBDV 感染后细胞因子 IL-2、IL-6 及 IFN-γ表达变化 | 第48页 |
| 3 讨论 | 第48-52页 |
| ·PD-1、PD-Ls 的表达变化与免疫抑制的关系 | 第48-52页 |
| 4 小结 | 第52-54页 |
| 全文结论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-68页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第68-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
