| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| 1 希金斯刺盘孢的危害及其侵染特性 | 第12-13页 |
| ·希金斯刺盘孢的危害 | 第12页 |
| ·希金斯刺盘孢侵染过程 | 第12-13页 |
| ·十字花科蔬菜炭疽病的防治 | 第13页 |
| 2 希金斯刺盘孢与拟南芥的互作及其致病机理研究 | 第13-16页 |
| 3 MAP kinase途径研究进展 | 第16-19页 |
| ·概述 | 第16-17页 |
| ·MAPK在植物病原真菌中的研究进展 | 第17-19页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 希金斯刺盘孢Ch-STE7基因的功能分析 | 第20-51页 |
| 1 材料与方法 | 第20-36页 |
| ·试验材料 | 第20-22页 |
| ·供试菌株 | 第20-21页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·抗生素、酶、培养基及其它试剂 | 第21-22页 |
| ·试验仪器 | 第22页 |
| ·试验方法 | 第22-36页 |
| ·希金斯刺盘孢Ch-STE7基因克隆及序列分析 | 第22-23页 |
| ·Ch-STE7基因敲除载体的构建及转化 | 第23-26页 |
| ·Ch-STE7基因敲除转化子的PCR鉴定 | 第26-27页 |
| ·Ch-STE7基因互补载体的构建及转化 | 第27-31页 |
| ·Ch-STE7基因敲除转化子和互补转化子的生物学特性 | 第31-32页 |
| ·Ch-STE7基因敲除转化子和互补转化子的致病性测定 | 第32页 |
| ·Ch-STE7基因表达分析 | 第32-36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-49页 |
| ·希金斯刺盘孢Ch-STE7基因的序列分析 | 第36-37页 |
| ·希金斯刺盘孢Ch-STE7基因敲除载体的构建及转化 | 第37-39页 |
| ·希金斯刺盘孢Ch-STE7基因敲除载体的构建 | 第37-38页 |
| ·含质粒P3300neoCh-STE7农杆菌的获取及鉴定 | 第38-39页 |
| ·农杆菌介导敲除载体转化野生型菌株 | 第39页 |
| ·敲除转化子的PCR验证 | 第39-41页 |
| ·互补载体的构建、鉴定及转化 | 第41-43页 |
| ·Ch-STE7基因启动子的扩增 | 第41页 |
| ·互补载体p3300neoCh-STE7com的构建及鉴定 | 第41-43页 |
| ·农杆菌介导互补载体转化希金斯刺盘孢Ch-STE7基因敲除转化子△Ch-STE7-26 | 第43页 |
| ·Ch-STE7基因敲除转化子和互补转化子的生物学性状观察 | 第43-46页 |
| ·基因敲除和互补转化子的菌落形态观察 | 第43-44页 |
| ·基因敲除和互补转化子的生长速度、产孢量和生物产量测定 | 第44页 |
| ·基因敲除和互补转化子的菌丝尖端形态观察 | 第44-45页 |
| ·基因敲除和互补转化子的附着胞产生情况观察 | 第45-46页 |
| ·Ch-STE7基因敲除转化子和互补转化子的致病性测定 | 第46-48页 |
| ·Ch-STE7基因表达分析 | 第48-49页 |
| ·敲除转化子与互补转化子的RT-PCR验证 | 第48页 |
| ·接种拟南芥后Ch-STE7基因表达动态分析 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49-51页 |
| 第三章 希金斯刺盘孢Ch-SEC1基因的功能分析 | 第51-74页 |
| 1 材料与方法 | 第51-63页 |
| ·试验材料 | 第51-52页 |
| ·供试菌株 | 第51-52页 |
| ·植物材料 | 第52页 |
| ·抗生素、酶、培养基及其它试剂 | 第52页 |
| ·试验仪器及耗材 | 第52页 |
| ·试验方法 | 第52-63页 |
| ·T-DNA突变体库的扩建及PCR鉴定 | 第52-53页 |
| ·突变体的筛选及侵染结构观察 | 第53-54页 |
| ·Southern杂交 | 第54-57页 |
| ·致病力降低突变体G668生物学表型及侵染特性 | 第57-58页 |
| ·Inverse-PCR克隆致病力降低突变体G668T-DNA侧翼序列 | 第58-61页 |
| ·Ch-SEC1基因敲除载体的构建及转化 | 第61-63页 |
| ·Ch-SEC1基因敲除转化子的PCR鉴定 | 第63页 |
| ·Ch-SEC1基因敲除转化子的生物学表型和致病力测定 | 第63页 |
| 2 结果与分析 | 第63-72页 |
| ·T-DNA插入突变体库的扩建及PCR鉴定 | 第63-64页 |
| ·突变体的初步筛选 | 第64-65页 |
| ·Southern杂交 | 第65-66页 |
| ·致病力降低突变体G668生物学表型分析 | 第66-68页 |
| ·G668致病性测定 | 第66-67页 |
| ·G668T-DNA破坏基因不参与拟南芥JA、ET和SA抗病代谢途径 | 第67-68页 |
| ·Inverse-PCR扩增T-DNA插入侧翼序列 | 第68页 |
| ·G668侧翼序列全长及相关生物信息学分析 | 第68-69页 |
| ·希金斯刺盘孢Ch-SEC1基因敲除载体的构建及转化 | 第69-71页 |
| ·希金斯刺盘孢Ch-SEC1基因敲除载体的构建 | 第69-70页 |
| ·含质粒P3300neoCh-SEC1农杆菌及鉴定及转化 | 第70-71页 |
| ·敲除转化子的PCR验证 | 第71-72页 |
| ·敲除转化子的生物学表型及致病性测定 | 第72页 |
| 3 讨论 | 第72-74页 |
| 第四章 结论与展望 | 第74-77页 |
| ·全文结论 | 第74-75页 |
| ·研究展望 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
