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猪流行性腹泻病毒FQ-PCR检测方法的建立及四个毒株全基因测序和进化分析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
引言第9-10页
上篇 猪流行性腹泻研究进展第10-28页
 1 猪流行性腹泻的历史背景第10页
 2 病原学第10-15页
   ·病毒的形态第10-11页
   ·分类地位第11-12页
   ·理化特性第12页
   ·细胞培养特性第12页
   ·病毒基因组及其编码蛋白第12-15页
 3 流行病学第15-18页
 4 诊断方法第18-19页
   ·RT-PCR诊断方法第18页
   ·免疫电镜第18页
   ·免疫荧光第18-19页
   ·酶联免疫吸附试验第19页
   ·实时荧光定量PCR第19页
 5 PED的治疗第19-20页
 6 PED的预防第20-22页
   ·PEDV灭活苗第20页
   ·PEDV弱毒苗第20-22页
 参考文献第22-28页
下篇 试验研究第28-64页
 第一章 PEDV荧光定量检测方法的建立及JS2008毒株在VERO细胞中的定量检测第28-38页
  摘要第28页
  Abstract第28-29页
  1 材料与方法第29-31页
   ·菌株、毒株及病料第29页
   ·主要试剂和仪器第29页
   ·引物和探针的设计及合成第29-30页
   ·重组质粒标准品的制备第30页
   ·FQ-PCR检测方法的建立第30-31页
  2 结果与分析第31-35页
   ·质粒标准品的制备第31-32页
   ·FQ-PCR反应条件的优化第32页
   ·FQ-PCR标准曲线的建立第32-33页
   ·FQ-PCR的敏感性分析第33-34页
   ·FQ-PCR的重复性分析第34页
   ·FQ-PCR的特异性分析第34-35页
   ·细胞培养物中PEDV的定量检测第35页
  3 讨论第35-37页
  参考文献第37-38页
 第二章 PEDV全基因组测序及序列分析第38-64页
  摘要第38页
  Abstact第38-39页
  1 材料与方法第39-46页
   ·细胞和毒株第39页
   ·样品第39页
   ·主要试剂第39-40页
   ·主要仪器设备第40页
   ·引物第40-42页
   ·RNA的提取第42页
   ·反转录第42页
   ·PCR第42页
   ·PCR产物鉴定及纯化回收第42-43页
   ·PCR产物连接与转化第43-44页
   ·重组质粒提取、鉴定及序列测定第44-45页
   ·全基因组序列确定、分析和比较第45页
   ·参考序列第45-46页
  2 结果第46-58页
   ·JS2008、AH2012、JS-HZ2012和SX2012毒株的基因组结构及分析第46-49页
   ·S基因序列分析第49-52页
   ·ORF3进化分析第52-53页
   ·E基因序列分析第53-55页
   ·M基因序列分析第55-56页
   ·N基因进化分析第56-58页
  3 讨论第58-62页
  参考文献第62-64页
全文结论第64-66页
致谢第66页

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